生物技术制药习题及答案

一、选择填空题 1.酶的主要来源是什么？ 微生物生产。 2.第三代生物技术是什么？ 基因组时代。 3.基因治疗最常用的载体是什么？ 质粒载体和 λ 噬菌体载体。 4.促红细胞生长素基因可在大肠杆菌中表达。 但不能用大肠杆菌工程菌生产人的促红细 胞生产素为什么？ 因为大肠杆菌不能使人的促红细胞生长素糖基化， 人的促红细胞生长素对大肠杆菌有毒 性作用。 5.菌体生存所需能量已菌有氧代谢所需能量在什么情况下产生代谢产物乙酸？ 菌体生长所需能量（大于）菌体有氧代谢所能提供的能量时，菌体往往会产生代谢副产 物乙酸。 6.cDNA 第一链所合成所需的引物是什么？ cDNA 第一条链合成所需引物为 PolyT。 7.基因工程制药在选择基因表达系统时首先考虑什么？ 表达产物的功能。 8.为了减轻工程菌代谢负荷，提高外源基因表达水平可采取什么措施？ 将宿主细胞生长和外源基因的表达分成两个阶段。 9.根据中国生物制品规定要求，疫苗出厂需要经过哪些检验？ 理化检定、安全检定、效力检定。 10.基因工程药物化学本质是什么？ 蛋白质。 11.PEG 诱导细胞融合？ PEG 可能与可能与临近膜的水分相结合，使细胞之间只有微笑空间的水分被PEG 取代， 从而降低了细胞表面的极性，导致双脂层的不稳定，使细胞膜发生融合。 12.以大肠杆菌为目的基因表达系统的表达产物，产物位置是什么？ 胞内、周质、胞外。 13.人类第一个基因工程药物是什么？ 重组胰岛素。 14.动物细胞培养的条件是什么？ 温度:哺乳类 37 昆虫 25~28，ph7.2~7.4，通氧量：使 co2 培养箱，不同动物比例不同。 防止污染，基本营养物质：三大营养物质+维生素，激素，促细胞生长因子，渗透压： 大多数 260~320。 15.不属于加工改造抗体的是什么？ 单域抗体。 16.第三代抗体是什么？ 利用基因工程技术制备的基因工程抗体。 17.现代生物技术的标志是什么？ DNA 重组技术。 18.获得目的基因最常用的方法是什么？ 化学合成法、PCR 法（最常用） 、基因文库法、cDNA 文库法。 19.鸟枪法克隆目的基因的战略适用于什么？ 细菌。 20.cDNA 获得目的基因的优点是什么？ 不含内含子。 21.有机相酶反应的优点是什么？ ①增加疏水性底物或产物的溶解度；②热力学平衡向合成方向移动，如酯合成，肽合 成等； ③可抑制有水参与的副反应，如酸酐的水解等； ④酶不溶于有机介质，易于回 收再利用； ⑤容易从低沸点的溶剂中分离纯化产物； ⑥酶的热稳定性提高， pH 的适应 性扩大； ⑦无微生物污染；⑧能测定某些在水介质中不能测定的常数； ⑨固定化酶 方法简单，可以只沉积在载体表面。 22.抗体的发展阶段大致可分为什么？ 第一代抗血清第二代单克隆抗体药物第三代基因工程抗体药物 （多克隆到单克隆到基因 工程） 。 23.生产基因工程药物时对生物材料的质控有什么要求？ 对目的基因、宿主细胞和表达载体都需要严格检查。 24.质粒载体必须具备哪三要素？ 复制子、选择标记、多克隆位点。 25.凝胶过滤层析法依据的原理是什么？ 凝胶层析的固定相是惰性的珠状凝胶颗粒，凝胶颗粒的内部具有立体网状结构，形成很 多孔穴。当含有不同分子大小的组分的样品进入凝胶层析柱后， 各个组分就向固定相的 孔穴内扩散，组分的扩散程度取决于孔穴的大小和组分分子大小。比孔穴孔径大的分子 不能扩散到孔穴内部， 完全被排阻在孔外， 只能在凝胶颗粒外的空间随流动相向下流动， 它们经历的流程短，流动速度快，所以首先流出；而较小的分子则可以完全渗透进入凝 胶颗粒内部，经历的流程长，流动速度慢，所以最后流出。 26.