病原微生物标本采集、运送

病原微生物检验标本采集、运送操作规程病原微生物检验标本采集、运送操作规程 正确的标本采集，运送，保存和处理对于微生物检验工作质量至关重要，为 了准确检出病原菌，避免漏检与误诊， 临床医护人员和实验室工作人员应掌握微 生物标本的选择，采集，运送，保存及处理的一般原则。 一、标本采集的一般原则一、标本采集的一般原则 1.早期采集 采集时间最好在病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药物之前采集，确保 病原菌的检出。 2.无菌操作 采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近或皮肤黏膜正常菌群的污染， 使 病原菌与正常菌群混淆，造成临床误诊。采集的标本应存放在无菌容器内，容器 不能使用消毒剂处理，标本中也不能添加防腐剂，以免降低病原菌的检出。 3.适量的标本 标本量过少可能导致假阴性结果。 4.适当的采集方法 对于厌氧菌， 需氧菌或兼性厌氧菌的采集方法是不同的，用于厌氧菌培养的 标本应尽量用注射器采集抽取物，室温保存，不能冷藏和冷冻。 5.盛放标本的容器 采集标本应存放在无菌，防漏，应带有螺旋盖的容器内。 二、标本的运送二、标本的运送 1.标本采集后立即送检，若有延迟也应在2 小时内送到实验室，否则会影响病原 菌的检出，一般性的细菌培养标本若需延迟送检时，应置于 4 度冰箱保存，且不 能超过 24 小时。 2.临床标本最佳运送时间取决于标本的量，少量液体（小于 1ml）或组织（小于 1cm3）应在 15~30 分钟内送到实验室，较多量的标本置于运送培养基中可放 12~24 小时，厌氧培养标本原则上是床边接种，如延迟送检，需保存在厌氧运送 培养基中，室温保存，不得超过 24 小时。 三、不同标本的采集，运送三、不同标本的采集，运送 （一）血液标本采集，运送 1.血培养指针征 当患者出现：发热（大于 38 度）或低温（小于 36 度） ，寒战，白细胞增多, 皮肤黏膜出血，休克，多器官衰竭，血压降低，c 反应蛋白升高及呼吸加快，血 液病患者出现粒细胞减少，血小板减少等，具备上述一种或几种体征时，临床怀 疑菌血症应采集血液标本进行血培养， 对入院危重感染患者应在未使用抗菌药物 治疗前，及时做血培养。 2.对怀疑菌血症、真菌血症的患者，在考虑使用抗菌药物之前，应立即采集血培 养标本。必须同时或间隔短时间内采集２套以上血培养标本。成年患者：推荐同 时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本） ， 采血量每瓶不少于 5ml;婴幼儿患者： 推荐同时采集２次 （不同部位） 血培养标本, 采血量每瓶不少于 2ml。 （少于病人总血容量的 1%）.在采取血培养后的 2—5 天 内， 无需重复采取血培养。 两个例外： 细菌性心内膜炎和金黄色葡萄球菌菌血症。 3.血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。 检出率与采血量成比例增长， 每增加 1ml 的血液， 病原菌的检出率就会相应 增加。 儿童患者血液中病原菌浓度较高， 血培养量无需等同于成人。 采用一对 （需 氧瓶+厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌 科细菌和厌氧菌。采血量不能满足推荐的量时，应首先满足需氧瓶的需要。 推荐从外周静脉采集血液标本,不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如 果必须从留置导管内采血， 也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助 阳性结果的判读。 4.血标本采集的注意事项 在采血之前， 血培养瓶的橡皮塞需使用 75%酒精消毒并干燥。 然后再进行穿 刺部位的皮肤消毒。严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤操作，并 等待足够的消毒时间。严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非 带有无菌手套.不推荐采血和接种血培养瓶更换注射器针头;采集后的血培养瓶应 在 1 小时之内送往实验室,血培养瓶在接种前和接种后均不得冷藏或冷冻。 (二)痰培养标本采集，运送 1.痰培养指征 上呼吸道感染包括咽炎，喉炎，会咽炎等都可采集鼻，鼻咽，口咽拭子标本 培养。下呼吸道感染：凡是咳嗽，咳痰，痰呈脓性，粘稠或血性等都可采集痰标 本。 2.标本的采集 采集前嘱咐病人先用清水漱口， 摘去牙托， 因唾液中口咽部定植菌的浓度可 达 108-109/ml，去除表面的菌群。教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液。 在抗生素应用前采集痰标本;标本采集后 1～2h 内送往实验室进行处理，采集标 本过程中要有专业的医务人员指导;无痰可用 3％～5％NaCl 5ml 雾吸约 5min 导 痰；也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等方法取痰。 3.正常的痰标本 低倍视野下鳞状上皮细胞小于 25 个，白细胞大于 10 个。 如果低倍视野下鳞 状上皮细胞大于 25 个，白细胞小于 10 个应不做或仅在特殊要求时做培养，如做 培养，报告中注明“镜检结果表明标本口咽分泌物污染明显” 。 4 痰培养方法的局限性 多数引起肺炎的病原菌不能培养出，如病毒，军团菌，衣原体等。影响因素 很多：如黏液包裹、定植菌污染。建议痰培养同时做血培养和痰涂片镜检。 5.注意事项 常规的痰培养需在 2 小时内送检，若怀疑嗜血杆菌，肺炎链球菌感染时必需 随留随送;标本中不能混入唾液与鼻咽分泌物等。 （三）尿培养标本采集，运送 1.尿培养指征 尿路感染，肾结核，泌尿系结石，膀胱排空功能受损或前列腺增生等患者， 出现尿频，尿急，尿痛等膀胱刺激症状，肉眼脓尿或血尿，尿常规检查有白细胞 或亚硝酸盐阳性， ，不明原因的发热，尿道口有脓性分泌物等症状，需采集尿培 养标本送检。 2.标本的采集 清洁中段尿液，嘱咐患者用肥皂水清洗，弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道 口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿；导尿管尿液，留置导管尿液标本 常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液，采样端口用 酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过 30 分钟；将注射器针头插入采 样端口，抽吸出尿液；注入无菌杯或试管中。膀胱穿刺尿，无菌操作，用无菌注 射器刺入膀胱抽取 5—10ml 尿液送检， 主要用于厌氧菌的培养或留取标本困难的 婴幼儿标本的采集，此法可避免尿液标本的污染。 3.标本的采集量 一般成人采集 10-15ml,婴幼儿不得少于 1ml。诊断症状明显的病人（如尿急、尿 频、尿痛） ，一份标本就已足够，治疗 48-72 小时后再采集第二份标本。对于症 状不明显的病人，需采集 2-3 份标本。怀疑肾结核时，应连续 3 天采集晨尿。 4.室温都有利于病原菌和污染菌生长繁殖，标本采集后立即送检和接种，室温下 存放不能超过 2 小时， （夏季保存时间应适当缩短或冷藏） ，4-8 度冷藏保存时间 也不能超过 24 小时，冷藏的尿液不能用于淋球菌的培养。 5．注意事项 必须无菌操作，采用带盖防渗漏的无菌杯收集，多次收集或 24 小时尿不能 用作培养。集尿袋内的尿液不能用作培养。导尿管末端的尿液也不能用于培养， 很难避免没有尿道菌群污染。在使用抗菌药物前留取标本，尿液中不能加任何防 腐剂或消毒剂，抑制细菌的生长。 （四）粪便标本采集，运送 1.送检指征 当患者出现腹泻，大便每天大于或等于 3 次，粪便的性状异常，可为稀便， 水样便，粘液便，脓血便或血便，伴有恶心，呕吐，食欲不振，发热，