《非洲猪瘟专项检测采样技术规范》(征

ICS 点击此处添加 ICS 号 点击此处添加中国标准文献分类号 DB61 陕西省地方标准 DB 61/T XXX—XXXX 非洲猪瘟专项检测采样技术规范 Technical regulations of sample collection for monitoring African swine fever virus (征求意见稿） XXXX-XX-XX  发 布  XXXX-XX-XX  实 施 发 布 目 次 前言 Ⅳ 1 范围 1 2 规范性引用标准 1 3 术语和定义 1 4 采样要求 2 5 入场调查及样品采集 3 6 样品保存、包装与废弃物处理5 7 采样记录6 8 样品运输 6 附录 A 规模猪场非洲猪瘟监测采样分布表7 附录 B 屠宰场非洲猪瘟监测采样分布表8 附录 C 流通环节非洲猪瘟监测采样分布表9 附录 D 无害化处理场非洲猪瘟监测采样分布表10 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件的某些内容可能涉及专利。 本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任 。 本标准起草单位：延安市动物疫病预防控制中心、陕西省动物疫病预防控制中心。 本标准主要起草人： 周宇、李洁、赵光明、师园、李香、焦韵洁、李美文、谷涛、冯秀、白强强、雷元元、杨梅、李素娟、郭世虎、李春花 本文件由延安市动物疫病预防控制中心中心负责解释。 本文件首次发布。 联系信息如下： 单位：延安市动物疫病预防控制中心 电话：0911-2383053 地址：延安市宝塔区文化沟1号院内 邮编：716000 DB61/T XXX—XXXX 非洲猪瘟专项检测采样技术规范 1 范 围 本标准规定了陕西省辖区内规模猪场、屠宰环节、无害化处理场、流通环节及易感野生动物活动区域非洲猪瘟监测样品采集技术的术语和定义、要求、样品采集、样品包装与运输和档案记录等要求。 本标准适用于猪场非洲猪瘟监测样品及疫控系统区域化非洲猪瘟风险评估样品采集。 2 规范性引用标准 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文 件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18648 非洲猪瘟诊断技术 NY/T 541-2016 兽医诊断样品采集、保存与运输技术规范 GB19489 实验室生物安全通用要求 高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范(农业部公告第503号) 农业农村部办公厅关于印发《非洲猪瘟常态化防控技术指南(试行版)》的通知(农办牧〔2020〕41 号) 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 非洲猪瘟(ASF) 是由非洲猪瘟病毒(ASFV)感染家猪和野猪的一种急性、热性、高度接触性动物传染病，以高热、网状内皮系统出血和高死亡率为特征。 3.2 专项监测 专项监测是指采用规定的方法对某种疫病的发生、流行、分布及相关因素进行系统的、长时间的观察与检测。 3.3 监测样品 取自动物或环境，拟通过检测反映个体、群体或者环境有关状况的材料或物料。 3.4 下列缩略语适用于本文件。 ASF：非洲猪瘟(African Swine Fever) ASFV：非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus) EDTA：乙二胺四乙酸(Ethylenediaminetetraacetic Acid) PBS：磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline) PCR：聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction) 4 采样要求 4.1 采样原则 4.1.1 按NY/T541的规定，发生急性死亡的生猪疑为炭疽时不得解剖，应采血涂片镜检，排除炭疽后方可采样。 4.1.2 采集死亡动物的病料以及动物活体采样时，应符合动物伦理的相关规定，动物扑杀应符合动物福利。 4.1.3 无生物安全防护及消毒措施保障情况下，不得对疑似非洲猪瘟病死猪进行剖检。做好环境消毒，动物组织及采样废弃物的无害化处理，避免污染环境，防止疫病扩散传播。 4.1.4 无菌操作，采样过程应注意无菌操作，采样所需用具、棉拭子、纱布、离心管、封口袋、PBS或生理盐水等采样用品应事先严格灭菌，每种样品应该单独采集和盛放。 4.1.5 采样顺序，采样遵循先低风险再高风险的原则，同一场点先采洁净区，再采污染区，同一区域，先养殖场、再屠宰场、流通环节，最后采集无害化处理厂 4.2 采样前的准备 4.2.1 人员准备 应由2名或以上具备相关专业技术知识，熟练掌握采样工作程序和采样操作技术的人员进行采样，采样人员21d内没有接触过非洲猪瘟病死猪及其污染物，采样人员不得驾乘来自非洲猪瘟疫区的车辆，做好个人防护，严格遵守生物安全操作的相关规定，经洗手消毒，穿戴好一次性手套、防护服、口罩、鞋套后，带上采样所需物品到达洗消点。 4.2.2 采样方案 根据采样目的、风险点、疫情等情况制定采样方案，确定样品采集的种类、数量、部位与采样方法等。 4.2.3 采样物品准备 4.2.3.1 防护用品 乳胶手套、PE手套、口罩、帽子、防护服、鞋套或靴套、洗涤剂、刷子、消毒剂、喷壶及护目镜等。 4.2.3.2 采样用品 医用棉签、医用纱布、装有PBS的离心管、真空采血管、EDTA采血管、采血针、试管架、剪刀、镊子、75%酒精棉、密封袋、废弃物垃圾袋、锐器盒等 4.2.3.3 标记包装等其他物品 记号笔、签字笔、采样单、写字板、封条、样品箱、冰袋、吸水纸、密封性好的容器或袋子作为二次包装（即防漏）及保定套索等，可根据实际操作的需要增加采样物品。 4.3 采样方法 4.3.1 血液及血清样品采集：采血过程中应保持无菌操作。采血前，先用酒精棉对采血部位进行局部消毒。采血完毕，进行局部消毒并用干棉球按压止血。使用含有抗凝血剂（EDTA-紫色盖）的真空采 血管从颈静脉、前腔静脉或耳缘静脉抽取全血，使用无添加的真空采血管收集血液，室温放置12h~24h,分离血清，装入离心管 中，密封后冷藏或冷冻保存,。 4.3.2 猪口鼻拭子样品：用医用棉签在口腔或鼻腔转动至少 3圈，采集口 腔、鼻腔的分泌物；蘸取分泌物后，立即将拭子浸入PBS保存液中，剪去露出部分，盖离心管盖，密封后冷藏或冷冻保存。 4.3.3 环境拭子采集：在离心管（或真空采集管）中加入1-2mL生理盐水，将医用棉拭子在离心管中充分湿润，于管壁挤出多余水分（无水滴落）后对采样点或采样区域进行充分擦拭，擦拭面积最好不少于10平方厘米。