大鼠出生后不同时期脾脏结构发育和浆细胞分化

７９６安徽医科大学学报ＡｃｔａＵｎｉｖ ｅｒｓ ｉ ｔ ａｔｉ ｓ Ｍｅ ｄｉｃ ｉ ｎａｌｉ ｓ Ａｎｈｕｉ２０１ ２Ｊｕｌ；４７（７） 大鼠出生后不同时期脾脏结构发育和浆细胞分化 周成现， 冯利杰，沈玉君，黄大可，沈玉先 摘要目的观察大鼠出生后不同发育阶段脾脏的结构变 选取不同发育时期 中图分类号Ｒ３２９．２１ 化和ＣＤ１３８阳性的浆细胞分化。方法 文献标志码Ａ文章编号１ ０００—１４９２（２０１２）０７—０７９６—０４ （出生后１…２３４、６、８、１Ｏ、１２、２２周）大鼠的脾脏，并制备组 织标本。分别采用ＨＥ染色和免疫组织化学技术， 观察脾脏 的结构发育及ＣＤ１３８、ＣＤ６８的表达。结果 ～ ＣＤ６８是巨噬细胞的标志性蛋白，可以吞噬 衰老的红血球、病原体和异物；ＣＤ１３８（又称为Ｓｙｎ— ｄｅｃａｎ．１）是浆细胞的标志性蛋白Ｊ，前Ｂ细胞表达 ＣＤ１３８分子，当成熟Ｂ细胞释放人外周血则ＣＤ１３８ 分子缺失；成熟Ｂ细胞在外周淋巴组织分化为浆细 胞时，又重新表达ＣＤ１３８分子３Ｊ，但大鼠脾脏浆细 胞在脾脏发育过程中的分化还未见报道。为了解 ＣＤ１３８在不同发育时期大鼠脾脏细胞中的动态表 大鼠在出生后１ ４周， 脾脏的白髓和红髓发育不成熟，没有完整的白髓结 构和血管结构， 脾脏组织中无ＣＤ１３８阳性的浆细胞；大鼠在 出生６周后， 脾脏的白髓和红髓中出现血管样结构和少量的 ＣＤ１３８阳性细胞；８周时白髓具有典型的结构特征，并有大 量的ＣＤ１３８阳性细胞；大鼠出生后１周，脾脏组织中有大量 的、散在分布的、 呈分枝状的ＣＤ６８阳性的细胞，而在出生６ 周后，巨噬细胞呈圆形或阿米巴状， 细胞内ＣＤ６８的表达量 也明显增加。结论浆细胞的分化滞后于巨噬细胞，出生早 期机体主要以非特异性免疫为主。 关键词浆细胞；巨噬细胞； 脾脏发育 达， 该研究用ＣＤ６８蛋白做为对照，通过对ＣＤ１３８分 子表达分布的观察，研究大鼠出生后不同时期脾脏 内浆细胞的分化，为进一步了解出生后机体的体液 免疫的建立提供实验依据。 ２０１２—０４—０５接收 基金项目：国家自然科学基金（编号： ８１０７２６５１；８１１７３０７４；９１１２９７２９） １ 材料与方法 作者单位： 安徽医科大学药学院、 基础医学院、 生物药物研究 所，合肥 ２３００３２ 作者简介：周宸弱，女，硕士研究生； 沈玉先，女，博士，教授，博士生导师，责任作者，Ｅ—ｍａｉｌ： ｓ ｈｅｎｙｘ＠ｕｓｔｅ．ｅｄｕ．ｃｎ １．１标本收集健康ＳＰＦ级ＳＤ大鼠４５只，雌性， 由安徽省实验动物中心提供。依据大鼠的发育阶段 分为９组，即出生后１、２、３、４、６、８、１０、１２和２２周 组， 每组５只。取不同周龄大鼠，引颈处死，分离出 ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡｏｎｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ ｌ ｕｎｇｗｉｔｈｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉ ｎｒａｂｂｉｔｓ ＦａｎｇＱｉａｎｊｉｎ，ＹａｎＺｈｏｎｇｙａ，ＬｉＪｉａｎ’ａｎ （Ｄｅｐｔｏ ｆＣａｒｄｉａｃＳｕｒｇｅｒ ｙ，ＴｈｅＡｆｉｌｆ ｉ ａｔｅｄＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＨｏｓｐｉｔ ａｌｏ ｆＡｎｈｕｉＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔ ｙ，Ｈｅｆｅｉ２３０００１） ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂ ｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔ ｉ ｇａｔｅｔｈｅｅｆｆ ｅｃｔｓ ｏｆ ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉ ｎｅＡ（ＣｓＡ），ａｉ ｎｈｉｂｉｔ ｏｒｏｆ ｍｉ ｔ ｏｃｈｏｎｄｆｉ ａｌｐｅｒｍｅａｂｉｌ ｉ ｔ ｙ ｔ ｒａｎｓｉｔ ｉ ｏｎｐｏｒｅ（ｍＰＴＰ），ｏｎｌｕｎｇｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ（Ｉ／Ｒ），ａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅ ｖｉａｂｉｌ ｉ ｔ ｙｏｆｌ ｕｎｇｐｒｏｔｅｃｔｉ ｏｎｓｔｒ ａｔｅｇｙｂｙ ｉ ｎｈｉｂｉｔ ｉ ｎｇｔｈｅｍＰＴＰ．