医学毕业论文胰腺癌组织cx43和ecad表达及意义
XX大学 毕业论文 胰腺癌组织Cx43和Ecad表达及意义 2014年6月25日 胰腺癌组织Cx43和Ecad表达及意义 作者:纪清连孙玲玲付伟伟李霞 【摘要】目的了解细胞间隙连接蛋白43(Cx43)和上皮 钙黏蛋白(E cad) 在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌发生和发展的关系。方法应用免疫组织化 学PV 6000法检测Cx43和E cad在47例胰腺癌和10例正常胰腺组织中的表 达和定位,并进行相关性分析。结果Cx43和E cad在正常胰腺组织导管上皮 细胞及腺泡细胞均呈阳性表达,而胰腺癌组织中Cx43和E cad表达阳性率分 别为 44.7% (21/47)和 46.8%(22/47),二者间差异有显著性(%2=18.59、19.23, P0.01)o Cx43和E cad在组织学I级的胰腺癌组织中的阳性表达率(70.0%、 80.0%)明显高于组织学田级(28.6%、23.8%),差异有显著性(P=0.047、0.021)。 Cx43和E cad阳性表达率与胰腺癌的转移密切相关(%2=6.01、4.70, P0.05), 与病人1年生存率无关(%2=2.07、3.63, P0.05)o Cx43和E cad在胰腺癌组织的 表达呈显著正相关(%2=16.31, r=0.92, P0.01)。结论胰腺癌存在Cx43和E cad 的表达下调和定位异常,其可能是胰腺癌发生和发展过程中的重要环节。 【关键词】胰腺肿瘤;间隙连接蛋白;上皮 钙黏蛋白;免疫组织化学 细胞间隙连接通讯(GJIC)功能的紊乱可导致癌症的发生,多种人类癌细胞均 显示其间隙连接结构和功能下降或缺乏,都有细胞间隙连接蛋白43 (Cx43)表 达的下降[1]。上皮 钙黏蛋白(E cad)为钙依赖黏附蛋白家族成员之一,分 布于上皮细胞,是维持上皮细胞极性及细胞间黏附连接的主要分子[2]。许多恶 性上皮肿瘤的侵袭转移与E cad的表达及功能障碍有关[3]。目前,关于Cx43 及E cad与胰腺癌发生和发展关系的研究报道很少见。本文采用免疫组织化学 技术检测正常胰腺和胰腺癌组织中Cx43及E cad蛋白的表达,探讨GJIC和细 胞间黏附功能异常在胰腺癌发生发展中的作用和机制。现将结果报告如下。 1材料与方法 1.1材料及其来源 收集青岛大学医学院附属医院病理科1995年1月〜1999年12月间诊断为 胰腺癌47例病人组织蜡块,每例均有详细的临床资料、手术记录及1年以上的 随访结果。术前均未接受化疗和放疗。47例中,男29例,女18例;年龄27〜 75岁,平均56.7岁。病理学类型均为浸润型导管癌。按BLOOM RICHARDSON 评分标准进行组织学分级:I级10例,II级16例,III级21例。47例中有淋巴 结转移者25例,无转移者22例;生存时间1年者13例,1年内死亡34例,1 年生存率为27.6%(13/47)o 10例正常胰腺组织取自因交通事故死亡的正常成人。 1.2 Cx43和E cad表达检测方法 所有标本均经40 g/L中性甲醛固定,石蜡包埋,4 pm厚切片。采用免疫 组化PV 6000法染色,具体步骤按说明书操作。鼠抗人Cx43和E cad抗体(即 用型)购自北京中杉生物试剂公司,PV 6000通用型试剂盒购自ZYMED公司。 每次染色均设阴性及阳性对照。 1.3免疫组化染色结果判断 参照文献[2~4]的标准,Cx43和E cad染色结果的判断标准为:无着色 为(-),着色细胞M25%为( + ), 26%〜75%为(),±76%为(),将(-)、( + ) 归为阴性表达,()、()归为阳性表达。 1.4统计学处理 采用SPSS 1.5[5]软件进行数据处理,数据间比较采用%2检验,相关性采 用Spearman相关分析。 2结果 2.1 Cx43和E cad在正常胰腺和胰腺癌组织表达 Cx43和E cad在正常成人胰腺组织导管上皮细胞及腺泡细胞膜均呈阳性 表达。在胰腺癌组织中,Cx43和E cad阳性染色多位于细胞浆内,细胞膜表达 减少。胰腺癌组织中Cx43和E cad的表达阳性率分别为44.7%(21/47)和46.8% (22/47)o Cx43和E cad在正常胰腺和胰腺癌组织中的阳性表达率比较,差异 有显著性(%2=18.59、19.23,P0.05)o 2.2 Cx43和E cad表达与胰腺癌临床病理学特征的关系 Cx43和E cad在组织学I级的胰腺癌组织中的阳性表达率为70.0%、 80.0%,而组织学田级为28.6%、23.8%,二者间差异有显著性(P=0.047、0.021)。 无淋巴结转移的胰腺癌组织Cx43和E cad阳性表达率与有转移者比较,差异 有显著意义(>2=6.01、4.70, P0.05)。生存超过1年者Cx43和E cad阳性表达 率(61.5%、69.2%)高于1年内死亡者(38.2%、38.2%),但差异无统计学意义 02=2.07、3.63, P0.05)o 见表 1。 2.3 Cx43和E cad在胰腺癌组织表达的相关性 本文胰腺癌组织中Cx43和E cad同时阳性表达18例,同时阴性表达22 例。经Spearman相关分析结果显示,Cx43和E cad表达呈明显的正相关性 02=16.31, r=0.92, P0.01)。 表1 Cx43和E cad表达与胰腺癌临床病理学 特征的关系(例)临床病理学特征nCx43阳性阴性E cad阳性阴性组织学分级 I 107382 II168897 11121615516淋巴结转移有25718817 无22148148 生存 期(年)<13413211321 >1138594 3讨论 Cx43是一种主要的细胞间隙连接蛋白,它在细胞膜上成簇出现形成间隙 连接斑,许多免疫组织化学研究已证实Cx43蛋白表达的量与细胞GJIC的能力 密切相关,Cx43表达下降意味着通讯功能的下降[4]。张永兴等[6]研究显示,Cx43 在15例正常肺组织中均呈较典型的细胞膜表达,85例肺癌组织中仅有43例Cx43 阳性表达,并且Cx43的阳性表达率与细胞分化程度、TNM分期及有无淋巴结 转移均有密切关系。安君岭等[7]报道,肝癌组织中Cx43阳性率为42.55%, TNM 分期越高,Cx43阳性率越低。HIRSCHI等[8]对乳癌的研究结果也说明,Cx43 蛋白表达和GJIC功能异常可促进癌细胞转移。本文研究结果显不,Cx43蛋白在 正常成人胰腺组织导管上皮细胞及腺泡细胞膜均呈阳性表达,而在胰腺癌组织中 表达明显减少,并且多在细胞浆内异位表达,细胞膜表达减少或消失;高分化和 无淋巴结转移的胰腺癌组织Cx43阳性表达率明显高于低分化和有转移者。提示 Cx43蛋白的表达减少和定位异常可能直接导致胰腺细胞GJIC的结构和功能异 常,细胞失去广泛的信号通讯,逃避正常的生长控制,最终导致胰腺癌的发生; Cx43蛋白表达可能是胰腺癌的分化表型和恶性转化表型之一,可以作为胰腺癌 分化程度和浸润转移能力的指标。 E cad为上皮细胞之间及细胞与细胞外基质黏附的重要黏附分 子,是位于染色体16q22.1上的E ca