人教版高中生物选修三知识点总结详细
选修 3《现代生物科技专题》知识点总结 专题 1基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望, 进行严格的设计, 通过体外 DNA 重组和转基因技术, 赋予生物以新的遗传特性, 创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA 分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA 重组技术。 操作水平:DNA 分子水平 原理:基因重组 优点:1.突破物种界限 2.定向改造生物的遗传特性 (一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点切割,因此具有专一性。 (3)作用的化学键:切割磷酸二酯键 (4)结果:经限制酶切割产生的DNA 片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA 连接酶 (1)作用:将两个具有相同粘性末端的DNA 片段连接起来,形成重组DNA (2)连接的化学键:磷酸二酯键 (3)与 DNA 聚合酶作用的异同: DNA 聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶是连接两个 DNA 片段的末端,形成磷酸二酯键。 DNA 连接酶DNA 聚合酶 不同点连接的 DNA 模板 连接的对象 相同点作用实质 双链 不要模板 2 个 DNA 片段 单链 要模板 单个脱氧核苷酸添加到已存在的单链DNA 片段上 形成磷酸二酯键 化学本质蛋白质 3.“分子运输车”——运载体 (1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA 片段插入。 ③具有标记基因,供重组 DNA 的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是质粒,它是一种环状 DNA 分子。 (3)其它载体:噬菌体、动植物病毒 (二)基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的获取 1.从基因文库中获取(不知道目的基因的核苷酸序列的情况下采用) 2.人工合成。常用方法有:(1)反转录法(已经获得mRNA 的情况下采用) (2)化学合成法(知道目的基因的核苷酸序列、基因比较小的情况下采用) 3.PCR 技术扩增目的基因(知道目的基因两端的核苷酸序列、基因比较大的情况下采用) (1)PCR 的含义:是一项在生物体外复制特定DNA 片段的核酸合成技术。 (2)目的:获取大量的目的基因 (3)原理:DNA 双链复制 (4)过程:第一步:变性,加热至90~95℃DNA 解链为单链;(高温解旋) 第二步:复性,冷却到 55~60℃,引物与两条单链DNA 结合; 第三步:延伸,加热至 70~75℃,热稳定 DNA 聚合酶从引物起始进行互补链的合成。 n (5)特点:指数(2 )形式扩增 第二步:基因表达载体的构建(核心) 1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。 2.组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因 第 1 页 共 8 页 (1)启动子:是一段有特殊结构的DNA 片段,位于基因的首端,是RNA 聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转 录 mRNA。 (2)终止子:也是一段有特殊结构的DNA 片段 ,位于基因的尾端,使转录停止。 (3)标记基因的作用:鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 常用的标记基因是抗生素基因。 第三步:将目的基因导入受体细胞_ 1.转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。 2.常用的转化方法: 将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 农杆菌转化法,其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。 将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 显微注射技术。方法的受体细胞多是 受精卵。 将目的基因导入微生物细胞:感受态细胞法:用 Ca2+ 处理细胞 (使其成为 感受态细胞 , 再将 重组表达载体 DNA 分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混 合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA 分子,完成转化过程) 原核生物作为受体细胞的优点: 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少 第四步:目的基因的检测和表达 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA 上是否插入了目的基因,方法是采用DNA 分子杂交(DNA-DNA)技术。 2.其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是采用分子杂交(DNA-RNA)技术。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是采用抗原—抗体杂交技术。 4.有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如生物抗虫或抗病的鉴定等。 (三)基因工程的应用 基因工程的应用 1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。 2.动物基因工程:提高动物生长速度;改善畜产品品质;用转基因动物生产药物:如乳腺乳腺生物反应器和 膀胱膀胱生物反应器, 方法是将目的基因导入哺乳动物的受精卵受精卵中,使其发育成转基因动物。 3.基因治疗是把正常基因正常基因导入病人的体内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到治疗的目的,这是 治疗遗传病治疗遗传病 最有效的手段最有效的手段。 4.基因诊断:又称为 DNA 诊断,是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常或携带病原体。 (四)蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础, 通过基因修饰或基因合成, 对现有蛋白质 进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。 (基因工程在原则上只能生产自然界已存在 的蛋白质) 转录翻译 蛋白质工程的基本途径:从预期的蛋白质功能出发 设计预期的蛋白质结构 推测应有的氨基酸序列 找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因) ★ 蛋白质工程与基因工程区别 第 2 页 共 8 页 专题 2细胞工程 (一)植物细胞工程 1.植物组织培养技术(1)原理:植物细胞的全能性植物细胞的全能性 全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞 (2)过程:离体离体的植物器官、组织或细胞脱分化脱分化愈伤组织愈伤组织再分化再分化胚状体胚状体幼苗 常用的植物激素生长素生长素和细胞分裂素细胞分裂素。 (3)用途:微型繁殖、作物脱毒(选材应该选择茎尖组织茎尖组织)、制造人工种子、单倍体育种(最大的优点是明显缩明显缩 短育种年限,得到的全为纯种短育种年限,得到的全为纯种)、筛选突变体、细胞产物的工厂化生产。 (4)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 2.植物体细胞杂交技术 (1)原理:细胞膜的流动性、植物细胞的全能性细胞膜的流动性、植物细胞的全能性 (2)过程: 去壁的方法:酶解法酶解法;诱导融合的方法:物理法包括 离心、振动、电激离心、振动、电激等。化学法是用聚乙二醇(聚乙二醇(PEGPEG))作为诱导 剂。 (3)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。克服了远缘杂交不亲和的障碍。 (二)动物细胞工程 1. 动物细胞培养 (1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中, 让这些细胞生长和繁殖。 (2)原理:细胞增殖 (3)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织