动物学试验蛔虫及寄生蠕虫卵的检查

动物学实验蛔虫及寄生蠕虫卵的检查 一、 目的 了解蛔虫的形态结构以及线形动物（假体腔动物）的一 般特征；学习几种常见寄生蠕虫卵的检查方法。 二、 内容 （一） 观察蛔虫浸制标本的外部形态。 （二） 解剖并观察蛔虫内部结构。 （三） 显微镜下观察蛔虫横切片玻片标本。 （四） 寄生蠕虫卵的检查。 （五） 线形动物重要代表示范。 三、 实验材料和用具 人蛔虫或猪蛔虫、马蛔虫浸制及横切面玻片标本。事先 准备的学生自己粪便样品。 放大镜、解剖镜、显微镜、蜡盘、尖头镊、解剖剪、解 剖针、大头针、三角量杯（或称锥形量杯） 、长吸管、筛子、 玻璃漏斗、玻璃棒、载玻片、盖玻片、离心机、离心管、锥 形瓶、烧杯、竹签、火柴棒或牙签、 4%煤酚皂、试管及试管 架等。 生理盐水、 饱和盐水 （37.5g NaCl 或食盐， 加热水 100ml） 或 33%硫酸锌。 四、 实验操作及观察 检查蠕虫卵时，盛粪便的容器应洁净，粪便要新鲜且量 不宜太少；鉴别虫卵时，要与气泡、脂肪滴、孢子等杂物区 别开来。 （一） 蛔虫 1． 外形：前端圆，后端尖。雄虫后端向腹面弯曲，有 两根交接刺，常由绁殖腔孔中伸出。雄虫较粗大，后端不弯 曲， 肛门开口于腹面近体末端； 生殖孔开口于前端腹面约 1/3 处。体表角质膜上有很多细横纹，前端中央有口，口的背侧 有 1 个背唇，腹侧有 2 个腹唇，背唇上有 2 个、腹唇上有 1 个乳突。腹面前端，离腹唇 2mm 处有 1 个排泄孔。 2． 内部解剖：取雌、雄虫置蜡盘上，略加水，便于观 察。 （1） 体线：背、腹面的正中分别有 1 条背线和腹线， 两侧各有 1 条侧线。 （2） 消化系统：由口、咽、肠、直肠及肛门组成的长 扁形消化管。 （3） 排泄系统：排泄管 2 条，分别位于侧线中。 （4） 生殖系统：雌雄异体。 雄性：体中部近前端有一细长、弯曲的管状精巢，由较 短的输精管与较粗大的管状储精囊相通。储精囊连接细直的 射精管，其末端雄孔开口于泄殖腔中。 雌性：体中部近后端有 2 条细长、弯曲的管状卵巢，各 通入输卵管，再通入较大的子宫。2 条子宫汇合成管状的阴 道，末端的生殖孔开口于腹面前端约 1/3 处。 3． 横切面玻片标本的观察： （1） 角质膜：身体表面一层非细胞构造的膜。 （2） 表皮层：位于角质膜内侧，细胞界限不分明，仅 可见颗粒状的细胞核及纵行纤维。 （3） 体线：4 条，纵行，由表皮层向内增厚形成。 背线及腹线：细，在身体背面及腹面的正中，二者形状 完全相同。背、腹线的内侧膨大呈圆形，内含背神经及腹神 经。腹神经比背神经粗，可以此区分背、腹线。 侧线：位于体两侧。其内侧有一圆孔，即排泄管。 （4） 肌肉层：较厚，被 4 条体线分隔成 4 个部分，每 个部分由许多纵肌肉细胞组成。每个纵肌肉细胞分成以下两 部分： 收缩部：位于基部，含横行细纤维，富有弹性，能收缩。 原生质部：位于端部，含原生质和细胞核。 （5） 肠：为体腔中央一扁圆形的管道，由单层柱状上 皮细胞组成。肠中间的空隙为肠腔。 （6） 原体腔：肠与体壁之间的空腔。 （7） 卵巢、输卵管和子宫：在体腔中可见形似车轮的 卵巢，中心称轴，周围有辐射状排列的卵原细胞。输卵管较 粗，圆形，轴已消失。子宫更粗，圆形，有明显的空隙，内 含卵。 （8） 精巢、输精管和储精囊：在体腔中可见形似车轮 的精巢，中心称轴，周围有辐射状排列的精原细胞。输精管 较粗，圆形，含颗粒状精细胞，轴已消失。储精囊更粗，圆 形，有明显的空腔，含条形精子。 （二） 寄生蠕虫卵的检查： 1． 