ＭｅｔｈｏｄｓＳｉ ｎｇｌｅｌ ｕｎｇｉｎｖｉｖｏＩ／Ｒａｎｉｍａｌｍｏｄｅｌｗａｓ ｅｓ ｔ ａｂｌｉ ｓ ｈｅｄ．４０ｒａｂｂｉｔ ｓ ｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙ ａｖｅｒａｇｅｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ：ｓｈａｍ（Ｓ）ｇｒｏｕｐ，ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉ ｎｅＡ（ＣｓＡ）ｇｒｏｕｐ，ｌｏｗｍｏｌｅｃｕｌａｒｄｅｘｔｒａｎ（ＬＭＤ） ａｎｄＩ／Ｒｇｒｏｕｐ．Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｌ ｕｎｇｔ ｉ ｓｓｕｅ ｐｎｅｕｍｏｃｙｔｅｗａｓａｓ ｓｅｓｓｅｄｂｙ ＴＵＮＥＬｍｅｔｈｏｄ，ＣｙｔｏｃｈｒｏｍｅＣ（ＣｙｔＣ）ｉｎｌ ｕｎｇ ｔ ｉ ｓｓｕｅｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｉｍｍｕｎｏｈｉｓ ｔ ｏｃｈｅｍｃａｌｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｔｈｅｄａｍａｇｅｏｆｍｉ ｔ ｏｃｈｏｎｄｒｉａｌｗａｓ ｏｂｓ ｅｒｖｅｄｂｙｅｌｅｃｔｒ ｏｎｍｉ — ｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｕｌｔ ｓＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆ ＣｙｔＣｉ ｎｃｙｔｏｐｌａｓｍａｎｄｔｈｅｖａｌｕｅｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉ ｎｄｅｘ（ＡＩ）ｉｎＣｓＡｇｒｏｕｐｗｅｒｅｅｖｉ— ｄｅｎｔｌ ｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆ Ｓｇｒ ｏｕｐ，ｂｕｔｉｔ’Ｓｅｖｉｄｅｎｔｌ ｙｌ ｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆＬＭＤｇｒｏｕｐａｎｄＩ／Ｒｇｒｏｕｐ，ａｎｄｔｈｅｖａｌｕｅ ０ｆＡＩａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＣｙｔＣｉｎＬＭＤｇｒｏｕｐｗｅｒｅｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈｏｓｅｏｆＩ／Ｒｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ ＣｓＡｃａｎｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅ ｏｐｅｎｉｎｇｏｆｍＰＴＰｉｎｅａｒｌｙｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ，ｒｅｄｕｃｅｔｈｅａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｌｕｎｇｔｉｓｓｕｅｐｎｅｕｍｏｃｙｔｅ，ａｎｄｐｒｏｔｅｃｔｔｈｅｌｕｎｇａｇａｉｎｓｔ Ｉ／Ｒ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓｒ ｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎｉｎｊｕｒｙ；ｍｉｔ ｏｃｈｏｎｄｒｉ ａｌｐｅｒｍｅａｂｉｌ ｉ ｔ ｙｔｒａｎｓｉｔ ｉ ｏｎｐｏｒｅ；ａｐｏｐｔｏｓｉｓ；ｃｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