完整版HPLC校验方案

西安益尔渭之阳制药有限公司西安益尔渭之阳制药有限公司 高效液相色谱仪校验报告高效液相色谱仪校验报告 (Xi(Xi’’ an Yier Weizhiyang Pharmaceutical CO.,LTD HPLC Calibration Protocol)an Yier Weizhiyang Pharmaceutical CO.,LTD HPLC Calibration Protocol) 报告准备：报告准备： Prepared by:Prepared by: 报告复核：报告复核： Reviewed by:Reviewed by: 报告许可：报告许可： Approved by:Approved by: 时间：时间： Date:Date: 时间：时间： Date:Date: 时间：时间： Date:Date: 二零零五年三月二零零五年三月 1 高效液相色谱仪校验报告高效液相色谱仪校验报告 Detail HPLC Calibration protocol 1. 适用范围 该方案仅针对于本公司新购， 使用中以及大修后的具有紫外-可见波长检测器 的高效液相色谱仪(HPLC)的检定。 2. 检定结果处理和检定周期 按此要求检定合格的仪器为合格仪器，反之，为不合格。 仪器的检定周期为 1 年。 3. 校验依据 中华人民共和国国家计量检定规程JJG 705-2002《液相色谱仪》 4. 液相色谱检定的主要技术指标 检定项目检定项目 外观 流量设定误差 泵流量稳定性误差 梯度准确度误差 温度设定误差 柱温箱 控温稳定性误差 基线漂移(AU/h) 基线噪声(AU) 最小检测浓度(g/ml) 检测器 波长示值误差 波长示值重复性 线性范围 定性测量重复性误差 标准标准 参见校验报告 5% 3% 3% 2C 1C 5X10-3 5X10-4 1X10-7 2nm 2nm ≥ 103 1.5% 2.0% 2.0% 2 定性、定量重复性 定量测量重复性误差 手动进样器相对准确度 5.校验内容 5-1检定环境 要求 温度 相对湿度 5-2受检仪器组成 液相色谱 手动进样器 泵 柱温箱 检测器 5-3检定设备 仪器有效期 设备编号： 结果 15C ~30 C 20%~ 85% 型号 型号 型号 型号 型号 制造商 序列号 序列号 序列号 序列号 备注 秒表确认机构： 证书编号: 电子天平设备编号: 分析天平确认机构： 证书编号: 设备编号: 数字温度计 5-4 标准物质 名称 萘-甲醇溶液 确认机构： 证书编号: 编号有效期 紫外分光光度计溶液标准物质 5校验要求及结果 3 5-5-1外观的检定 仪器型号 检定员 检查项目 仪器上是否有清晰的名称 仪器上是否有清晰的型号 仪器的旋钮，按键，开关是否正常 仪器输液的接头是否紧密，牢固 仪器在规定的压力范围有无泄漏 结论 5-5-2输液系统的检定 5-5-2-1 泵流量设定值误差和流量稳定性误差的检定 以 100%甲醇为流动相，流量为1ml/min 该流速，待流速稳定后，在流动相排 出口用事先清洗校验过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地记录 规定体积的相应收集时间。 计算泵流量设定值误差 SS和流量稳定性误差的检 定 SR 。结果按下式计算： SS=（FM-FS）/FS×100% SR=（FMAX-FMIN）/F 平均×100% FM=V/t 式中： SS——流量设定值误差（%） FS——流量设定值（ml/min） V ——收集流动相的体积（ml） t ——收集流动相的时间（min） SR——流量稳定性误差（%） FMAX——同一组测量中流量最大值（ml/min） FMIN——同一组测量中流量最小值（ml/min） F 平均——同一组测量值的算术平均值（ml/min） 泵流量设定值误差和流量稳定性误差测量要求及标准 流量设定值（ml/min） 测量次数 收集流动相时间（min） 允许误差 4 日期 复核员 检查结果 0.5 3 8 5% 3% 1.0 3 6 3% 2% 3.0 3 4 2% 2% SS SR 泵流量设定值误差及流量稳定性误差的检定记录 仪器型号 检定员 日期 复核员 泵流量设定值误差及流量稳定性误差接受标准： 泵流量设定值的误差 SS： (2% 5%) 流量稳定性误差 SR： (2% 3%) 流动相 FS t W容量瓶 W容量瓶+W流动相 甲醇 FS= 0.5 ml/min 流动相密度 FS= 1.0 ml/min 0.791 g/cm3 F3= 3.0 ml/min V(ml) Fm Fmean S S SR 结论 5-5-2-2梯度准确度的检定 设置溶剂梯度程序。A 溶液为水，B 溶液为含 0.1%丙酮的水溶液。A 从 100%变 为 0。先以 A 溶液走基线，(流动相不通过色谱柱)，基线平稳后执行梯度程序， 画出梯度变化曲线，并读出在每个测量点的信号值。重复测量两次，求平均值。 从 B 溶液的含量及相对应的信号值 Lmi和 Lm计算梯度准确度 GCi。 GCi最大值为 仪器梯度准确度误差。计算公式如下： GCi = (Lmi– Lm) / Lm x 100% 式中： GCi = 第 i 段梯度准确度; Lmi = 第 i 段输出信号或记录仪的读数; Lm = 各段输出信号或记录仪读数总均值. 5 梯度准确度的检定记录梯度准确度的检定记录 仪器型号日期 检定员复核员 梯度准确度误差接受标准：梯度准确度误差 GCi： 3% 流动相 A B 溶液的变化范围 Time 1记录仪 读数2 Lm Lm(maen) GCi(%) 结论 水 0% 流动相 B0.1%丙酮水溶液F=3.0ml/min 20%40%60%80%100% 5-5-3柱温箱温度控制系统的检定 5-5-3-1柱温箱温度设定值误差Ts与控温稳定性误差 TC 选择最低使用温度(20C)和最高使用温度(60C)进行检定，待指示温度稳定后， 每隔 10 分钟记录一次， 共计 7 次， 求出算术平均值。 设定值与平均值之差为Ts， 7 次测量值中最大值与最小值之差为控温稳定性误差 TC。 柱温箱温度控制系统的检定记录记录 仪器型号日期 检定员复核员 柱温箱温度控制系统的接受标准： 柱温箱温度设定值误差T : 103 线 性 范 围 丙酮% 读数 0. 10. 20. 30. 40. 50. 60. 70. 80. 91. 0 平均值 线性范围 结论 5-5-5 手动进样器进样线性 使用适当的萘-甲醇标准溶液或稳定的待分析样品，以甲醇为流动相， 波长设定为 254nm ，分别进样 5ul 、10ul 、15ul 、20ul ，至少进样 2 针。 记录萘的峰面积，计算其平均峰面积相对于进样量的线性回归。 仪器型号 检定员 日期 复核员 自动进样器相对准确度接受标准： 相对准确度 RA ： 2% V 5ul 10ul 15ul 20ul 线性方程 结论 5-5-6定性，定量测量重复性的检定 使仪器处于正常工作状态，注入适当的萘 -甲醇标准溶液或稳定的待 分析样品，记 录保留时间和峰面积，连续测定 6 次，按如下公式计算 RSD% 。 RSD 定