维生素c测定方法

维生素 C 的测定方法 郑世豪 {摘要}： 维生素维生素 C C 亦称抗坏血酸，亦称抗坏血酸，具有氧具有氧 化还原功能，化还原功能，广泛参与细胞间质的合成广泛参与细胞间质的合成 及及解解毒毒过过程程等等作作用用，，它它能能帮帮助助减减低低臭臭 氧、氧、 二氧化碳等空气污染毒性抑制膳食二氧化碳等空气污染毒性抑制膳食 中有致癌作用的亚硝胺的合成，中有致癌作用的亚硝胺的合成， 还具有还具有 降低血铅浓度的作用，降低血铅浓度的作用， 既能保持皮肤弹既能保持皮肤弹 性，性，延缓衰老，延缓衰老， 又有助于消除人体不可又有助于消除人体不可 缺少的营养素之一，缺少的营养素之一， 故许多人把它作为故许多人把它作为 防病治病的灵丹妙药，防病治病的灵丹妙药， 殊不知应用合理殊不知应用合理 与否，会产生不同的作用。与否，会产生不同的作用。 {关键词 }：： 维生素维生素 C C测定原理、测定原理、 检测方法检测方法 引言 维生素维生素 C C 是可溶于水的无色结晶，是可溶于水的无色结晶， 是一种分子结构最简单的维生素。是一种分子结构最简单的维生素。维生维生 素素 C C 有防治坏血病的功能，有防治坏血病的功能， 所以在医药所以在医药 上常把它叫做抗坏血酸。上常把它叫做抗坏血酸。 维生素维生素 C C 在水在水 溶溶液液中中易易被被氧氧化化，，在在碱碱性性条条件件下下易易分分 解解，，在在弱弱酸酸条条件件中中较较稳稳定定，，维维生生素素 C C 开始氧化为脱氢型抗坏血酸开始氧化为脱氢型抗坏血酸( (有生理作有生理作 用用) )。维生素。维生素 C C 能保持巯基酶的活性和能保持巯基酶的活性和 谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。谷胱甘肽的还原状态，起解毒作用等。 其其广广泛泛存存在在于于植植物物组组织织中中，，新新鲜鲜的的水水 果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿 子叶、子叶、猕猴桃、猕猴桃、柑橘等食品中含量尤为柑橘等食品中含量尤为 丰富。丰富。准确测定维生素准确测定维生素C C 的含量，的含量，对饮对饮 食健康、食健康、医疗保健都具有十分重要的意医疗保健都具有十分重要的意 义。义。 本文总结近年来的文献报道维生素本文总结近年来的文献报道维生素 C C 测定方法主要有滴定法、荧光法、光测定方法主要有滴定法、荧光法、光 度分析法、高效液相色谱法。度分析法、高效液相色谱法。 滴定法测定维生素 C 测定原理 2 2，，6 6 一二氯靛酚法和碘量法是较一二氯靛酚法和碘量法是较 常见的滴定测定维生素常见的滴定测定维生素C C 的方法。的方法。还原还原 型抗坏血酸还原染料型抗坏血酸还原染料2 2，， 6 6 一二氯靛酚，一二氯靛酚， 该染料在酸性中呈红色，该染料在酸性中呈红色， 被还原后红色被还原后红色 消失。还原型抗坏血酸还原消失。还原型抗坏血酸还原2 2，，6 6 一二一二 氯氯靛靛酚酚后后，，本本身身被被氧氧化化成成脱脱氢氢抗抗坏坏血血 酸。酸。在没有杂质干扰时，在没有杂质干扰时， 一定量的样品一定量的样品 提取液还原标准提取液还原标准2 2，， 6-6-二氯靛酚的量二氯靛酚的量 与样品中所含维生素与样品中所含维生素C C 的量成正比。的量成正比。 碘量法的原理：碘量法的原理：维生素维生素 C C 包括氧化包括氧化 型、型、还原型和二酮古乐糖酸三种，还原型和二酮古乐糖酸三种，当用当用 碘滴定维生素碘滴定维生素C C 时，时， 所滴定的碘被维生所滴定的碘被维生 素素 C C 还原为碘离子，还原为碘离子，随着滴定过程中维随着滴定过程中维 生素生素 C C 全被氧化，全被氧化，所滴入的碘将以碘分所滴入的碘将以碘分 子子形形式式出出现现。。