脑出血患者TNF-α的表达及其临床意义
脑出血患者TNF-a的表达及其临床意义 [摘要]目的观察脑出血患者TNF-a蛋白的表达情况,探讨TNF-a蛋白在脑出血患者 中表达特点与脑出血时间的关系和意义。方法应用免疫组化方法检测65例脑出血患者出血 灶周围脑组织TNF-a蛋白的表达。结果65例脑出血灶周边脑组织标本中,TNF- a蛋白阳性 表达率为84. 6%(55/65), 10例正常脑组织中TNF-a蛋白阳性表达率为0(0/10),两者比较有 显著性差异(P24h 88. 9%(16/18),出血组之间比较无差异(P>0. 05) „结论 脑出血急 性期血肿周围组织存在TNF-a高表达,且有大量炎性细胞浸润,以中性粒细胞、淋巴细胞为 主。TNF-a参与了脑出血脑水肿的病理生理过程,从而加重血肿周围脑组织的损害。 [关键词]TNF-a蛋白;脑出血;免疫组化 [中图分类号]R743. 34 [文献标识码]A [文章编号]1673-9701(2010)06-36-02 TNF-a Expression in Intracerebral Hemorrhage and Its Clinical Significance YANG YanlilWEI Maofu2LIU Jingwen2 1. Third Department of Medicine, Dongguan Municipal Humen Hospital, Dongguan 523900, China;2. Department of Pathology, Dongguan Municipal Humen Hospital, Dongguan 523900, China [Abstract] Objective To investigate the expression of TNF-a in intracerebral hemorrhage(IHC) and find out its significance and its correlation with the time of intracerebral hemorrhage. s The TNF-a expression was assessed by immunohistochemistry staining. Results In 65 cases of intracerebral hemorrhage, the positive expression rate of TNF- a was 84. 6%(55/65) and in 10 cases of normal brain tissue, it was 0 (0/10), significantly higher in intracerebral hemorrhage than that in normal brain tissue (P0.05). Conclusion The high TNF- a expression appears in the surrounding tissue of cerebral hematoma after acute cerebral hemorrhage with a large number of inflammatory cell infiltration in it, mainly leukocyte and lymphocyte infiltration. TNF-a may be involved in the pathophysiologic process of brain edema after intracerebral hemorrhage, therefore, aggravating brain damage around hematoma. [Key words] TNF-a ;Intracerebral hemorrhage;Immunohistochemistry 脑出血(ICH)是神经内科很常见的疾病,死亡率和致残率较高。目前,脑出血导致脑水肿的 发病机制尚未完全明了。很多学者认为导致脑水肿的原因与炎性因子密切相关,其中包括肿瘤 坏死因子(TNF-a )o有研究表明TNF-a在脑损伤后表达升高,其升高程度与脑损伤严重程度 关系密切[1] o我们采用免疫组织化学技术对65例脑出血患者和10例正常脑组织中TNF- a 表达的情况进行研究,探讨TNF-a在脑出血灶周的表达特点及意义。 1材料与方法 1. 1标本来源 收集陕西省延安市人民医院和延安大学附属医院2003年1月〜2006年12月期间进行手 术清除血肿的脑出血患者65例,男28例,女37例,年龄25〜83岁,平均48. 6岁。手术时机: 发病24h内手术者47例,24h后手术者18例,正常脑组织10例取自同期住院进行颅内减压的 患者。所有的病人入院时均行头颅影像学检查进行证实。 1. 2试剂及免疫组化染色方法 鼠抗人TNF-a单克隆抗体、抗体稀释液及试剂盒均购自基因公司。其稀释度为1 : 50。 所有标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,4pm连续切片,按二步法进行免疫组化染色, 染色前标本切片进行抗原修复处理,一抗在室温孵育lh,二抗在室温下孵育0. 5h, DAB显色,苏 木素复染。用已知阳性的对照片作TNF-a抗体的阳性对照,用PBS缓冲液代替一抗作阴性对 照。 1. 3判断标准 所有免疫组化片子用奥林帕斯BX50显微镜进行定性和半定量评估。请二个高职称病理医 生在不知道临床信息的情况下独立的对所有免疫组化片子进行评估。阳性判断标准为细胞核 或胞质出现黄色或棕黄色颗粒状,并用阳性片作为对照。每张切片随机选择10个视野,40X10 高倍显微镜下观察计数o参照文献[2]:根据染色强度、阳性细胞百分比分别记分:A:染色强度: 不着色为0分,淡黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分。B:阳性细胞所占百分率:〈5%为0 分,5%〜25%为1分,25%〜50%为2分,50%〜75%为3分,>75%为4分。根据染色强度与阳性细胞 百分比得分之积分为4级,即㈠为0分,弱阳性(+)为1〜2分,阳性(++)为3〜4分,强阳性(+++) 为5〜6分。将AXB作为其染色的计数,只有AXB >3分才算免疫反应阳性,并按乘积分数将 染色结果分为4个等级:-(