常用蠕虫卵的检查： （1） 涂片法：在清洁的载玻片中央滴一滴生理盐水， 用竹签或火柴棒挑取少量粪便（约芝麻大） ，置于载玻片上 的生理盐水中，均匀涂布。加盖玻片后在低倍镜下检查，再 换高倍镜证实。 （2） 浮集法：利用虫卵比重小于饱和盐水直至而浮于 液面上的原理，收集漂浮的液膜进行检查（此法不适于有盖 的虫卵及未受精的蛔虫卵） 。以竹签挑取蚕豆大的粪便一块 （约重 1g）置于试管中， 先加少量饱和盐水（或 33%硫酸锌 溶液） ，用玻璃棒将粪便调匀，再边加饱和盐水边搅匀。除 去上浮的粗粪渣，加饱和盐水直至稍高出试管口而不外溢出 为止，立即在试管口上覆一干净的载玻片或盖玻片。在试管 架上静止 15-20min 后， 将载玻片或盖玻片取下，加上盖玻片 或将盖玻片放在载玻片上，置显微镜下检查。 （3） 离心沉淀浓集法：利用虫卵比重大于水的原理， 通过离心沉淀使虫卵迅速沉集管底，吸取管底沉渣检查。以 竹签取蚕豆大的粪便一块， 置烧杯中加少量水调匀。 经筛子、 漏斗装入离心管中，加上清水后离心（1500r/min）3min。取 出离心管，倾去上层夜，再加水调匀，离心沉淀，反复几次 直至上层夜澄清为止。最后倾去上层液，洗去沉渣镜检。 （4） 孵化法：先作离心沉淀，将沉渣倒入 1000mL 的 锥形瓶中，加清水至瓶口，置于20～28℃的恒温箱中。箱内 有照明设备，以利虫孵化。经 12h 后，开始观察，72h 后取 出观察孵化结果。此法适用于血吸虫卵内的毛蝣孵化，不适 用于钩虫卵的钩蝣孵化。 2.常见寄生虫的鉴别： （1）蛔虫卵：分受精卵于未受精卵 2 种，两者在形态 上不同。 受精卵：短椭圆形，壳厚，外有一层凹凸不平的蛋白膜 （有时脱落） ；内含一个圆形的卵细胞，细胞两端与壳之间 的空隙呈新月形。 未受精卵：较不规则，比受精卵狭长；壳与蛋白膜（有 时脱落）较薄；内含反光性较强的卵黄颗粒，呈油滴状。 （2）蛲虫卵：无色透明，芒果形，一侧扁平，一侧隆 起，壳厚，内含一幼虫。 （3）钩虫卵：椭圆形，无色透明，壳薄，两端钝圆。 一般在新鲜粪便中虫卵含 4～8 个卵细胞。卵细胞和卵壳之 间有较大而清楚的空隙。 （4）血吸虫卵：淡黄色，椭圆形，卵壳较薄，无盖， 一侧有小刺，小刺常因虫卵位置不同或卵壳上附着污物而不 易看见。成熟卵内含有 1 个毛蚴。 （5）华枝睾吸虫卵：为常见寄生蠕虫卵中最小的。黄 褐色，形如芝麻或灯泡状，前端稍窄，有一小盖及肩峰，后 端钝圆，有一逗点状突起。卵内含一毛蚴。 （6）猪绦虫卵：黄褐色，圆形。胚膜厚，具辐射状条 纹，内含 1 个六钩蚴。在粪便中查见的虫卵，其卵壳多已脱 落。 五、示范 （一） 蛲虫 （Enterobius vermicularis） ： 寄生于人的盲肠、 阑尾、结肠与直肠等处。虫体白色，细线头状，雌虫较长， 后端尖细；雄虫较短，尾部弯曲。妊娠雌虫多于夜间移行于 肛门和会阴附件皮肤上产卵。 （二）十二指肠钩虫（Ancylostoma duodenale）:寄生于 人的小肠内。虫体头部有一相当深的口囊，口囊腹面两侧有 钩齿 2 对。雌虫较大，生殖孔在身体的后半部；雌虫较小， 尾端有一盘形的交合伞。 （三）铁线虫（Gordius aquaticus）:成虫自由生活于土 壤或淡水钩渠中，长可达 1m。雄虫尾端叉状；雌虫尾部尖 锥状。卵产于水中，幼虫寄生节肢动物的血腔内，将成熟时 离开寄生，回到水中生活。 （四）猪巨吻棘虫（Macracan thorhynchus）:常寄生于猪 肠内。虫体乳白色或淡红色，呈长圆筒形，表面有横行的细 皱纹。前端有一可伸缩的吻，上具 5～