DB12_T 1359-2024 水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类酰胺醇类抗生素残留的测定液相色谱-质谱质谱法

ICS 65.150 CCS B 50 12 天 津 市 地 方 标 准 DB12/T 1359—2024 水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类 酰胺醇类抗生素残留的测定 液相色谱-质 谱/质谱法 Determination of quinolones, sulfonamides and amidol antibiotic residues in non-standard drugs for aquaculture by liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2024-11-27 发布 2025-01-01 实施 天津市市场监督管理委员会 发 布 DB12/T 1359—2024 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由天津市农业农村委提出并归口。 本文件起草单位：天津市农业生态环境监测与农产品质量检测中心、山东省科学院海洋仪器仪表研 究所。 本文件主要起草人：陈永平、成振华、王辉、韩现芹、时文博、史艳艳、高丽娜、王愿宁、高丽、 李灏、曹建新、易伟、苏梦寒。 1 DB12/T 1359—2024 水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类、酰胺醇类抗生素残留 的测定 液相色谱-质谱/质谱法 1 范围 本文件规定了水产养殖用非规范药品中喹诺酮类、磺胺类、酰胺醇类抗生素留量测定的原理、试剂 和材料、仪器、分析步骤、结果计算、正确度与精密度。 本文件适用于水产养殖用非规范药品中诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、培氟沙星、洛 美沙星、磺胺噻唑、磺胺嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺多辛、磺胺喹噁 啉、磺胺异噁唑、氯霉素、甲砜霉素、氟苯尼考共17种抗生素残留量检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 3.1 非规范药品 non-standard drugs 水产养殖过程中用来净化水质、改良地质、除杂等的非药品，包括水质改良剂、底质改良剂、微生 态制剂、除杂剂及促生长剂等。 4 原理 非规范药品中喹诺酮类、磺胺类、酰胺醇类抗生素，先加水溶解或稀释，再用酸化乙腈萃取，经固 相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱法检测，内标法定量。 5 试剂材料 除非另有说明，水为GB/T 6682规定的一级水。 5.1 试剂 5.1.1 甲醇（CH3OH，CAS 号：67-56-1）：色谱纯。 5.1.2 乙腈（CH3CN，CAS 号：75-05-8）：色谱纯。 5.1.3 甲酸（HCOOH，CAS 号：64-18-6）：色谱纯。 2 DB12/T 1359—2024 5.1.4 二氯甲烷（CH2Cl2 ，CAS 号：75-09-2）：分析纯。 5.1.5 乙酸乙酯（C4H8O2 ，CAS 号：141-78-6）：分析纯。 5.1.6 氯化钠（NaCl，CAS 号：7647-14-5）：分析纯。 5.1.7 乙酸铵（CH3COONH4 ，CAS 号：631-61-8）：分析纯。 5.2 溶液配制 5.2.1 乙酸铵（2.0 mmoL/L）-甲酸溶液（0.1%）：称取 0.077g 无水乙酸铵，用 0.1%甲酸水溶液溶解 并稀释至 500 mL。 5.2.2 甲醇-水溶液（15+85，体积比）：量取甲醇 15mL 加入 85 mL 水中，混匀。 5.2.3 甲酸-乙腈（0.1+99.9，体积比）：量取甲酸 0.5 mL，加乙腈稀释至 500 mL，混匀。 5.3 标准品 17种抗生素类标准品应符合附录A，纯度≥95%。 5.4 标准溶液配制 5.4.1 标准贮备液 100 µg/mL。取诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、培氟沙星、洛美沙星、磺胺嘧啶、磺 胺噻唑、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺多辛、磺胺喹恶啉、磺胺异噁唑、氯 霉素、甲砜霉素、氟苯尼考各适量（相当于各活性成分10 mg），精密称定，于各自容量瓶中，喹诺酮 类需加0.2 mL甲酸，均用甲醇溶解后并稀释定容至100 mL，配制成浓度为100 µg/mL的标准储备液。避 光-18 ℃以下保存，有效期1年。 5.4.2 氘代同位素内标标准储备液 500 µg/mL。取氘代磺胺邻二甲氧嘧啶、氘代磺胺间二甲氧嘧啶、氘代诺氟沙星、氘代环丙沙星、 氘代恩诺沙星、氘代氯霉素内标各适量（相当于各活性成分5 mg），精密称定，于各自容量瓶中，用甲 醇溶解稀释定容至10 mL。配制成浓度为500 µg/mL同位素内标标准储备液，避光-18 ℃以下保存，有 效期1年。 5.4.3 喹诺酮类与磺胺类混合标准工作液 准确吸取各喹诺酮类和磺胺类标准储备液（5.4.1）适量，用甲醇稀释制成1.0 µg/mL混合标准工 作液，避光4 ℃冷藏保存，有效期1个月。 5.4.4 酰胺醇类混合标准工作液 准确吸取各酰胺醇类标准储备液（5.4.1）适量，用甲醇稀释制成氯霉素、氟苯尼考0.1 µg/mL， 甲砜霉素0.5µg/mL混合标准工作液，避光4 ℃冷藏保存，有效期1个月。 5.4.5 磺胺类与喹诺酮类混合内标标准工作液： 准确吸取各磺胺类和喹诺酮类内标标准储备液（5.4.2）适量，用甲醇稀释制成 10.0 µg/mL混合 标准工作液，避光4 ℃冷藏保存，有效期1个月。 5.4.6 酰胺醇类混合内标标准工作液 准确吸取各酰胺醇类内标标准储备液（5.4.2）适量，用甲醇稀释制成1.0 µg/mL混合内标标准工 作液，避光4 ℃冷藏保存，有效期1个月。 3 DB12/T 1359—2024 5.5 材料 通过式固相萃取柱，200 mg/6 mL，或性能相当者。 6 仪器 6.1 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾（ESI）离子源。 6.2 分析天平：感量 0.01g、0.01 mg。 6.3 高速离心机：转速大于 10 000 r/min。 6.4 超声波震荡仪。 6.5 涡旋振荡器。 6.6 氮吹仪。 6.7 粉碎装置：如杵或研钵。 6.8 筛：筛孔为 1 mm 金属网。 7 试样制备 7.1 试样制备 7.1.1 固