试验六维生素C的定量测定
百度文库 - 让每个人平等地提升自我 姓名姓名:郭沈杰 年级专业年级专业:2012 级生物科学 同组者同组者:蔡萍萍 学号:学号: 实验六实验六维生素维生素C C的定量测定(的定量测定( 2 2,,6-6-二氯酚靛酚滴定法)二氯酚靛酚滴定法) 一、实验目的一、实验目的 掌握 2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C 的原理和方法。 二、实验原理二、实验原理 维生素 C 又称抗坏血酸(ascorbic acid) 。在 1928 年,从牛的肾上腺皮质中提取出的结 晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。 还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐。本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性 溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。 因此可用 2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍 多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。若无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标 准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。 三、实验仪器三、实验仪器 1、新鲜水果 2、电子分析天平 3、吸管 4、容量瓶 11 百度文库 - 让每个人平等地提升自我 5、滴定装置 6、锥形瓶 7、研钵 8、漏斗 四、实验试剂四、实验试剂 1、2%草酸溶液:草酸 2g,溶于 100ml 蒸馏水。 2、1%草酸溶液:草酸 1g,溶于 100ml 蒸馏水。 3、标准维生素 C 液:准确称取维生素 C,溶于 1%草酸溶液,并稀释至 100ml,贮于 棕色瓶中,冷藏,最好临用时配制。此溶液浓度ml. 4、%2,6-二氯酚靛酚溶液:称取 500mg2,6-二氯靛酚溶于 300ml 含有 104mg 碳 酸氢钠的热水中, 冷却,加蒸馏水并稀释至 500ml,滤去不溶物, 贮于棕色瓶中, 冷藏。 每次临用时,以标准抗坏血酸液标定。 五、实验步骤五、实验步骤 (一)样品中抗坏血酸的提取:(一)样品中抗坏血酸的提取: 1、将水果用水洗干净,用滤纸吸取表面水分。 2、称取 5.0g,加 2%草酸试剂 10ml 置研钵中研成浆状。 3、称取浆状物 5.0g,倒入 50ml 容量瓶中,用 2%草酸溶液稀释并定容,混匀,静止 10 分钟,过滤(最初数毫升滤液弃去) ,滤液备用。 (二)滴定:(二)滴定: 1、标准液的滴定:准确吸取标准抗坏血酸溶液于 100ml 锥形瓶中,加 9ml1%草酸溶 液,用 2,6-二氯靛酚滴定至淡红色。滴定终点要保持 15 秒钟。用所用 2,6-二氯靛 22 百度文库 - 让每个人平等地提升自我 酚的体积算出 1ml 染料相当于多少毫克抗坏血酸。 2、样品液的滴定:准确吸取滤液两份,每份10ml,分别放入两个 100ml 锥形瓶中, 滴定方法同上。 注意事项:注意事项: 1、滴定过程宜迅速,一般不超过2min。 2、 滴定所用染料一般不应少于1ml 或多于 4ml, 如果样品中含抗坏血酸太高或太低时, 可酌量增减样液。 3、研磨时要尽量研磨成浆状物。 六、实验结果六、实验结果 将新鲜水果捣成浆状 滴定前稀释: 33 百度文库 - 让每个人平等地提升自我 实验结果计算: 1、按下式计算 100 样品中含抗血酸的毫克数 m=V*T/W*100 2、V=滴定时所用染料数 V(ml)123平均值 ml 3、T=每毫升染料氧化抗血酸质量 T=1mg 4、W=10ml 样液相当于含样品的质量数 W 5g 5g10ml1000 1000 mg 5g 10ml1g /ml50ml3 5、计算 100mg 样品中含抗坏血酸的毫克数: 44 百度文库 - 让每个人平等地提升自我 m V T0.453ml1mg /ml 100 100mg 0.1359mg 1000 W mg 3 七、实验分析七、实验分析 (1)本实验为定量实验,采用滴定的方法,用染料 2,6-二氯酚靛酚钠盐滴定含有维生 素 C 的样液。维生素 C 能够还原染料 2,6-二氯酚靛酚钠盐,且染料 2,6-二氯酚靛酚钠盐 在酸性环境中显红色,还原后无色。这样到达滴定终点时,染料2,6-二氯酚靛酚钠盐恰好 反应完全, 在多加一滴, 就会显红色。 因此, 当溶液稍显红色且不退色时, 即到达滴定终点。 (2)在实验过程中,存在许多导致实验误差的地方。 一是研磨时,如果研磨不充分,会产生实验误差。 二是浆液的称量和转移,由于转移时部分液体会留在研钵中,会产生实验误差。 三是过滤时,由于研磨不充分,会有许多固体沉淀物中的维生素 C 未被提取出来,这些 沉淀将会留在滤纸上,会有一部分维生素C 损失掉,此外算得的W 值中未将滤纸上残存的 样品除去,使得算出的W 值偏大。 四是滴定时,需要一滴一滴进行滴定,且要边滴边摇锥形瓶, 滴定终点需要仔细判别,但 也存在滴定过量和不足(变红后没有继续保持,停止滴定,过一段时间后红色消失,没有到 达实验终点)的情况,会产生实验误差。 此为还有因滴定时间和染料用量的多少产生的误差。 八、实验思考八、实验思考 1.注意事项: ①2,6-二氯酚靛酚钠盐溶液要节约使用。多余的,洁净的要回收。 ②此滴定管为微量滴定管,最大刻度为 2ml。 ③滴定过程宜迅速,最好不要超过 2min 55 百度文库 - 让每个人平等地提升自我 2. 2,6-二氯酚靛酚滴定法测定 Vc含量的优缺点? 答:2,6-二氯酚靛酚滴定法简单易行,但药品价格昂贵。同时,由于许多瓜果都 含有花青素、叶绿素等色素物质,其某些瓜果 Vc提取液若有较深颜色,则可导 致使用 2,6-二氯酚靛酚滴定法测 Vc含量时滴定终点不易辨认,因此 2,6-二氯酚 靛酚滴定法适宜滴定柑橘、苹果等花青素含量较低的果品。 3.此实验测定误差的可能来源? 答:滴定终点的判定;Vc 在提取过程中的氧化分解;提取液中含有的其他色素 或物质对标定有影响等。 66