试验室常用试剂配方

百度文库 - 好好学习，天天向上 常用试剂的配方常用试剂的配方 常用贮液与溶液 . 1 1mol/L 亚精胺（Spermidine） 1 1mol/L 精胺（Spermine） . 1 10mol/L 乙酸胺（ammonium acetate） 1 10mg/ml 牛血清蛋白(BSA）. 1 1mol/L 二硫苏糖醇（DTT）. 1 8mol/L 乙酸钾（potassium acetate） 1 1mol/L 氯化钾（KCl） 1 3mol/L 乙酸钠（sodium acetate）. 1 L EDTA 1 1mol/L HEPES 1 1mol/L HCl 1 25mg/ml IPGT. 2 1mol/LMgCl2. 2 100mmol/L PMSF . 2 20mg/ml 蛋白酶 K（proteinase K） 2 10mg/mlRnase（无 DNase） （DNase－free RNase）. 2 5mol/L 氯化钠（NaCl） 2 10N 氢氧化钠（NaOH） . 2 10％SDS（十二烷基硫酸钠） 2 2mol/L 山梨（糖）醇（Sorbitol） 2 100％三氯乙酸（TCA） . 2 ％ X－gal（5-溴-4-氯-3-吲哚－β-半乳糖苷）. 2 100×Denhardt 试剂（Denhardt’s regent） 2 10×标准 DNA 连接酶缓冲液（standard DNA ligase buffer） （粘端、平端连接） . 3 -I 百度文库 - 好好学习，天天向上 100 mmol/L dNTP溶液（dNTP solutions） 3 20％PEG 8000/2.5M NaCl. 4 20×SSC 4 DEPC（焦碳酸二乙酯）处理水 . 4 甲酰胺（deionized amide） . 4 TE（用于悬浮和贮存 DNA）. 4 Tris 缓冲液（Tris-HCl buffer） . 5 30%丙烯酰胺溶液 5 40%丙烯酰胺 5 放线菌素 D 溶液 6 L 腺苷三磷酸（ATP）溶液. 6 10mol/L 乙酸酰溶液. 6 10%过硫酸铵溶液 6 BCIP 溶液 . 6 2×BES 缓冲盐溶液. 7 1mol/L CaCl2溶液 7 L CaCl2溶液. 7 1mol/L 二硫苏糖醇（DTT）溶液. 7 脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液 7 L EDTA溶液. 8 溴化乙锭（10mg/ml 溶液） 8 2×HEPES 缓冲盐溶液 9 IPTG 溶液 . 9 1mol/L 乙酸镁溶液. 9 1mol/L MgCl2溶液 9 β -巯基乙醇（BME）溶液 . 9 NBT 溶液 10 -II 百度文库 - 好好学习，天天向上 酚/氯仿溶液 10 10mmol/L 苯甲基磺酰氟（PMSF）溶液 . 10 磷酸盐缓冲溶液（PBS）溶液 10 1mol/L 乙酸钾（）溶液11 乙酸钾溶液（用于碱裂解） 11 3mol/L 乙酸钠（和）溶液11 5mol/L NaCl溶液 11 10%十二烷基硫酸钠（SDS）溶液11 20×SSC 溶液. 12 20×SSPE 溶液. 12 100%三氯乙酸溶液 12 1mol/L Tris溶液 12 Tris 缓冲盐溶液（TBS） （25mmol/L Tris）. 13 X-gal 溶液 . 13 PBS:. 13 TBS： 13 枸橼酸盐缓冲液（Citrate buffer） ： 14 胰酶（Trypsin） ： . 14 胃酶（Pepsin） ：. 14 DAB：. 14 AEC： . 15 RIPA：. 15 9、Blotto A： 15 10、Blotto B： 15 电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 . 15 电泳缓冲液 . 15 染料 . 16 -III 百度文库 - 好好学习，天天向上 10mg/ml 的溴化乙锭（ethidium bromide） 16 凝胶上样液（gel loading solutions） 16 6×聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 17 6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存） . 17 6×甘油凝胶上样液（4℃贮存）. 18 6×蔗糖凝胶上样液（室温贮存） 18 10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）. 18 常用培养基 . 19 LB 培养基 . 19 SOC 培养基. 20 TB 培养基 . 20 YPD 培养基 20 常用抗生素 . 21 氨苄青霉素（ampicillin） （100mg/ml）. 21 羧苄青霉素（carbenicillin） （50mg/ml） . 21 甲氧西林（methicillin） （100mg/ml） 21 卡那霉素（kanamycin） （10mg/ml） 21 氯霉素（chloramphenicol） （25mg/ml） 21 链霉素（streptomycin） （50mg/ml） 21 萘啶酮酸（nalidixic acid） （5mg/ml） . 21 四环素（tetracyyline） （10mg/ml） 21 实验室常用贮存液的配制参数 . 22 一、核酸及蛋白质常用数据 . 22 2．常用核酸的长度与分子量 . 22 3．常用核酸蛋白换算数据 . 23 4．常用蛋白质分子量标准参照物 24 5．常用 DNA 分子量标准参照物. 24 -IV 百度文库 - 好好学习，天天向上 二、常用缓冲液 . 26 1．分子克隆常用缓冲液 . 26 2．磷酸缓冲液 . 26 3．电泳缓冲液 . 27 4．凝胶加样缓冲液 . 29 5．各种 pH 值的 Tris 缓冲液的配制 30 7．温度对常用缓冲液 pH 的影响. 33 三、常用酶的配制 . 33 1．溶菌酶 . 33 2．蛋白水解酶类 . 33 3．无 DNA 酶的 RNA 酶 34 四、常用抗生素溶液 . 34 五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 35 六、常用凝胶的技术参数 . 36 1．葡聚糖凝胶的某些技术数据 36 2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 38 3．琼脂糖凝胶的技术数据 . 39 4．各处凝胶所允许的最大操作压 40 5．琼脂糖凝胶浓度与线性DNA 分辨范围. 40 6．染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 40 7．染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 41 七、氨基酸的特性 . 41 八、遗传密码 . 43 九、常用酸碱技术参数 . 44 1．常见的市售酸碱的浓度 . 44 2．各种浓度的酸碱贮存液的近似pH 值. 45 -V 百度文库 - 好好学习，天天向上 -VI 百度文库 - 好好学习，天天向上 常用贮液与溶液常用贮液与溶液 1mol/L1mol/L 亚精胺（亚精胺（SpermidineSpermidine）） 溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L1mol/L 精胺（精胺（SpermineSpermine）） 溶解 3.48g 精胺于足量的水中，使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L10mol/L 乙酸胺（乙酸胺（ammonium acetateammonium acetate）） 将