VOLAB对于培养实验室一般要求
打造中国最安全实验室 VOLAB对于培养实验室一般要求 一、实验室 组织培养是在无菌条件下进行,需要一定的实验室条件,应具备: (-)化学试验室 用于存放各类化学药品,配制培养基等。需要的物品有: L药品柜存放化学药品。 2. 玻璃器皿柜 存放各类玻璃器皿。 3. 实验台最好是采用具有抑菌能力的实芯理化板台面或环氧树脂等,这是分别 用来安放天平和配制培养基。 4. 通风橱这是用于整体实验室通风和排风的,并且会产生异味的实验最好在通 风橱内操作。 5. 冰箱存放配好的母液和一些需低温保存的药品及植物材料等。 6. 其它天平、水浴锅、酸度计、水池等。 (二)洗涤消毒室 用作器皿的洗刷、消毒、干燥等,配有高压灭菌锅、烘箱、铁架、水池等,也可 与化学实验室合并。 (三)无菌操作室 用于植物材料的消毒、接种、转移、原生质体制备等。要求室内封闭,保持无菌。 并具备以下物品: L超净工作台用于消毒、接种、转移培养材料。 2. 紫外灯 用于空气消毒。 3. 解剖镜用于胚胎培养、茎尖培养时剥取外植体。 4 .低速离心机 用于原生质体制备。 (四)培养室 是供培养物生长的场所,主要有培养架、控温、控光设备等。培养架可分4-5 层,上面安装30 - 40W日光灯照明,每天照明10 -16小时左右,用自动定时 器控制。温度最好保持在15 -25°C左右。此外还可根据需要安置液体培养所需 的摇床、转床等。 附上培养常用药品 培养所需药品主要用于培养基的配制,也有部分用于消毒,主要有以下几类: —)消毋约口口 主要有次氯酸钠、次氯酸钙、双氧水、漂白精片、漠水、硝酸银等。 (二)无机盐类 包括大量元素和微量元素两类,主要的盐类有KNO3、MgSO4・7H2O、 NH4NO3. KH2PO4、CaCI2-2H2Os Fe2 ( SO4 ) 3、Na2HPO4、CuS04、 NaNO3s Na2SO4s ZnS04、MnSO4・4H2O、MnCI2-2H20. KI、H3BO3 等, 无机盐是供外植体吸收的基本营养成分,各有不同作用,如N、P影响蛋白质的 合成,Ca、K、S、Mg影响酶活性等。 (三)有机化合物 主要有蔗糖、维生素类、氨基酸等。其中蔗糖是不可缺少的碳源,也是渗透压调 节物质。维生素的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组 成成分,也是有机氮源。 (四)植物生长调节剂 用于组织培养的主要有生长素、细胞分裂素及赤霉素三大类: L生长素类 主要有0引U朵乙酸(IAA )、蔡乙酸(NAA )、2,4 - D和哪朵丁酸 (IBA ) o 2,4 - D有利愈伤组织生长,NAA、IAA、IBA有利于器官分化。 2.细胞分裂素类 主要有激动素(KT )、6 -苯基腺D票吟(BA )、玉米素(ZT ) 等。其作用是促进细胞分裂与分化,其中KT能明显促进芽的分化而抑制根的形 成。 3.赤霉素 以GA3运用最广泛,有促进不定芽和幼株伸长的作用。 (五)有机附加物 包括人工合成和天然的有机物,常用的有酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植 物组织浸出液。对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中 作为凝固剂,是外植体的支持体,常用浓度为0.5 - 1%O (六)水 培养基用水原则上使用蒸憎水,去离子水等,尤其在对化学成分要求较精确的试 验中。但在组培苗的批量生产中,可选用自来水配制,以降低成本。