制药工程专业工业微生物实验教学大纲
《工业微生物实验》教学大纲 课程编码:0413101002 课程名称:工业微生物实验 实验总学时/学分:30/2 适用专业:制药工程 开课教研室:生化与制药教研室 一 实验教学的目的和要求 本课程是制药工程专业学生必修的一门专业基础实验课,它是工业微生物学教学的重要组成 部分。 本课程的主要目的:使学生通过实验操作,巩固所学理论知识,使学生掌握工业微生物实验 操作基本技能和基本方法,包括常见工业微生物的形态观察、分类和染色方法;培养基的配制和 灭菌方法;常见工业微生物的培养和计数方法;化学药剂对微生物的抑制效果检测,药品中微生 物种类和数量检测等。在训练学生牢固建立无菌操作观念、扎实掌握微生物实验基本操作技能的 基础上,通过实践与理论相结合,培养学生发现问题、分析问题和解决问题的能力,培养学生实 事求是、严肃认真的科学态度。 本课程的要求:在教师的指导下,学生认真落实微生物实验室微生物污染防治措施,确保实 验室生物安全,正确使用显微镜、生化培养箱、高压蒸汽灭菌器等设备,熟练进行培养基的配置、 微生物纯培养、计数等工作,掌握无菌操作技能,开展链霉素等药品、中药抑菌成分提取液等对 微生物体外生长的影响情况初步测定,药品中微生物种类及含量的初步鉴定检查等工作。 注意实验室卫生和水、电的安全使用,爱护实验室设施,使用设备前要认真了解使用规范, 全面落实实验室管理制度。 要求学生通过预习,明确实验目的、了解实验原理和内容、步骤和注意事项。实验中要求规 范操作,细心观察,客观记录实验现象。实验后认真处理实验数据,总结实验中的得失,完成实 验报告。 二 实验项目名称和学时分配 序号 实验项目名称 学时 必/选做 1 光学显微镜的使用及常见工业微生物形态观察 3 必做 2 细菌的革兰氏染色法 3 必做 3 微生物的大小测量 3 必做 4 实验器具的干热灭菌与湿热灭菌 3 必做 5 培养基的配制、分装和灭菌 3 必做 6 微生物的接种和培养 3 必做 7 稀释涂布平板菌落计数法 3 必做 8 化学药剂对微生物生长的影响 3 必做 9 药品中霉菌总数的测定 3 从这4个 实验中选 做2个 10 药品中控制菌一大肠杆菌的检验 3 11 药品无菌检查法 3 12 抗生素效价的微生物测定 3 合计(必做学时) 30 三 单项实验的内容和要求 实验(一)光学显微镜的使用及常见工业微生物形态观察 1. 实验内容 (1) 显微镜的使用; (2) 大肠杆菌、酵母菌、青霉菌等工业微生物的形态观察。 2. 实验要求 (1) 熟练掌握光学显微镜的使用方法;掌握临时装片的制作方法; (2) 掌握用光学显微镜观察大肠杆菌、青霉菌等工业微生物的形态的方法; (3) 掌握生物绘图的基本技巧; (4) 严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (5) 每个实验小组2 Ao 实验(二)细菌的革兰氏染色法 1. 实验内容 (1) 细菌革兰氏染色;生物涂片和干燥;染色;观察; (2) 革兰氏染色法鉴别革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌。 2. 实验要求 (1) 掌握革兰氏染色的方法; (2) 理解革兰氏染色法在细菌鉴别中的作用; (3) 严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4) 每个实验小组2人。 实验(三)微生物的大小测量 1. 实验内容 (1) 目镜测微尺、镜台测微尺的使用; (2) 光学显微镜测定微生物的大小。 2. 实验要求 (1) 掌握目镜测微尺、镜台测微尺的使用方法; (2) 掌握光学显微镜观察微生物的大小的方法; (3) 严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4) 每个实验小组2人。 实验(四) 实验器具的干热灭菌和湿热灭菌 1. 实验内容 (1) 试管、培养皿、移液管等玻璃器皿的包扎,灭菌设备的识别; (2) 试管、培养皿、移液管等的干热灭菌和湿热灭菌。 2. 实验要求: (1) 熟练掌握试管、培养皿、移液管等玻璃器皿的包扎方法; (2) 掌握电热鼓风干燥箱、高压蒸汽灭菌锅对玻璃器皿灭菌的方法; (3) 每个实验小组2人。 实验(五) 培养基的配制、分装和灭菌 1. 实验内容: (1) 药品的称量、溶解和pH值的调节; (2) 培养基的分装和高压蒸汽灭菌; (3) 无菌检查。 2. 实验要求 (1) 掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法; (2) 掌握培养基的配制方法; (3) 每个实验小组2人。 实验(六)微生物的接种和培养 1. 实验内容 (1) 斜面接种;平板接种;液体接种; (2) 微生物的纯培养。 2. 实验要求 (1) 掌握微生物接种的基本方法; (2) 掌握微生物培养的基本方法; (3) 严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4) 每个实验小组2人。 实验(七)稀释涂布平板菌落计数法 1. 实验内容: (1) 平板涂布; (2) 平板培养; (3) 微生物计数。 2. 实验要求 (1) 掌握平板涂布技术和菌悬液稀释方法; (2) 掌握用平板菌落计数进行活菌计数的方法; (3) 严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4) 每个实验小组2人。 实验(八)化学药剂对微生物生长的影响 1. 实验内容 < 1)中药抑菌物质粗提; (2) 化学药剂的配制;菌悬液的配制; (3) 微生物的涂布和浸药; (4) 测量抑菌圈的大小。 2. 实验要求 (1) 掌握中药抑菌物质粗提方法; (2) 掌握使用牛津杯法、滤纸片法测量抑菌效果; (3) 严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4) 每个实验小组2人。 实验(九)药品中霉菌总数的测定 1. 实验内容 (1)培养基的配制、药物溶液配制,待测试样培养; (2)霉菌总数的测定。 2. 实验要求 (1)了解常用无菌制剂的无菌检验基本原理; (2)掌握药品霉菌总数的检测方法; (3)严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4)每个实验小组2人。 实验(十)药品中控制菌一大肠杆菌的检验 1. 实验内容 (1)供试药品稀释; (2)微生物培养与检测。 2. 实验要求 (1)了解大肠杆菌群在药品卫生检验中的意义; (2)学习并掌握大肠杆菌的检验方法; (3)严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4)每个实验小组2人。 实验()药品无菌检查法 1. 实验内容 (1)准备待检药物0.9% N. S; (2)需氧菌、厌氧菌培养基、真菌培养基制备; (3)对照用实验菌菌悬液制备; (4)待检药物加入培养基培养,结果比对。 2. 实验要求 (1)掌握注射剂的无菌检查法; (2)了解抗生素等特殊灭菌制剂的剔菌检查法; (3)严格进行规范操作,严防出现实验室微生物污染现象; (4)每个实验小组2人。 实验(十二)抗生素效价的微生物测定