胸腺瘤组织中cmyc基因表达及其意义
胸腺瘤组织中c myc基因表达及其意义 【摘要】目的 研究c myc基因在胸腺瘤组织中的表 达,探讨c myc基因与胸腺瘤的发生发展、恶性程度的 关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测c myc在41 例胸腺瘤和18例非肿瘤胸腺组织中的表达,结合胸腺瘤WHO 分型、Masaoka分期,研究c myc基因在胸腺瘤各分型、 分期中的表达情况。结果c myc在胸腺瘤中的阳性表达率 为63. 4%,在非肿瘤胸腺组织中的阳性表达率为16. 7%,两 者间有统计学差异(P <; 0. 01) o c myc在良性胸腺瘤 (A/AB型)和恶性胸腺瘤(B1〜B3型)中的表达分别为30. 0% 和74. 2%,两者有统计学差异(P<;0. 05)o c myc在非侵 袭性胸腺瘤(I期)与侵袭性胸腺瘤(II〜IV期)中的表达 分别为33. 3%和75.9%,两者有统计学差异(P<;0. 05) o 结论c myc与胸腺瘤的发生发展有关;与胸腺瘤的恶性程 度、侵袭性有关。 【关键词】 胸腺瘤c myc WHO分型Masaoka分期 0引言 胸腺瘤是常见的前纵隔肿瘤[1]。随着病程的进展, 其有局部外侵、复发和远处转移等生物学特性,故临床上一 般认为胸腺瘤属于低度恶性或具有潜在恶性倾向的肿瘤 [2]。由于单纯从细胞学形态上很难区分胸腺瘤的良恶性, 所以目前尚缺乏对胸腺瘤恶性程度判断的客观指标。 近年来,利用基因分子生物技术对癌基因进行研究已 成为肿瘤研究的热点。c myc是一种对细胞生长有调节作用 的基因,其在多种肿瘤组织中有表达[3],但在人胸腺瘤组 织中的表达情况未见报道。本研究拟对此进行探讨。 1资料与方法 1. 1标本 选自郑州大学第二附属医院2000年1月〜2004年4 月胸腺瘤切除标本41例。患者男23例,女18例,年龄18〜 78岁,平均42. 3岁。23例合并有重症肌无力(MG),按Masaoka 分期标准[4]:非侵袭性胸腺瘤(I期)12例,侵袭性胸腺 瘤29例(其中II期15例,III期11例,IV期3例)。按照 WHO分型[5 7]:良性或低度恶性胸腺瘤10例(其中A型 3例,AB型7例),恶性胸腺瘤31例(B1型15例,B2型6 例,B3型10例,C型0例)。取同期18例非胸腺疾病开胸 切除的胸腺组织(先、后天性心脏病等,以下称非肿瘤胸腺 组织)作为对照组,两组一般情况无差异。全部标本经10% 中性福尔马林液固定,常规石蜡包埋组织块。制成4um厚 的连续切片4张,3张供免疫组化染色,1张供HE染色复核 诊断。 1. 2试验方法 鼠抗人c myc单克隆抗体为福州迈新公司提供。应 用免疫组织化学链酶素亲生物蛋白一过氧化物酶(SP)法检 测c myc的表达。免疫组织化学实验步骤按试剂盒说明书 进行,用PBS代替一抗做阴性对照。 1. 3结果判断 细胞核或胞浆呈棕黄色或黄色者为阳性细胞。在400 倍视野下任意选择5个视野,每个视野计数200个细胞,细 胞无阳性反应或阳性细胞数<; 1%为(-),阳性细胞数 (+)o用已知阳性片作阳性对照,用PBS液代替一 抗作阴性对照。 1. 4统计方法 采用四格表x2检验。以a =0. 05作为校验标准。 2结果 2. 1 c myc基因在胸腺瘤和非肿瘤胸腺组织中表达的 比较 c myc基因在18例非肿瘤胸腺组织中阳性表达率为 16. 7%(3/18),在41例胸腺瘤中阳性率为63. 4%(26/41)。