菌种生产质量保证制度
菌种生产质量保证制度 一、目的:为了规范菌种生产的各个环节,保证菌种质量防止不合格 的菌种流入市场,特制定本制度。 二、范围:工厂内所有人员及场所。 三、引用文件 GB/T21125—2007《食用菌品种选育技术规范》; GB4789.28—1994.22《食品卫生微生物学检验、染色法、培养基和 试剂》; GB9688—1988《食品包装用聚乙烯成型品卫生标准》; 四、技术要求 4.1 工厂内检验员和技术人员需持相关专业证书上岗,所有工作一 律持健康证上岗; 4.2 所有厂房、设施及设备、水电每日检查并保证运转正常,保持 通风; 4.3 接种室、冷却室、培养室、贮存室每日用0.5%过氧乙酸消毒; 4.4 万级净化区域的粗、中、高效过滤网每15 天更换一次; 4.5 超净工作台的百级层流罩每 7 天检查一次; 4.6 高压灭菌锅每半年经技术监督局检验1 次; 4.7 各种检验用计量器、温度计、湿度计、 CO2仪每 10 天校正 1 次,每 6 个月由国家相关单位校验 1 次; 4.8 容器要求 4.8.1 母种:试管 18mmX180mm,棉塞为梳棉; 4.8.2 母种:750ml 耐高温玻璃菌种瓶,棉塞应符合要求; 4.9 品种及扩大 4.9.1 品种必须为省级以上国家等级品种并清楚种性,并向供应商 索取技术资质及相关证明,否则不能使用; 4.9.2 扩大时母种仅用于移植扩大原种,一支母种扩大原种不应超 过 6 瓶,一支母种移植扩大栽培种不超过 50 瓶(袋); 4.10 试剂要求 4.10.1 化学试剂类如硫酸镁、磷酸二氢钾用化学纯级试剂; 4.10.2 生物试剂和天然材料 生物试剂如酵母粉、蛋白胨,天然材料如木屑、麸皮等,要求新 鲜、无虫、无螨、无霉、洁净干燥; 4.11 母种、培养基、PH 值应保持 PH6.5—7.0 之间; 4.12 原种培养基含水量应保持在 62%以内,PH6.5—7.0 之间; 4.13 分装 4.13.1 母种培养基应不大于试管长度五分之一,斜面顶端距试管 口不少于 50mm; 4.13.2 原种培养基瓶(袋)口不少于 60mm,灭菌后不少于 45mm,棉 塞大小松紧度要适度,培养基松紧度要一致; 4.14 灭菌母种 0.11MPa—0.12MPa,40 分钟 原种 0.12MPa—0.14Mpa,3 小时 4.15,灭菌完后每次作灭菌效果、微生物检查,按照GB4789.28- 1994.22 标准执行 48h,必须无微生物长出; 4.16 工厂各场所每日班前班后彻底进行卫生清洁和除尘处理; 4.17 接种室、万级净化每日提前 30 分钟开启,每日完后臭氧消 毒 4 小时,每日用 0.5%过氧乙酸消毒拖地,晚会上开启紫外线灯; 4.18 所有洁净区工作人员必须按洁净区要求操作,进入前必须公 司卫生制度要求进行,特别是洗手、更衣、消毒灯; 4.19 超净工作台每日用前用 75%酒精擦拭后提前预净 30 分钟; 4.20 接种后必须贴好标签,并做好班次记录; 4.21 各班组的记录及菌种记录需记录清楚完整并统一保存; 4.22 培养期间,分别在 7 天、12 天、20 天、培养完成后分拣出 不合格菌种,不合格品给予报废并做好记录; 4.23 及时入库,提前保持冷库温度及消毒卫生,并做好入库记 录,按批次存放并标示清楚。 五、质量要求 5.1 质量要求 5.1.1 容器规格应符合 NY/T528-2002 规定。 5.1.2 感官要求应符合表 1 规定。 