催乳素测定标准操作规程
催乳素测定标准操作规程 1检验申请 单独检验项目申请:催乳素测定(缩写PRL);组合项目 申请:女性激素检查组合。临床医生根据需要提出检验申请。 2标本采集与处理 2. 1标本米集 2. 1.1常规静脉采血约2ml,不抗凝,置普通试管中。或采 用含分离胶的真空采血管。也可采集血浆标本,用肝或EDTA 抗凝。 2. 1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识 符。 2. 1. 3急诊标本米集后,在检验申请单上填写标本米集时 间。 2. 1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。 专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以 拒收。 2. 1. 5下列标本为不合格标本 2. 1. 5. 1标本量不足:少于0. 3ml的全血标本,或少于0. 1ml 的血清或血浆。 2. 1. 5. 2对反应吸光度有干扰的标本,包括严重溶血、严 重浑浊的标本。 2. 1. 5. 3无法确认标本与申请单对应关系的。 2. 1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2. 2标本保存 2. 2. 1接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆,避 免溶血。离心必须达到4000rpmX 15min,离心后的血清中不 能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 2. 2.2标本保存时间:室温(15〜25°C)下可稳定8h,普 通冰箱中(2〜8°C)稳定2d,在-20°C最多可保存4周。避 免反复冻融。 2. 2. 3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4〜8°C冰 箱内保存7d。 2.3标本采集的注意事项 2. 3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。 3方法原理 采用双抗体夹心酶联免疫发光分析原理。标本中PRL与包被 在磁性微粒子上的抗PRL抗体结合,再与液相试剂中碱性磷 酸酶标记的抗PRL抗体结合,形成微粒子-羊抗鼠 IgG-鼠McAb-hFSH-羊抗体-ALP夹心型免疫复合物。经磁性 分离,洗涤洗去未结合 物质,加入Lumi-phos*530,经碱性磷酸酶的作用产生光子, 光子的量与结合于微粒子上的酶结合物的量成正比,由多点 校准曲线求得标本中PRL的浓度。 4试剂及其他用品 4. 1试剂:Access催乳素测定试剂包,由美国BECKMAN COULTER公司出品,试剂盒产品号33530o未打开的试剂包 保存于2〜8°C可稳定至有效期,不可冻存。开启的试剂包载 入系统中可使用28do 4. 2试剂盒组分 4. 2. 1微粒子包被珠:包被了羊抗鼠IgG-鼠抗PRL单克隆 抗体复合物的磁性微粒子、含BSA的Tris缓冲液。 4. 2.2液体试剂:碱性磷酸酶标记的抗PRL抗体,含BSA 的Tris缓冲液。o 4. 2.3试剂包即开即用,无须特殊准备。 4.3其他试剂与用品:化学发光底物,清洗缓冲液等。 5校准品与校准模式 5.1校准品:采用Access专用配套催乳素校准液,5个浓 度。有校准卡片。校准结果可溯源至第三国际标准84/500o 5.2校准类型和校准点数目:非线性模式,6个校准点。仪 器根据校准曲线卡片数据(6参数对数拟合曲线)自动建立校 准曲线。 5.3校准周期:在同一批号试剂使用期间校准曲线有效, 但在间隔28d后需要重新校准。每当:①更换试剂批号或出 现质控漂移时;②仪器进行全面保养后;③仪器的重要零件 更换后,进行一次校准。 5.4校准液重建方法:冻干校准液,用ImL蒸馅水复溶,复 溶后的校准液于2〜8°C保存最长不超过5周,或于-20°C最长 保存10周。避免反复冻融。 6质控品与室内质控规则 6. 1质控品米用自备混合血清。 6.2质控液重建方法:液态质控液,即开即用,充分颠倒 混匀,无需特殊准备。 6.3 质控品测定:在每一批标本中测定质控血清一次。 6.4质控规则:采用L-J质控图,以±3s为失控限。标准 差由本室实验数据得出。 6.5如出现失控情况,按室内质控标准操作程序采取各种 有效的纠正措施及时纠正,并在确认重新回复到控制状态后 开始标本检测。 7适用仪器 美国BECKMAN COULTER公司的Dxl 800自动发光免疫分 析仪。 8标本检测步骤 装载试剂一进行校准一进行质控一输入标本检 测项目一加载标本一标 本测定一结果复核一报告。 9主要分析参数 无须输入操作参数,仪器根据预设的分析项目参数和试 剂条码的信息自动进行分析。标本25mo 10结果计算 仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结 果单位以mIU/L或ng/mL表示。换算公式:ng/mL = mIU/LX 0. 047 11检验结果的报告及范围 11.1结果的报告 11.1.1结果经审核后,确认准确无误后发出报告。 11. 1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日 期、时间、操作者和审核者签名,并有与申请单相同的医学 信息。 11. 1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在 报告单上指出。 11.2报告范围:6. 36-4240 mIU/L,超过此范围的结果报 告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明,例如:系根 据标本重新稀释后重复测定的结果。 12操作性能 12. 1 精密度:批内CV 1. 9%〜5. 6%;批间CV 4. 5%〜8. 1%。 12.2 分析范围:6. 36〜4240 mIU/L。 12.3 分析灵敏度:6.36 mIU/L。 12.4方法的有限性及干扰因素:HGH (2.0 mIU/mL). TSH (200MU/L)、FSH (400 mIU/Ml)> hCG (250 IU/mL)在检 测允许的精密度范围内对结果没有影响。甘油三脂 (56. 5mmol/L)> 血红蛋白(10g/L)或胆红素(3. 42mmol/L) 时对试验的干扰少于5%o催乳素的浓度大 于440 000mIU/L时,会出现前带效应。 13参考范围及医学决定水平 参考范围:男性:56〜278 mIU/L 女性:〈50 岁 71 〜566 mIU/L >50 岁 58〜416 mIU/L 14临床意义 14. 1催乳素是单链多肽激素,由垂体前叶产生,它的分泌 受下丘脑的抑制与释放因子调节。催乳素对于乳汁分泌的激 发和维持都有十分重要的作用,哺乳期女性循环中催乳素的 浓度会生理性增高。 14.2高泌乳素血症是男女不孕症或性功能失调的常见原 因。血清泌乳素水平升高是垂体功能失调的重要证据。在无 月经症和溢乳症患者中泌乳素水平升高也具有诊断意义。 14.3病理性高催乳素血症主要见于甲状腺功能低下者和 肾衰竭者;此外,高催乳素血症已知对两性的生育功能都有 损伤,女性可能伴有停经,而男性可能表现为阳萎。 15结果审核以及分析与相关项目的联系 15. 1由资深专业人员负责检验结果的审核。 15.2审核者认真审核每一个测定结果,对发出报告结果的 可靠性负责,并在报告单的审核者处签名。 15.3相关项目:审核与其他女性激素等的关系,如出现与 临床不符甚至相悖的情况,应分析与查找原因。 16有关引用程序与文件 16. 1 Dxl 800自动发