天然药物化学试验报告

小檗碱提取及结构鉴定 摘 要 目的：对黄连中的小檗碱成分进行分离纯化与鉴定。方法：采用超声提取、重结晶等手 段对样品进行分离、纯化，根据紫外光谱进行化合物结构鉴定。结果：从黄连中分离得 到了小檗碱， 结论： 该方法简单、 可行， 可为黄连药材及其制剂的质量标准提供对照品。 关键词： 小檗碱黄连超声提取法结构鉴定紫外光谱薄层色谱 Berberine extraction and structure identificationBerberine extraction and structure identification ABSTRACTABSTRACT Purpose：Berberine extraction and structure identification；:berberine was extracted with the technique of ultrasonic wav andrecrystallization ,and identified by UV. Result： gaining Berberin from Coptis; Conclusion:the is easy and able to provide reference substance for Coptic preparations. Kingword BerberineCoptisUltrasonic wavStructure identificationUVTLC 目目 录录 摘要 .1 一、文献综述 .1 1.题目背景 .1 2.研究现状 .2 3.提取方法 .3 二、实验目的和意义 .9 1.实验研究目的 .9 2.实验意义 .9 3.题目理论研究价值 .9 三、主要内容与实施方案 10 1.主要内容 10 2.实验原理 10 3.实验方法 10 4.仪器材料 10 5.实验流程 11 6.实验操作 11 7.预期结果 12 8.实际结果 12 8.定性分析 12 四、进度计划 15 五．实验总结 16 五、参考文献 17 1 一、文献综述 1.题目背景 黄连 （Coptis chinensis Franch） 为我国名贵中药材之一， 享有 “中药抗生素” 美称，其主要功能为清热燥湿、泻火解毒。黄连抗菌能力强，对降热镇痛、抗肠 道细菌感染、急性结膜炎、口疮、急性细菌性痢疾等均有很好的疗效，在临床中 有较多应用[1-3]。小檗碱（berberine，又称黄连素）是从中 草药黄连等植物中提取分离得到的一类异喹啉类生物碱， 为黄连主要有效成分，其含量约为 4%-10%，但根据野生和 栽培产地的不同，其含量各异。 小檗碱是黄色针状结晶体，能缓慢溶于水（ 1：20） ， 乙醇 （1： 100） ， 较易溶于水、 热乙醇， 微溶于丙酮、 氯仿、 苯，几乎不溶于石油醚中。小檗碱的结构式以较稳定的季 铵碱为主，其结构式如图 1。在自然界，小檗碱多以季铵盐的形式存在，其盐酸 盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐均难溶于水，易溶于热水，且各种盐的纯化都比 较容易。 小檗碱是一种常用的广谱抗菌药， 具有抗细菌性感染、 抗肿瘤、 抗心率失常、 降压降血糖等功效，在临床上有越来越广泛的应用[4]。 2.研究现状[ 5 ] 近十年来，已经有 2 000 多篇国内外文献报道了小檗碱及其衍生物在治疗肿 瘤、糖尿病、心血管疾病、高血脂、炎症、细菌和病毒感染、脑缺血性损伤、精 神疾病、阿尔茨海默病(Alzheimer disease)、骨质疏松等多方面的临床应用、药效 机制以及该类化合物的构效关系等研究结果。