表 1母种感官要求 项目 容器 棉塞或无棉塑料盖 要求 完整,无缺损 干燥、洁净、松紧适度,能满足透气和 滤菌要求 培养基灌入量 培养基斜面长度 接种量(接种块大小) 菌丝生长量 菌丝体特征 菌种外观 菌丝体表面 菌丝分泌物 菌落边缘 杂菌菌落 斜面背面外观 为事关总容积的四分之一至五分之一 顶端局棉塞 40mm~50mm (3~5)mm ×(3~5)mm 长满斜面 洁白浓密、棉毛状 均匀、平整、无角变 无 整齐 无 培养基不干缩,颜色均匀、无暗斑、无 色素 有各菇菌种特有的香味,无酸、臭、霉 等异味 气味 5.1.3 微生物学要求应符合表 2 规定。 表 2 母种微生物学要求 项目 菌丝生长状态 锁状联合 杂菌 要求 粗壮、丰满、均匀 有 无 5.1.4 菌丝生长速度:在 PDA 培养基上,在适温(20℃±1℃) 下,长满斜面 10 天~14 天。 5.1.5 母钟栽培性状:母种供种单位,需经出菇室试验确证农艺性 状和商品性等种性合格后,方可用于扩大繁殖或出售。 5.2 原种 5.2.1 容器规格应符合 NY/T528-2002 中的规定。 5.2.2 感官要求应符合表 3 规定 表 3 原种感官要求 项目 容器 棉塞或无棉塑料盖 培养基上表面距瓶(袋)口的距 离 接种量(每支母种接原种数,接 种物大小) 菌丝生长量 菌丝体特征 培养物表面菌丝体 菌种外观 培养基及菌丝体 长满容器 洁白浓密、生长旺健 均匀,无角变,无高温抑制线 紧贴甁壁,无干缩 (4~6)瓶(袋),≥12 mm<15 mm 要求 完整,无损 干燥、洁净,松紧适度,能满足透气 和滤菌要求 50 mm±5 mm 培养物表面分泌物无,允许有少量深黄色至棕褐色水珠 杂菌菌落 颉颃现象 子实体原基 气味 无 无 无 有各菇菌种特有的香味,无酸、臭、 霉等异味 5.2.3 微生物学要求应符合表 2 规定。 5.2.4 菌丝生长速度:在适宜培养基上,在适温(23℃±2℃) 下,菌丝长满容器应 35 天~50 天。 5.3 栽培种 5.3.1 容器规格应符合 NY/T528-2002 中的规定。 5.3.2 感官要求应符合表 4 规定。 表 4 栽培种感官要求 项目 容器 棉塞或无棉塑料盖 要求 完整,无损 干燥、洁净,松紧适度,能满足透 气和滤菌要求 培养基表面距瓶(袋)口的距离 接种量(每瓶原种接栽培种数) 菌丝生长量 菌丝体特征 不同部位菌丝体 培养基及菌丝体 菌种外观 50 mm±5 mm (30~50)瓶(袋) 长满容器 洁白浓密、生长旺健 生长均匀,无角变,无高温抑制线 紧贴甁壁,无干缩 培养物表面分泌物无或允许有少量深黄色至棕褐色水 珠 杂菌菌落 颉颃现象 子实体原基 气味 无 无 无 有各菇菌种特有的香味,无酸、 臭、霉等异味 5.3.3 微生物学要求应符合表 2 规定。 5.3.4 菌丝生长速度:在适宜培养基上,在适温(23℃±2℃) 下,菌丝长满容器应 40 天~50 天。 六、抽样 6.1 质检部门的抽样应具有代表性。 6.2 母种按品种、培养条件、接种时间分批编号;原种、栽培种按 菌种来源、制种方法和接种时间分批编号。按批随机抽取被检样品。 6.3 母种、原种、栽培种的抽样量分别为该批菌种量的 10%、5%、 1%。但每批抽样数量不得少于 10 支(瓶、袋);超过 100 支(瓶、 袋)的,可进行两级抽样。 七、试验方法 7.1 感官检验按表 5 逐项进行 表 5 检验项目 容器 棉塞、无棉塑 料盖 母种培养基灌 入量 母种斜面长度 母种斜面背面 外观 检验方法 肉眼观察 接种 量 检验项目 母种、原种 栽培种 检验方法 肉眼观察、