西北农林科技大学分子生物学

一、名词解释 1、RNA 干扰（RNA interference，RNAi）：是指在生物体细胞内，双链RNA(dsRNA)引起 同源 mRNA 的特异性降解，因而抑制相应基因表达的过程。 2、基因组：对一般二倍体高 等生物而言，能维持配子或配子体正常功能的最低数目的一套染色体 DNA，构成一个基因 组。基因组中包含一整套基因。 3、功能基因组：由表达基因构成的基因组。（cDNA） 4、C 值：是一种生物单倍体基因组DNA 的总量。 5、 C 值反常： 真核细胞基因组的最大特点是它含有大量的重复序列， 而且功能 DNA 序列大多被不编码蛋白的DNA 所隔开。这就是 C 值反常现象 6、DNA 的转座：是由可移位因子介导的遗传物质重排现象。根据转座作用机制的 不同，可分为复制性转座和非复制性转座。 7、 基因工程：是指在体外将核酸分子插入到病毒、质粒或是其它载体分子，构成 遗传物质的新组合， 使之进入原先没有这类分子的寄主细胞中。 进行持续稳定的繁殖和表达。 8、 分子克隆的载体（vector）：具有自主复制能力的DNA 分子。 1.基因表达：包 括转录(transcription)和翻译(translation)两个阶段。转录是指拷贝出一条与 DNA 链序列完全 相同(U 替换 T)的 RNA 单链的过程，是基因表达的核心步骤；翻译是指以新生的mRNA 为 模板，把核苷酸三联遗传密码子翻译成氨基酸序列、 合成多肽链的过程， 是基因表达的最终 目的。 2.编码链(有意义链)：与 mRNA 序列相同的那条 DNA 链。（指不作模板的DNA 单链） 模板链(反义链)：另一条根据碱基互补原则指导mRNA 合成的 DNA 链。 （指作为模板进行 RNA 转录的链） 二、判断对错，为什么？(每题 3 分，共计 6 分)： 1. 在研究 mRNA 所包含的功能基因信息时， 一般将其反转录成的cDNA，再插入到可以自 我复制的载体中。正确 由于 mRNA 十分敏感和脆弱，在自然状态下难以被扩增，故将其反转录成结构稳定的双链 DNA 就是 cDNA，然后再插入到可以自我复制的载体中。构建cDNA 文库。 2. 一个生物体内能产生百万种以上的 Ig 分子，是源自于相应数目的基因。不正确 生物体内能产生百万种以上的 Ig 分子，是由于组成 Ig 分子的重链和轻链的基因片段发生 重排的结果。 三、填空（每空 0.5 分，共计 20 分） 1. 核小体 是染色质的基本结构单位，由 200 bp DNA 和 组蛋白八聚体 组成。DNA 在中 期染色体中压缩 10，000 倍。 2．蛋白质合成时 UAA 、 UGA 和 UAG 三个暗码通常不代表任何氨基酸，它们代表 终 止密码子 。 4．在大肠杆菌中，许多蛋白质的降解是通过一个依赖于 ATP 的蛋白酶（con） 来实现的。 真核蛋白的降解依赖于一个只有76 个氨基酸残基、其序列高度保守的 泛素 。 5．PCR 技术是体外快速扩增特定基因或DNA 序列最常用的方法。 整个反应包括 DNA 解 链（变性） 、引物与模板结合（退火） 、 DNA 合成（延伸） 三步，此三步可以被不断 重复。经多次循环之后，反应混合物中所含有的双链 DNA 分子数，理论上的最高值应是 2n。 6. SNP（单核苷酸多态性） 指基因组 DNA 序列中由于单个核苷酸（A，T，C 和 G） 的突变而引起的多态性。 7. 基因敲除 又称 基因打靶 ，该技术通过外源 DNA 与染色体 DNA 之间的同源重组，进 行精确的定点修饰和基因改造， 具有专一性强、染色体 DNA 可与目的片段共同稳定遗传等 特点。 