APP外膜脂蛋白基因克隆、原核表达及免疫原性初步研究的开题报告

精品文档---下载后可任意编辑 APP外膜脂蛋白基因克隆、原核表达及免疫原性初步讨论的开题报告 题目：APP外膜脂蛋白基因克隆、原核表达及免疫原性初步讨论 讨论背景： β-淀粉样蛋白前体（APP）是阿尔茨海默病（AD）的重要病理蛋白，APP的代谢异常导致淀粉样β物的形成，是AD发病的重要因素之一。APP外膜蛋白是由APP切割后的C端多肽产生的，其具有免疫原性。因此，APP外膜蛋白的免疫学讨论很有意义，不仅有助于阿尔茨海默病的治疗，同时也对免疫调节与免疫疫苗的讨论有一定的意义。本讨论拟利用基因工程技术克隆APP外膜脂蛋白基因并进行原核表达，探究其免疫原性，为阿尔茨海默病的治疗提供新的思路。 讨论内容： 1.设计外膜脂蛋白基因的引物，从AD患者的外周血中提取总RNA，进行逆转录PCR扩增，获得APP外膜脂蛋白基因； 2.将克隆的APP外膜脂蛋白基因构建到原核表达载体中，进行原核表达； 3.分离得到表达的重组蛋白，通过Western blotting检测其表达情况，利用兔抗鼠IgG一抗和HRP标记的羊抗兔次抗进行检测； 4.利用ELISA检测重组蛋白的免疫反应性，评价其免疫原性，探讨其在阿尔茨海默病治疗中的潜在应用。 讨论意义： 本讨论拟利用基因工程技术克隆APP外膜脂蛋白基因并进行原核表达，探究其免疫原性，为阿尔茨海默病的治疗提供新的思路。通过本讨论的开展，有望为阿尔茨海默病的治疗提供新的策略和方法，同时对免疫调节与免疫疫苗的讨论也具有一定的意义。