两 者有统计学差异(x 2=10. 937, P=0. 001<;0. 01),见表 1。 表lc myc在非瘤胸腺组织和胸腺瘤中的表达(略) 2. 2 c myc基因在不同恶性程度胸腺瘤中的表达 在10例良性或低度恶性(A/AB型)胸腺瘤中有30. 0% (3/10)病例c myc表达阳性,在31例恶性(Bl B3型) 胸腺瘤中有74. 2% (23/31)表达阳性,两者间有统计学差异 (x 2=4. 603, P=0. 032<;0. 05),见表 2。 表2 c myc表达与胸腺瘤WHO分型的关系(略) 2. 3 c myc基因在侵袭性与非侵袭性胸腺瘤中的表达 c myc在Masaoka I期、II期、II[期和IV期的表达分 别为 33. 3%(4/12)、60. 0%(9/15) .90. 9%(10/11)和 100%(3/3) 呈明显的递增趋势。12例非侵袭性(I期)胸腺瘤有33. 3% (4/12)病例c myc表达阳性,29例侵袭性(II〜IV期) 胸腺瘤有75.9% (22/29) c myc表达为阳性,两者有统计 学差异(x 2=4. 911, P=0. 027<;0. 05),见表 3。 表3 c myc表达与胸腺瘤Masaoka分期的关系(略) 2. 4 c myc基因表达与胸腺瘤是否合并MG的关系 c myc在23例合并重症肌无力的胸腺瘤中有52. 2% (12/23) 表达阳性,18例不合并重症肌无力的病例中77. 8%(14/18) 表达为阳性,两者无统计学差异(x 2=2.853, P>;O. 05), 见表4O 表4 c myc基因表达与胸腺瘤是否合并MG的关系 (略) 3讨论 胸腺组织学复杂的结构和细胞的多样化,二十世纪末 以前胸腺瘤曾有过多种组织学分类方法[8],但都和预后没 有很好的相关性。近年来,随着“胸腺瘤来源于胸腺上皮细 胞属于胸腺上皮性肿瘤(Thymic Epithelial Tumors , TETs)”这一观点被越来越多的人接受,按照胸腺瘤组织中 上皮细胞形态分类的WHO组织学分类法(1999年)[5]也被 广泛采用。越来越多的研究[6,7]显示该分类法与预后有较 好的相关性,如A/AB型胸腺瘤很少侵及其他器官,复发率 也很低,B/C型则多复发甚至转移,故认为A/AB型胸腺瘤属 良性或顶多为低度恶性的胸腺瘤,B型胸腺瘤为恶性胸腺瘤, C型为高度恶性的胸腺癌。由于长期没有准确的胸腺瘤预后 判断标准,临床工作中医生们往往采用临床分期方法来判断 病人的预后。关于胸腺瘤的分期方法也很多[4,9,10],但目 前最常用的是Masaoka分期[4]。Masaoka I期胸腺瘤不侵 及周围器官,手术切除率高,预后好,复发率仅有5%, II〜 IV期胸腺瘤为侵袭性胸腺瘤,切除率低、预后较差[11]。本 研究通过检测胸腺瘤组织中c myc的表达,结合上述分类 和分期,了解其与胸腺瘤侵袭性和恶性程度的关系。 c myc基因最早发现于禽类骨髓瘤病毒MC29中, c myc基因位于人类染色体8q24区带上编码一个类丝氨 酸或苏氨酸的磷酸化蛋白质。研究表明,c myc蛋白主要 作用于G1早期和G/S转变,通过调节细胞周期促进细胞增 殖。c myc过度表达可改变细胞内的基因调控,使细胞易于 转化为恶性表型,当合并其他癌基因的活化或抑癌基因失活 时均可加速或启动肿瘤的发生[12] o 研究表明,c myc在慢性胃炎、胃溃疡、轻度不典型 增生、重度不典型增生和早期胃癌中的表达逐渐升高,显示 c myc在肿瘤的发生发展过程中起重要作用[13]。0