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试验室常用试剂配方

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试验室常用试剂配方

百度文库 - 好好学习,天天向上 常用试剂的配方常用试剂的配方 常用贮液与溶液 . 1 1mol/L 亚精胺(Spermidine) 1 1mol/L 精胺(Spermine) . 1 10mol/L 乙酸胺(ammonium acetate) 1 10mg/ml 牛血清蛋白BSA). 1 1mol/L 二硫苏糖醇(DTT). 1 8mol/L 乙酸钾(potassium acetate) 1 1mol/L 氯化钾(KCl) 1 3mol/L 乙酸钠(sodium acetate). 1 L EDTA 1 1mol/L HEPES 1 1mol/L HCl 1 25mg/ml IPGT. 2 1mol/LMgCl2. 2 100mmol/L PMSF . 2 20mg/ml 蛋白酶 K(proteinase K) 2 10mg/mlRnase(无 DNase) (DNase-free RNase). 2 5mol/L 氯化钠(NaCl) 2 10N 氢氧化钠(NaOH) . 2 10%SDS(十二烷基硫酸钠) 2 2mol/L 山梨(糖)醇(Sorbitol) 2 100%三氯乙酸(TCA) . 2 % X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷). 2 100Denhardt 试剂(Denhardt’s regent) 2 10标准 DNA 连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer) (粘端、平端连接) . 3 -I 百度文库 - 好好学习,天天向上 100 mmol/L dNTP溶液(dNTP solutions) 3 20%PEG 8000/2.5M NaCl. 4 20SSC 4 DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水 . 4 甲酰胺(deionized amide) . 4 TE(用于悬浮和贮存 DNA). 4 Tris 缓冲液(Tris-HCl buffer) . 5 30丙烯酰胺溶液 5 40丙烯酰胺 5 放线菌素 D 溶液 6 L 腺苷三磷酸(ATP)溶液. 6 10mol/L 乙酸酰溶液. 6 10过硫酸铵溶液 6 BCIP 溶液 . 6 2BES 缓冲盐溶液. 7 1mol/L CaCl2溶液 7 L CaCl2溶液. 7 1mol/L 二硫苏糖醇(DTT)溶液. 7 脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液 7 L EDTA溶液. 8 溴化乙锭(10mg/ml 溶液) 8 2HEPES 缓冲盐溶液 9 IPTG 溶液 . 9 1mol/L 乙酸镁溶液. 9 1mol/L MgCl2溶液 9 β -巯基乙醇(BME)溶液 . 9 NBT 溶液 10 -II 百度文库 - 好好学习,天天向上 酚/氯仿溶液 10 10mmol/L 苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液 . 10 磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液 10 1mol/L 乙酸钾()溶液11 乙酸钾溶液(用于碱裂解) 11 3mol/L 乙酸钠(和)溶液11 5mol/L NaCl溶液 11 10十二烷基硫酸钠(SDS)溶液11 20SSC 溶液. 12 20SSPE 溶液. 12 100三氯乙酸溶液 12 1mol/L Tris溶液 12 Tris 缓冲盐溶液(TBS) (25mmol/L Tris). 13 X-gal 溶液 . 13 PBS. 13 TBS 13 枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer) 14 胰酶(Trypsin) . 14 胃酶(Pepsin) . 14 DAB. 14 AEC . 15 RIPA. 15 9、Blotto A 15 10、Blotto B 15 电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 . 15 电泳缓冲液 . 15 染料 . 16 -III 百度文库 - 好好学习,天天向上 10mg/ml 的溴化乙锭(ethidium bromide) 16 凝胶上样液(gel loading solutions) 16 6聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存) 17 6溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存) . 17 6甘油凝胶上样液(4℃贮存). 18 6蔗糖凝胶上样液(室温贮存) 18 10十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存). 18 常用培养基 . 19 LB 培养基 . 19 SOC 培养基. 20 TB 培养基 . 20 YPD 培养基 20 常用抗生素 . 21 氨苄青霉素(ampicillin) (100mg/ml). 21 羧苄青霉素(carbenicillin) (50mg/ml) . 21 甲氧西林(methicillin) (100mg/ml) 21 卡那霉素(kanamycin) (10mg/ml) 21 氯霉素(chloramphenicol) (25mg/ml) 21 链霉素(streptomycin) (50mg/ml) 21 萘啶酮酸(nalidixic acid) (5mg/ml) . 21 四环素(tetracyyline) (10mg/ml) 21 实验室常用贮存液的配制参数 . 22 一、核酸及蛋白质常用数据 . 22 2.常用核酸的长度与分子量 . 22 3.常用核酸蛋白换算数据 . 23 4.常用蛋白质分子量标准参照物 24 5.常用 DNA 分子量标准参照物. 24 -IV 百度文库 - 好好学习,天天向上 二、常用缓冲液 . 26 1.分子克隆常用缓冲液 . 26 2.磷酸缓冲液 . 26 3.电泳缓冲液 . 27 4.凝胶加样缓冲液 . 29 5.各种 pH 值的 Tris 缓冲液的配制 30 7.温度对常用缓冲液 pH 的影响. 33 三、常用酶的配制 . 33 1.溶菌酶 . 33 2.蛋白水解酶类 . 33 3.无 DNA 酶的 RNA 酶 34 四、常用抗生素溶液 . 34 五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 35 六、常用凝胶的技术参数 . 36 1.葡聚糖凝胶的某些技术数据 36 2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 38 3.琼脂糖凝胶的技术数据 . 39 4.各处凝胶所允许的最大操作压 40 5.琼脂糖凝胶浓度与线性DNA 分辨范围. 40 6.染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 40 7.染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 41 七、氨基酸的特性 . 41 八、遗传密码 . 43 九、常用酸碱技术参数 . 44 1.常见的市售酸碱的浓度 . 44 2.各种浓度的酸碱贮存液的近似pH 值. 45 -V 百度文库 - 好好学习,天天向上 -VI 百度文库 - 好好学习,天天向上 常用贮液与溶液常用贮液与溶液 1mol/L1mol/L 亚精胺(亚精胺(SpermidineSpermidine)) 溶解 2.55g 亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L1mol/L 精胺(精胺(SpermineSpermine)) 溶解 3.48g 精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L10mol/L 乙酸胺(乙酸胺(ammonium acetateammonium acetate)) 将

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