碘碘分分子子可可以以使使含含指指示示剂剂 （淀粉）（淀粉）的溶液产生蓝色，的溶液产生蓝色， 即为滴定终即为滴定终 点。点。 测定操作 2 2，，6 6 一二氯靛酚法：取适量的样一二氯靛酚法：取适量的样 品可食部，加入品可食部，加入100 mL 2%100 mL 2% 草酸溶液，草酸溶液， 制成匀浆。取同一样品匀浆制成匀浆。取同一样品匀浆10g10g，加入，加入 1%1%草酸溶液草酸溶液 20 mL20 mL ，， 摇匀，摇匀， 用滤纸过滤，用滤纸过滤， 取取 5mL5mL 过滤液于锥形瓶中，用过滤液于锥形瓶中，用2 2，，6 6 一一 二二 氯氯 靛靛 酚酚 钠钠 盐盐 溶溶 液液 滴滴 定定 (1(1mLmL ≈≈ mgVitC)mgVitC) ，以淡红色存在，以淡红色存在30 s30 s 内不褪色内不褪色 为滴定终点。记录为滴定终点。记录2 2，，6-6-二氯酚靛酚钠二氯酚靛酚钠 盐溶液的消耗量，盐溶液的消耗量， 根据结果计算出样品根据结果计算出样品 中维生素中维生素 C C 含量含量(mg/100 g)(mg/100 g) 。。 碘量法的原理：碘量法的原理：维生素维生素 C C 包括氧化包括氧化 型、型、还原型和二酮古乐糖酸三种，还原型和二酮古乐糖酸三种，当用当用 碘滴定维生素碘滴定维生素C C 时，时， 所滴定的碘被维生所滴定的碘被维生 素素 C C 还原为碘离子，还原为碘离子，随着滴定过程中维随着滴定过程中维 生素生素 C C 全被氧化，全被氧化，所滴入的碘将以碘分所滴入的碘将以碘分 子子形形式式出出现现。。碘碘分分子子可可以以使使含含指指示示剂剂 （淀粉）（淀粉）的溶液产生蓝色，的溶液产生蓝色， 即为滴定终即为滴定终 点。点。 荧光法测定维生素 C 测定原理： DeutschDeutsch 和和 WeeksWeeks 曾经报道过一种曾经报道过一种 检测维生素检测维生素C C 的荧光分析法的荧光分析法 (OPDA)(OPDA) ，， 并被指定为维生素并被指定为维生素C C 的经典荧光分析的经典荧光分析 法。法。在该方法中，在该方法中， 维生素维生素 C C 先被活性炭先被活性炭 (Norit)(Norit) 氧氧化化为为脱脱氢氢抗抗坏坏血血酸酸(DHAA)(DHAA) ，， DHAADHAA 再再与与荧荧光光底底物物邻邻苯苯二二胺胺(OPDA)(OPDA) 结合生成荧光产物，结合生成荧光产物， 通过对该荧光产物通过对该荧光产物 的检测实现对维生素的检测实现对维生素C C 的定量分析。的定量分析。孙孙 振艳等振艳等 [1][1]提出了一种新的测定维生素提出了一种新的测定维生素 C C 的荧光分析方法。基于维生素的荧光分析方法。基于维生素C C 被被 Cu2+Cu2+氧化为氧化为 DHAADHAA，，DHAADHAA 进一步与苯进一步与苯 甲甲酸酸及及十十六六烷烷基基三三甲甲基基溴溴化化铵铵产产生生荧荧 光协同增敏作用，光协同增敏作用， 通过对体系荧光强度通过对体系荧光强度 的测定进行维生素的测定进行维生素C C 的定量分析。的定量分析。 测定操作： 荧光分析法荧光分析法 (OPDA)(OPDA) 的测定方法：的测定方法：称称 取一定量样品，取一定量样品， 研磨后用水浸泡，研磨后用水浸泡， 取清取清 液加入适量液加入适量 1%1%草酸溶液，草酸溶液，振摇约振摇约 3min3min，， 加入加入 0.2g0.2g 已处理好的活性炭再充分振已处理好的活性炭再充