完整版HPLC校验方案

西安益尔渭之阳制药有限公司西安益尔渭之阳制药有限公司 高效液相色谱仪校验报告高效液相色谱仪校验报告 XiXi’’ an Yier Weizhiyang Pharmaceutical CO.,LTD HPLC Calibration Protocolan Yier Weizhiyang Pharmaceutical CO.,LTD HPLC Calibration Protocol 报告准备报告准备 Prepared byPrepared by 报告复核报告复核 Reviewed byReviewed by 报告许可报告许可 Approved byApproved by 时间时间 DateDate 时间时间 DateDate 时间时间 DateDate 二零零五年三月二零零五年三月 1 高效液相色谱仪校验报告高效液相色谱仪校验报告 Detail HPLC Calibration protocol 1. 适用范围 该方案仅针对于本公司新购， 使用中以及大修后的具有紫外-可见波长检测器 的高效液相色谱仪HPLC的检定。 2. 检定结果处理和检定周期 按此要求检定合格的仪器为合格仪器，反之，为不合格。 仪器的检定周期为 1 年。 3. 校验依据 中华人民共和国国家计量检定规程JJG 705-2002液相色谱仪 4. 液相色谱检定的主要技术指标 检定项目检定项目 外观 流量设定误差 泵流量稳定性误差 梯度准确度误差 温度设定误差 柱温箱 控温稳定性误差 基线漂移AU/h 基线噪声AU 最小检测浓度g/ml 检测器 波长示值误差 波长示值重复性 线性范围 定性测量重复性误差 标准标准 参见校验报告 5 3 3 2C 1C 5X10-3 5X10-4 1X10-7 2nm 2nm ≥ 103 1.5 2.0 2.0 2 定性、定量重复性 定量测量重复性误差 手动进样器相对准确度 5.校验内容 5-1检定环境 要求 温度 相对湿度 5-2受检仪器组成 液相色谱 手动进样器 泵 柱温箱 检测器 5-3检定设备 仪器有效期 设备编号 结果 15C 30 C 20 85 型号 型号 型号 型号 型号 制造商 序列号 序列号 序列号 序列号 备注 秒表确认机构 证书编号 电子天平设备编号 分析天平确认机构 证书编号 设备编号 数字温度计 5-4 标准物质 名称 萘-甲醇溶液 确认机构 证书编号 编号有效期 紫外分光光度计溶液标准物质 5校验要求及结果 3 5-5-1外观的检定 仪器型号 检定员 检查项目 仪器上是否有清晰的名称 仪器上是否有清晰的型号 仪器的旋钮，按键，开关是否正常 仪器输液的接头是否紧密，牢固 仪器在规定的压力范围有无泄漏 结论 5-5-2输液系统的检定 5-5-2-1 泵流量设定值误差和流量稳定性误差的检定 以 100甲醇为流动相，流量为1ml/min 该流速，待流速稳定后，在流动相排 出口用事先清洗校验过的容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确地记录 规定体积的相应收集时间。 计算泵流量设定值误差 SS和流量稳定性误差的检 定 SR 。结果按下式计算 SS（FM-FS）/FS100 SR（FMAX-FMIN）/F 平均100 FMV/t 式中 SS流量设定值误差（） FS流量设定值（ml/min） V 收集流动相的体积（ml） t 收集流动相的时间（min） SR流量稳定性误差（） FMAX同一组测量中流量最大值（ml/min） FMIN同一组测量中流量最小值（ml/min） F 平均同一组测量值的算术平均值（ml/min） 泵流量设定值误差和流量稳定性误差测量要求及标准 流量设定值（ml/min） 测量次数 收集流动相时间（min） 允许误差 4 日期 复核员 检查结果 0.5 3 8 5 3 1.0 3 6 3 2 3.0 3 4 2 2 SS SR 泵流量设定值误差及流量稳定性误差的检定记录 仪器型号 检定员 日期 复核员 泵流量设定值误差及流量稳定性误差接受标准 泵流量设定值的误差 SS 2 5 流量稳定性误差 SR 2 3 流动相 FS t W容量瓶 W容量瓶W流动相 甲醇 FS 0.5 ml/min 流动相密度 FS 1.0 ml/min 0.791 g/cm3 F3 3.0 ml/min Vml Fm Fmean S S SR 结论 5-5-2-2梯度准确度的检定 设置溶剂梯度程序。A 溶液为水，B 溶液为含 0.1丙酮的水溶液。A 从 100变 为 0。先以 A 溶液走基线，流动相不通过色谱柱，基线平稳后执行梯度程序， 画出梯度变化曲线，并读出在每个测量点的信号值。重复测量两次，求平均值。 从 B 溶液的含量及相对应的信号值 Lmi和 Lm计算梯度准确度 GCi。 GCi最大值为 仪器梯度准确度误差。计算公式如下 GCi Lmi– Lm / Lm x 100 式中 GCi 第 i 段梯度准确度; Lmi 第 i 段输出信号或记录仪的读数; Lm 各段输出信号或记录仪读数总均值. 5 梯度准确度的检定记录梯度准确度的检定记录 仪器型号日期 检定员复核员 梯度准确度误差接受标准梯度准确度误差 GCi 3 流动相 A B 溶液的变化范围 Time 1记录仪 读数2 Lm Lmmaen GCi 结论 水 0 流动相 B0.1丙酮水溶液F3.0ml/min 20406080100 5-5-3柱温箱温度控制系统的检定 5-5-3-1柱温箱温度设定值误差Ts与控温稳定性误差 TC 选择最低使用温度20C和最高使用温度60C进行检定，待指示温度稳定后， 每隔 10 分钟记录一次， 共计 7 次， 求出算术平均值。 设定值与平均值之差为Ts， 7 次测量值中最大值与最小值之差为控温稳定性误差 TC。 柱温箱温度控制系统的检定记录记录 仪器型号日期 检定员复核员 柱温箱温度控制系统的接受标准 柱温箱温度设定值误差T 103 线 性 范 围 丙酮 读数 0. 10. 20. 30. 40. 50. 60. 70. 80. 91. 0 平均值 线性范围 结论 5-5-5 手动进样器进样线性 使用适当的萘-甲醇标准溶液或稳定的待分析样品，以甲醇为流动相， 波长设定为 254nm ，分别进样 5ul 、10ul 、15ul 、20ul ，至少进样 2 针。 记录萘的峰面积，计算其平均峰面积相对于进样量的线性回归。 仪器型号 检定员 日期 复核员 自动进样器相对准确度接受标准 相对准确度 RA 2 V 5ul 10ul 15ul 20ul 线性方程 结论 5-5-6定性，定量测量重复性的检定 使仪器处于正常工作状态，注入适当的萘 -甲醇标准溶液或稳定的待 分析样品，记 录保留时间和峰面积，连续测定 6 次，按如下公式计算 RSD 。 RSD 定