医学毕业论文胰腺癌组织cx43和ecad表达及意义

XX大学 毕业论文 胰腺癌组织Cx43和Ecad表达及意义 2014年6月25日 胰腺癌组织Cx43和Ecad表达及意义 作者纪清连孙玲玲付伟伟李霞 【摘要】目的了解细胞间隙连接蛋白43Cx43和上皮 钙黏蛋白E cad 在胰腺癌组织中的表达及其与胰腺癌发生和发展的关系。方法应用免疫组织化 学PV 6000法检测Cx43和E cad在47例胰腺癌和10例正常胰腺组织中的表 达和定位，并进行相关性分析。结果Cx43和E cad在正常胰腺组织导管上皮 细胞及腺泡细胞均呈阳性表达，而胰腺癌组织中Cx43和E cad表达阳性率分 别为 44.7 21/47和 46.822/47,二者间差异有显著性218.59、19.23, P0.01o Cx43和E cad在组织学I级的胰腺癌组织中的阳性表达率70.0、 80.0明显高于组织学田级28.6、23.8,差异有显著性P0.047、0.021。 Cx43和E cad阳性表达率与胰腺癌的转移密切相关26.01、4.70, P0.05, 与病人1年生存率无关22.07、3.63, P0.05o Cx43和E cad在胰腺癌组织的 表达呈显著正相关216.31, r0.92, P0.01。结论胰腺癌存在Cx43和E cad 的表达下调和定位异常，其可能是胰腺癌发生和发展过程中的重要环节。 【关键词】胰腺肿瘤；间隙连接蛋白；上皮 钙黏蛋白；免疫组织化学 细胞间隙连接通讯GJIC功能的紊乱可导致癌症的发生，多种人类癌细胞均 显示其间隙连接结构和功能下降或缺乏，都有细胞间隙连接蛋白43 Cx43表 达的下降［1］。上皮 钙黏蛋白E cad为钙依赖黏附蛋白家族成员之一，分 布于上皮细胞，是维持上皮细胞极性及细胞间黏附连接的主要分子［2］。许多恶 性上皮肿瘤的侵袭转移与E cad的表达及功能障碍有关［3］。目前，关于Cx43 及E cad与胰腺癌发生和发展关系的研究报道很少见。本文采用免疫组织化学 技术检测正常胰腺和胰腺癌组织中Cx43及E cad蛋白的表达，探讨GJIC和细 胞间黏附功能异常在胰腺癌发生发展中的作用和机制。现将结果报告如下。 1材料与方法 1.1材料及其来源 收集青岛大学医学院附属医院病理科1995年1月〜1999年12月间诊断为 胰腺癌47例病人组织蜡块，每例均有详细的临床资料、手术记录及1年以上的 随访结果。术前均未接受化疗和放疗。47例中，男29例，女18例；年龄27〜 75岁，平均56.7岁。病理学类型均为浸润型导管癌。按BLOOM RICHARDSON 评分标准进行组织学分级I级10例，II级16例，III级21例。47例中有淋巴 结转移者25例，无转移者22例；生存时间1年者13例，1年内死亡34例，1 年生存率为27.6（13/47）o 10例正常胰腺组织取自因交通事故死亡的正常成人。 1.2 Cx43和E cad表达检测方法 所有标本均经40 g/L中性甲醛固定，石蜡包埋，4 pm厚切片。采用免疫 组化PV 6000法染色，具体步骤按说明书操作。鼠抗人Cx43和E cad抗体（即 用型）购自北京中杉生物试剂公司，PV 6000通用型试剂盒购自ZYMED公司。 每次染色均设阴性及阳性对照。 1.3免疫组化染色结果判断 参照文献［24］的标准，Cx43和E cad染色结果的判断标准为无着色 为（-）,着色细胞M25为（ ）, 26〜75为（），76为（），将（-）、（ ） 归为阴性表达，（）、（）归为阳性表达。 1.4统计学处理 采用SPSS 1.5［5］软件进行数据处理，数据间比较采用％2检验，相关性采 用Spearman相关分析。 2结果 2.1 Cx43和E cad在正常胰腺和胰腺癌组织表达 Cx43和E cad在正常成人胰腺组织导管上皮细胞及腺泡细胞膜均呈阳性 表达。在胰腺癌组织中，Cx43和E cad阳性染色多位于细胞浆内，细胞膜表达 减少。胰腺癌组织中Cx43和E cad的表达阳性率分别为44.7（21/47）和46.8 （22/47）o Cx43和E cad在正常胰腺和胰腺癌组织中的阳性表达率比较，差异 有显著性（218.59、19.23,P0.05）o 2.2 Cx43和E cad表达与胰腺癌临床病理学特征的关系 Cx43和E cad在组织学I级的胰腺癌组织中的阳性表达率为70.0、 80.0,而组织学田级为28.6、23.8,二者间差异有显著性（P0.047、0.021）。 无淋巴结转移的胰腺癌组织Cx43和E cad阳性表达率与有转移者比较，差异 有显著意义（＞26.01、4.70, P0.05）。生存超过1年者Cx43和E cad阳性表达 率（61.5、69.2）高于1年内死亡者（38.2、38.2）,但差异无统计学意义 022.07、3.63, P0.05）o 见表 1。 2.3 Cx43和E cad在胰腺癌组织表达的相关性 本文胰腺癌组织中Cx43和E cad同时阳性表达18例，同时阴性表达22 例。经Spearman相关分析结果显示，Cx43和E cad表达呈明显的正相关性 0216.31, r0.92, P0.01）。 表1 Cx43和E cad表达与胰腺癌临床病理学 特征的关系（例）临床病理学特征nCx43阳性阴性E cad阳性阴性组织学分级 I 107382 II168897 11121615516淋巴结转移有25718817 无22148148 生存 期（年）＜13413211321 ＞1138594 3讨论 Cx43是一种主要的细胞间隙连接蛋白，它在细胞膜上成簇出现形成间隙 连接斑，许多免疫组织化学研究已证实Cx43蛋白表达的量与细胞GJIC的能力 密切相关,Cx43表达下降意味着通讯功能的下降［4］。张永兴等［6］研究显示，Cx43 在15例正常肺组织中均呈较典型的细胞膜表达,85例肺癌组织中仅有43例Cx43 阳性表达，并且Cx43的阳性表达率与细胞分化程度、TNM分期及有无淋巴结 转移均有密切关系。安君岭等［7］报道，肝癌组织中Cx43阳性率为42.55, TNM 分期越高，Cx43阳性率越低。HIRSCHI等［8］对乳癌的研究结果也说明，Cx43 蛋白表达和GJIC功能异常可促进癌细胞转移。本文研究结果显不，Cx43蛋白在 正常成人胰腺组织导管上皮细胞及腺泡细胞膜均呈阳性表达，而在胰腺癌组织中 表达明显减少，并且多在细胞浆内异位表达，细胞膜表达减少或消失；高分化和 无淋巴结转移的胰腺癌组织Cx43阳性表达率明显高于低分化和有转移者。提示 Cx43蛋白的表达减少和定位异常可能直接导致胰腺细胞GJIC的结构和功能异 常，细胞失去广泛的信号通讯，逃避正常的生长控制，最终导致胰腺癌的发生； Cx43蛋白表达可能是胰腺癌的分化表型和恶性转化表型之一，可以作为胰腺癌 分化程度和浸润转移能力的指标。 E cad为上皮细胞之间及细胞与细胞外基质黏附的重要黏附分 子，是位于染色体16q22.1上的E ca