12. 原位杂交 是用标记的核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织、细胞、间 期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段。13. 定点突变 通过改变基因 特定位点核苷酸序列来改变所编码的氨基酸序列。14. RNA 干涉 技术利用双链小 RNA 高 效、特异性降解细胞内同源 mRNA，从而阻断体内靶基因表达，使细胞出现靶基因缺失的 表型。 15. 蛋白质组学研究某一物种、个体、器官、组织或细胞在特定条件、特定时间所表达的全 部蛋白质图谱。通常采用 双向电泳 方法将蛋白质分离, 然后采用 质谱 技术进行鉴定. 15、受体酪氨酸激酶： [A、E] A、有一个胞质激酶区；B、其配体一般是甾类物质； C、配体结合后不发生二聚化 D、配体结合胞质区使受体构型发生改变；E、能够发生自磷 酸化而激活。 16、凝胶阻滞法， [B、C] A、用于研究蛋白质－蛋白质相互作用的方法； B、用于研究蛋白质－DNA 相互作用的方 法； C、其原理是根据复合物大小的改变而发生的电泳速度改变；D、其原理是根据复合物的结 构改变而发生的电泳速度改变 17、甾类受体转录因子，[C] A、都结合于同一激素； B、不以特异性序列模式结合 DNA C、有不同的区域分别用于激活 转录，结合 DNA 和激素。 18、细胞凋亡， [A、D] A、是特定细胞的程序性死亡； B、当 Fas 或 TNF 的受体结合了它们的配体后能被诱导； D、一般引起 caspase 的级联反 应。 19、下列哪些关于 ras 说法是正确的；[B、C、D] A、ras 蛋白直接结合到胞外配体上； B、 基因常发生突变， 突变能在 V-ras 或 C-ras 发生； C、 基因突变可能在结构上活化 Ras， 从而不水解 GTP; D、有时可能通过野生型 Ras 蛋白的过量表达而引起肿瘤发生； E、不能介导信号通路。 20、p53 基因， [A、B、D、E] A、是一个抑癌基因；B、编码一个转录因子；C、一般不发生突变 D、参与细胞周期的调控。E、其表达产物功能可以被某些病毒蛋白抑制 五、问答题 （共 计 25 分） 2. 解释在 DNA 复制过程中，后随链是怎样合成的。（4 分） 因为 DNA 聚合酶只能从 5’到3’方向合成DNA，后随链不能象先导链那样总是朝着同一 方向合成。后随链是以大量的独立的片段的形式 （冈崎片段） 合成的。每个片段都是按照 5’ 到 3’方向合成的。这些片段最后连在一起形成一条连续的多核苷酸链。每个片段都是独立 地被引发、聚合和连接。 3. 解释什么是“套索结构”，在内含子套索中的磷酸二酯键有什么特别之处？ （5 分） 当 RNA 分子的一端自身回折成环并与其自身的核苷酸形成共价结合时， 便形成了一个套索 结构。在内含子的套索结构中的磷酸二酯键很少见。因为它是由核苷酸的5’和 2’上的碳 原子连接起来的。而磷酸二酯键通常是靠相邻的两个核苷酸的5’和 3’ 的碳原子连接起来 的。 4. 列表说明原核生物与真核生物转录的差异。（7 分） 原核生物真核生物 1．一种 RNA 聚合酶。1．多种 RNA 聚合酶。 2．不同启动子间有相当大的同源性。 2 各种不同启动子间的差异很大。 3．聚合酶直接同启动子结合。3．聚合酶通过同转录因子相互作用进行结合。 4．没有 增强子。4．有增强子。 5．转录作用的终止由在几个 Us 前面形成颈环。 5．转录的终止是靠在转录过程特殊的核 酸内切酶切割的序列介导的。 6．启动子通常位于基因的上游。 6．