脑出血患者TNF-α的表达及其临床意义

脑出血患者TNF-a的表达及其临床意义 ［摘要］目的观察脑出血患者TNF-a蛋白的表达情况，探讨TNF-a蛋白在脑出血患者 中表达特点与脑出血时间的关系和意义。方法应用免疫组化方法检测65例脑出血患者出血 灶周围脑组织TNF-a蛋白的表达。结果65例脑出血灶周边脑组织标本中,TNF- a蛋白阳性 表达率为84. 655/65, 10例正常脑组织中TNF-a蛋白阳性表达率为00/10,两者比较有 显著性差异P0. 01 o TNF-a蛋白在脑出血后不同时间阳性表达率分别为出血后〈24h 83. 039/47,出血后24h 88. 916/18,出血组之间比较无差异P0. 05 „结论 脑出血急 性期血肿周围组织存在TNF-a高表达，且有大量炎性细胞浸润，以中性粒细胞、淋巴细胞为 主。TNF-a参与了脑出血脑水肿的病理生理过程,从而加重血肿周围脑组织的损害。 ［关键词］TNF-a蛋白;脑出血;免疫组化 ［中图分类号］R743. 34 ［文献标识码］A ［文章编号］1673-9701201006-36-02 TNF-a Expression in Intracerebral Hemorrhage and Its Clinical Significance YANG YanlilWEI Maofu2LIU Jingwen2 1. Third Department of Medicine, Dongguan Municipal Humen Hospital, Dongguan 523900, China;2. Department of Pathology, Dongguan Municipal Humen Hospital, Dongguan 523900, China ［Abstract］ Objective To investigate the expression of TNF-a in intracerebral hemorrhageIHC and find out its significance and its correlation with the time of intracerebral hemorrhage. s The TNF-a expression was assessed by immunohistochemistry staining. Results In 65 cases of intracerebral hemorrhage, the positive expression rate of TNF- a was 84. 655/65 and in 10 cases of normal brain tissue, it was 0 0/10, significantly higher in intracerebral hemorrhage than that in normal brain tissue P0. 01. TNF- a positive expression rates were 82. 98 39/47 less than 24h after intracerebral hemorrhage and 88. 916/18 more than 24h after that, with no significant difference between the TNF-a expression and the time of operation after intracerebral hemorrhageP0.05. Conclusion The high TNF- a expression appears in the surrounding tissue of cerebral hematoma after acute cerebral hemorrhage with a large number of inflammatory cell infiltration in it, mainly leukocyte and lymphocyte infiltration. TNF-a may be involved in the pathophysiologic process of brain edema after intracerebral hemorrhage, therefore, aggravating brain damage around hematoma. ［Key words］ TNF-a ；Intracerebral hemorrhage;Immunohistochemistry 脑出血ICH是神经内科很常见的疾病,死亡率和致残率较高。目前，脑出血导致脑水肿的 发病机制尚未完全明了。很多学者认为导致脑水肿的原因与炎性因子密切相关，其中包括肿瘤 坏死因子TNF-a o有研究表明TNF-a在脑损伤后表达升高，其升高程度与脑损伤严重程度 关系密切［1］ o我们采用免疫组织化学技术对65例脑出血患者和10例正常脑组织中TNF- a 表达的情况进行研究，探讨TNF-a在脑出血灶周的表达特点及意义。 1材料与方法 1. 1标本来源 收集陕西省延安市人民医院和延安大学附属医院2003年1月〜2006年12月期间进行手 术清除血肿的脑出血患者65例，男28例，女37例，年龄25〜83岁，平均48. 6岁。手术时机 发病24h内手术者47例,24h后手术者18例，正常脑组织10例取自同期住院进行颅内减压的 患者。所有的病人入院时均行头颅影像学检查进行证实。 1. 2试剂及免疫组化染色方法 鼠抗人TNF-a单克隆抗体、抗体稀释液及试剂盒均购自基因公司。其稀释度为1 50。 所有标本均用10中性福尔马林固定，石蜡包埋,4pm连续切片，按二步法进行免疫组化染色， 染色前标本切片进行抗原修复处理，一抗在室温孵育lh,二抗在室温下孵育0. 5h, DAB显色，苏 木素复染。用已知阳性的对照片作TNF-a抗体的阳性对照，用PBS缓冲液代替一抗作阴性对 照。 1. 3判断标准 所有免疫组化片子用奥林帕斯BX50显微镜进行定性和半定量评估。请二个高职称病理医 生在不知道临床信息的情况下独立的对所有免疫组化片子进行评估。阳性判断标准为细胞核 或胞质出现黄色或棕黄色颗粒状,并用阳性片作为对照。每张切片随机选择10个视野,40X10 高倍显微镜下观察计数o参照文献［2］根据染色强度、阳性细胞百分比分别记分A染色强度 不着色为0分，淡黄色为1分,黄色为2分，棕黄色为3分。B阳性细胞所占百分率〈5为0 分,5〜25为1分,25〜50为2分,50〜75为3分,75为4分。根据染色强度与阳性细胞 百分比得分之积分为4级，即㈠为0分,弱阳性为1〜2分，阳性为3〜4分,强阳性 为5〜6分。将AXB作为其染色的计数，只有AXB 3分才算免疫反应阳性，并按乘积分数将 染色结果分为4个等级-