高中生物试验总结

- 高中生物实验总结高中生物实验总结 实验一实验一 观察观察 DNADNA 和和 RNARNA 在细胞中的分布在细胞中的分布 1.实验原理：实验原理： 利用甲基绿和吡罗红混合染色剂将细胞染色， 可以显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布；甲基绿和吡罗红对DNA 和 RNA 的亲和力不同亲和力不同：：甲基绿+DNA+DNA→绿色绿色 吡罗红吡罗红+RNA+RNA→红色 2.分布分布：真核生物 DNA 主要分布在细胞核中； 线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA； RNA 主要分布在细胞质中。 3.实验结果实验结果:细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 4.实验结论实验结论：DNA 主要分布在细胞核中；RNA 主要分布在细胞质中； 5.实验流程： （1）取口腔上皮细胞制片：①载玻片上滴一滴质量分数为：0.9%NaCl0.9%NaCl 溶液；溶液； ②漱口后，用消毒牙签刮口腔内壁后放在载玻片的液滴中涂抹几下； ③载玻片在酒精灯上烘干，盖上； （2）水解：①载玻片放入盛有30ml 质量分数为 8%8%的的 HClHCl 的小烧杯中； ②大烧杯中加入 30℃温水； ③将小烧杯放入大烧杯中保温5min； （3）冲洗涂片：用蒸馏水蒸馏水的缓水流冲洗载玻片 10s; （4）染色：①吸水纸吸去载玻片的水分； ②滴两滴混合染液，染色5min； ③吸去多余的染液，盖上盖玻片； （5）观察：先低倍后高倍； 6 6、几种液体在实验中的作用：、几种液体在实验中的作用： （1）0.9%NaCl0.9%NaCl 溶液：溶液：保持口腔上皮的正常形态。保持口腔上皮的正常形态。 8%8%的的 HClHCl：①改变细胞膜等的通透性；：①改变细胞膜等的通透性； ②使染色质中的②使染色质中的 DNADNA 与蛋白质分开。与蛋白质分开。 蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片。蒸馏水：配置染液；冲洗载玻片。 （（2 2）混合染液需要）混合染液需要现配现用现配现用；； （（3 3）该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰。）该实验不宜用深色的材料，避免颜色对实验的干扰。 实验二、实验二、 物质鉴定物质鉴定 一、实验原理：一、实验原理：还原糖 + 斐林试剂～砖红色沉淀砖红色沉淀（水浴加热）（水浴加热） 脂 肪 + 苏丹 III ～橘黄色橘黄色（滴液观察或制片显微镜观察）（滴液观察或制片显微镜观察） 脂 肪 + 苏丹 IV～ 红色红色 蛋白质 + 双缩脲试剂 ～紫色反应紫色反应（不加热）（不加热） 1 1、还原糖的检测、还原糖的检测 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如：苹果，梨，白萝卜苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂斐林试剂（甲液：0.1g/mL 的 NaOH 溶液，乙液：0.05g/mL 的 CuSO4 溶液） ，现配现用现配现用。。 （3）步骤：取样液 2mL 于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后混合均匀后再加入）→水水 浴加热浴加热 2min 左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色） 操 作 方 法注 意 问 题 .z. 解 释 - 1. 制备组织样液。苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，因苹果多酚氧化酶含量高， （去皮、切块、研磨、过滤）组织液很易被氧化成褐色，组织液很易被氧化成褐色， 将产生的颜色掩盖。将产生的颜色掩盖。 2. 取 1 支试管，向试管内注 入 2mL 组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的 斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、 乙液 分别分别配制、 储存， 使用前使用前才将甲、 乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿切勿将甲液、 乙液分别加入苹果 组织样液中进行检测。 最好用试管夹夹住试管上部， 使 试管底部不触及烧杯底部， 试管 口不朝向实验者。 也可用酒精灯对试管直接加热。 斐林试剂很不稳定，斐林试剂很不稳定， 甲、甲、 乙乙 液混合保存时，生成的液混合保存时，生成的 CuCu ( OH )( OH ) 2 2在在 70~9070~900 0C C 下分解下分解 成黑色成黑色 CuOCuO 和水；和水； 甲、甲、 乙液分别加入时可能会乙液分别加入时可能会 与组织样液发生反应，无与组织样液发生反应，无 Cu OHCu OH 生成。生成。 防止试管内的溶液冲出试防止试管内的溶液冲出试 管，造成烫伤；管，造成烫伤； 缩短实验时间。缩短实验时间。 4. 试管放在盛有 50-650C 温 水的大烧杯中，加热约 2 分 钟，观察到溶液颜色：浅蓝浅蓝 色色 →→ 棕色棕色 →→ 砖红色砖红色（沉（沉 淀）淀） *模拟尿糖的检测 1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸 3、结果：试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖， 所以没有发生反应。 2 2、脂肪的检测、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤： 制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ↓ 染色（滴苏丹Ⅲ染液 2～3 滴切片上→2～3min 后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去 多余的酒精） ↓ 制作装片（滴 1～2 滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 操 作 方 法 花生种子浸泡、去皮、切下一些子 叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴 中，用吸水纸吸去装片中的水。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏苏丹Ⅲ或苏 丹Ⅳ染液丹Ⅳ染液，染色 1 分钟。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用 注 意 问 题 干种子要浸泡 3~4 小 时，新花生的浸泡时 间可缩短。 染色时间不宜过长。 解 释 因为浸泡时间短，不易切片；因为浸泡时间短，不易切片； 浸泡时间过长，组织较软，切浸泡时间过长，组织较软，切 片不易成形。切片要尽可能薄片不易成形。切片要尽可能薄 些，便于观察。些，便于观察。 酒精用于洗去浮色，不洗去浮酒精用于洗去浮色，不洗去浮 .z. - 50%酒精洗去浮色，吸去酒精。色，会影响对橘黄色脂肪滴的色，会影响对橘黄色脂肪滴的 观察。同时，酒精是脂溶性溶观察。同时，酒精是脂溶性溶 剂，可将花生细胞中的脂肪颗剂，可将花生细胞中的脂肪颗 粒溶解成油滴。粒溶解成油滴。 装片不宜久放。 滴上清水可防止盖盖玻片时产滴上清水可防止盖盖玻片时产 生气泡。生气泡。 时间一长，油滴会溶解在乙醇时间一长，油滴会溶解在乙醇 中。中。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上 1~2 滴蒸馏水，盖上盖玻片。 低倍镜下找到花生子叶薄片的最 薄处，可看到细胞中有染成橘黄色橘黄色 或或红色红色圆形小颗粒圆形小颗粒。 3 3、蛋白质的检测、蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A 液：0.1g/mL 的 NaOH 溶液，B 液：0.01g/mL 的 CuSO4 溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂 A 液 1mL，摇匀→加双缩尿试剂 B 液 4 滴，摇匀→观察 操 作 方 法 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 鉴定