这些结果表小檗碱生理功能广泛， 潜在的结构改造和开发应用价值很大。下面主要从临床应用与药效机制、分子药 理、体内吸收代谢、构效关系四个方面来介绍小檗碱及其衍生物的研究进展。 2.1 临床应用与药效机制 2.1.1 治疗心血管疾病 小檗碱有抗心律失常，舒张血管，保护心肌，抑制血管增生，抗血小板聚集 等作用从而实现对心血管疾病的治疗。 减轻大鼠心肌缺血实验中，BBR 可显 著改善心肌缺血再灌注术后心功能并减轻心肌凋亡及梗死,这种保护作用可被 AG 阻断(均 P0.05)。BBR 治疗还可显著提高心肌 JAK2 及 STAT3磷酸化水平, 抑制凋亡相关信号分子表达,这种作用也被 AG 阻断(P0.05)。结论 BBR 可显著 2 图 1小檗碱的季铵碱式 减轻大鼠 MI/R 损伤后心肌梗死及凋亡水平, 改善心功能,JAK2/STAT3可能介导 此作用。 2.1.2 降血糖 降糖并保护糖尿病大鼠周围神经。黄连生物碱特别是小檗碱通过降低糖尿病 大鼠空腹糖、糖化血红蛋白比值和血清甘油三酯和胆固醇水平 ,提高糖尿病大鼠 血浆胰岛素水平。提高坐骨神经感觉和运动传导速度,缩短动作电位潜伏期,调节 自由基代谢紊乱,减轻脂质过化反应抑制多元醇代谢通路中活性和改善血液高粘 状态增加坐骨神经营养因子的表达改善糖尿病大鼠周围神经功能和结构 ,保护糖 尿病周围神经的病变。 2.1.3 抗菌抗炎 利用不同浓度的小檗碱处理人肠上皮细胞Ｃａｃｏ-2,通过测量上皮电位电阻 观察细胞紧密连接的完整性,并研究小檗碱对紧密连接和紧接合蛋白形态学方面 作用,表明小檗碱能够减少肠上皮细胞的渗透率 ,推测小檗碱有抗腹泻活性[26]。 ＣｈｅｎｇＺＦ认为小檗碱能够抑制甲状腺机能亢进腹泻小鼠胃肠多肽的提升 和黏液分泌,从而起到止泻作用。 2.1.4 抗肿瘤 黄连及其有效成分可通过细胞毒作用抑制肿瘤细胞增殖、 诱导细胞凋亡、增 强机体免疫功能、调节细胞信号传导、抗氧化、诱导细胞分化等机制发挥抗肿瘤 作用。ＫｏｈｊｉＴａｋａｒａ[3]发现黄连提取物对Ｈｅｌａ细胞的生长有浓 度依赖性抑制作用,5μ ｇ/ｍｌ黄连提取物能够显著增加Ｈｅｌａ细胞对紫杉醇 的敏感性。 黄连素在体外亦以时间和剂量依赖的方式对Ｈｅｌａ细胞产生细胞毒 作用并诱导其凋亡。 2.1.5 治疗阿尔茨海默病 研究发现， 小檗碱在无细胞毒性的正常剂量范围内，能调节人神经胶质瘤细 胞中淀粉样前蛋白的形成减少淀粉样蛋白-β 的产生；增强神经生长因子诱导的 神经细胞分化；改善阿尔茨海默病 (Alzheimer disease，AD)模型大鼠空间记忆损 伤，增加白介素．1 和 iNOS 表达 ；还可作为 AChE 抑制剂，有望成为治疗阿 尔茨海默病的药物。 2.1.6 神经调节 已有证据表明,中央多巴胺系统可以介导可卡因的行为强化效应,黄连及其小檗碱 可通过调整中央多巴胺系统有效抑制可卡因的行为效应。 2.1.7 其他作用 3 小檗碱可增加离体家兔阴茎海绵体平滑肌组织中环磷酸鸟苷 (cGMP)和环磷 酸腺苷(cAMP)浓度，对阴茎海绵体有即时的舒张作用，还对NO．cGMP 信号通 路的下游关键酶(PDE5)具有一定的调控作用，尤其是抑制 PDE5A2 的 mRNA 表 达，治疗勃起功能障碍。 3.提取方法[ 6] 3.1 传统提取技术 黄连中小檗碱的提取工艺， 主要是溶剂提取法。此法是从中草药中提取有效 成分的常用方法，通过浸渍、渗渡、回流等方式将有效成分从药材组织内溶解， 进行萃取。 3.1.1 酸水法提取小檗