体外培养动物细胞的三种类型是什么？ 贴壁依赖性细胞、非贴壁依赖性细胞、兼性贴壁细胞。 27.将液氮罐中的动物细胞复苏的方法？ 将冻存的细胞快速融化至 37 摄氏度，使细胞冻存时的冰晶快速融化，避免冰晶缓慢融 化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成伤害。 28.能将 IgG 分子水解产生两个抗原结合片段和一个可结晶片段的酶是什么？ 木瓜蛋白酶。 29.单克隆抗体是由哪两个细胞融合而成？ B 细胞与骨髓瘤细胞。 30.第三代基因工程指什么？ 第二代指蛋白质工程。 31.酶和细胞固定化最常用有效的方法是什么？ 包埋法、化学结合法和物理吸附法。 32.真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达。 33.应用最广泛的产酶菌是什么？ 大肠杆菌。 34.大肠杆菌中的基因表达系统是什么？ 外源基因表达系统 pBV220/pET。 35.外援基因在动物细胞与大肠杆菌中表达的主要区别是什么？ 糖基化。 36.用于生产阿尔法干扰素的动物细胞是什么？ Namalum Namalwa 淋巴瘤细胞。 37.基因表达最常用的主宿菌是什么？ 大肠杆菌。 38.筛选杂交瘤细胞选用的培养基是什么？ （HAT）无血清培养基。 39.采用凝胶过滤法分析单克隆抗体最高峰属于什么？ IgG。 40.引选鼠原性的单克隆抗体首要目的是什么？ 降低免疫源性。 41.鼠源性单克隆抗体改造后得到的小分子抗体常用什么？ Fab 片段抗体。 42.血清中具有抗体活性的球蛋白属于什么？ 免疫球蛋白。 43.基因工程的单元操作顺序是什么？ 切接转增检。 44.cho 细胞来源于什么动物？ 仓鼠。 45.学会识别 DNA 片段回纹结构。 cccDNA 共价闭合环状 ocDNA 开环 IDNA 线状迁移速率 cccIoc 。 46.培养的动物细胞需要传代规定。异培体细胞的性质。 47.T4DNA 连接酶是通过形成磷酸二酯键将两个片段连接在一起，底物和关键是什么？ 5 -OH 和 3 –P。 48.工业用酶的生产方法是什么？ 微生物发酵。 49.某质粒带有 lacz 基因与之匹配的筛选方法是在培养基中加什么？ 5-溴-4-氯-3-吲哚基-b-D-半乳糖苷（X-gal） 。 50.人工化学和纯的 na 新形成的核苷酸链的方向？形成5｀末端？3｀末端？ 人工化学合成 DNA 新形成的核苷酸链的合成方向是3’→5’， 合成的 DNA5’末端是 磷 酸酯键，3’末端是-OH。 51.进行 PCR 扩增 DNA 时反应体系应加入什么物质？ 模板 DNA、耐高温的 DNA 聚合酶、引物、PCR 缓冲液、脱氧核苷酸贮备液。 52.细胞培养基分为哪三大类？ 天然培养基、合成培养基和半合成培养基。 53.理想的质粒载体应具备什么条件？ 复制起点、选择性标记、克隆位点。 54.质粒 DNA 的三种类型是什么？ 共价闭合环形 DNA（cccDNA） 、开环 DNA（ocDNA） 、线性分子（IDNA） 。 55.微生物转化中常用的微生物有哪些？ 细菌 、放线菌 和霉菌。 56.生物技术的核心和关键是什么？基础条件是什么？获得最终产物的手段是什么？ 基因工程。细胞工程，发酵工程。 57.PCR 全称是什么？概念。过程。引物。基本操作步骤。 聚合酶链式反应）概念（指在引物指导下由酶催化的对特定模板（克隆或基因组DNA） 的扩增反应，是模拟体内 DNA 复制过程，在体外特异性扩增 DNA 片段的一种技术） 。过 程（变性、退火、延伸） 。引物。基本操作步骤。P12 58.mRNA 两个核糖