黄芪多糖对大鼠实验性胃溃疡的影响
黄茂多糖对大鼠实验性胃溃疡的影响 [摘要]目的观察黄芷多糖对大鼠实验性胃溃疡的 影响。方法SPF级Wistar成年雄性大鼠48只,随机分成 正常组,模型组,黄芷多糖高、中、低剂量组,阳性对照(雷 尼替丁)组,每组各8只。采用乙酸法制备胃溃疡模型。治 疗2周后,观察大鼠乙酸性胃溃疡面积(GUA)及血清超氧 化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)水平的变化。结 果正常组,模型组,黄芷多糖高、中、低剂量组及雷尼替 丁组的 GUA 分别为:0、(9.06±2. 65)、(1.91 + 0. 19). (2. 54 + 0. 27). (3. 85 + 0. 19). (2. 37 + 0. 31) mm2;相应 的 SOD 活性分别为:(138. 19±17. 92)、(88. 69 + 13. 78). (128. 22 + 19. 30). (118. 96 + 14. 78). (102. 68 + 22. 52). (109. 36 + 14. 28 ) U/mL ;相应的MDA 水平分别为: (8. 51 + 1. 10 )、( 14. 17 + 1. 55 )、( 9. 97 + 1.44 )、 (11. 17 + 1. 29)、(12. 79 + 1. 39)、(11. 57 + 1. 01) nmol/mL0 与正常组比较,模型组血清SOD活性显著降低(P[Key words] Astragalus polysaccharides; Gastric ulcer; Superoxide dismutase; Malondialdehyde 黄芷,别名绵芷、绵黄芷,为豆科植物膜荚黄芷 Astragalus membranaceus ( Fisch. ) Bge. 或蒙 古黄芷 Astragalus mongholicus Bge.的干燥根,味甘,性温,归 脾、肺经,生于坡灌丛及旱坡砂质壤土地区,分布于黑龙江、 吉林、辽宁、河北、山西、内蒙古、陕西、甘肃、宁夏、青 海、山东、四川和西藏等省自治区。黄芷具有补气固表、升 阳举陷、利水消肿和托疮生肌等功效。黄芷味甘能补,性温 能升,为补气升阳的要药。黄芷主要含有黄芷多糖、黄酮类、 皂昔类、氨基酸、蛋白质、生物碱、微量元素等多种生物活 性物成分,其中黄芷多糖是黄黄药理作用的主要药效成分。 黄芷多糖具有增强机体的免疫功能,调节细胞的代谢功能, 提高免疫细胞的免疫活性,抗细胞衰老,调节血糖,抗溃疡, 诱导肿瘤细胞凋亡等作用[1-2] o此外,抗氧化也是黄芷多 糖的重要药理作用[3-4] o本文探讨黄芷多糖对大鼠实验性 胃溃疡的治疗作用及其对血清超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde, MDA) 水平的影响。 1材料与方法 1. 1材料 1. 1. 1药品 黄芷药材(广东天泰药业有限公司中药饮 片厂,批号:140803),经鉴定符合2010年版《中国药典》 的要求。盐酸雷尼替丁胶囊(佛山手心制药有限公司,批号: 1412602)o 1.1.2试剂与仪器分析纯冰醋酸(广东省光华化学厂 有限公司);SOD、MDA试剂盒(南京建成生物工程研究所)。 游标卡尺(上海精密仪器仪表有限公司);2-16PK高速冷冻 离心机(德国Sigma公司);DK-S22恒温水浴锅(上海精宏 实验设备有限公司);722分光光度计(上海光学仪器厂)。 1. 1. 3动物SPF级Wistar健康成年雄性大鼠48只,平 均体重(200 + 20) g,由广州中医药大学实验动物中心提 供,动物合格证号:SCXK (粤)2008-0002o实验动物中心 SPF实验室条件严格控制,温度20〜25C,日温度差W3C, 湿度40%〜50%,空气清洁度10 000级,14 h黑暗,人工光 照照明(8 : 00〜18 : 00)o饲养期给予SPF鼠饲料,添加足 量饲料,饮用蒸俺水。 1. 2方法 1.2. 1黄芷多糖的提取及含量测定 取黄芷,以10倍水 量煎煮3次,过滤,取滤液,合并煎煮液,上X-5树脂柱, 收集流出液并浓缩,加95%乙醇至乙醇占总重量的70%,离 心后弃去上清液,沉淀用蒸俺水溶解,加液体体积4%的三氯 乙酸,离心后取上清液,再次加95%乙醇至乙醇占总重量的 70%,离心后取沉淀,按照95%乙醇一丙酮一乙醒的顺序洗涤, 得黄芷多糖。采用苯酚-硫酸法测定其含量,以葡萄糖标准 品,用紫外分光光度计于490 nm处测定其吸光度,测得其 含量达41%[5]0 1.2.2供试液制备 取黄芷多糖适量,用蒸俺水配成浓 度为8、4、2 mg/mL的溶液,作为多糖供试液。取盐酸雷尼 替丁胶囊,除去胶囊,内容物研磨后,加蒸偏水配成3 mg/mL 混悬液。以上药液置冰箱低温保存备用。 1.2.3动物分组与造模大鼠完全随机分为6组:正常 组,模型组,黄芷多糖高、中、低剂量组,阳性对照组(雷 尼替丁组),每组各8只。除正常组外,其他大鼠参照文献 [6] 方法制备大鼠乙酸性溃疡模型。造模前大鼠禁食不禁水 24 h,按3.5 mL/kg剂量,腹腔注射10%水合氯醛对大鼠进 行麻醉,中上腹部备皮、消毒、铺洞巾,沿剑突下腹中线剪 一个2.0 cm左右纵切口,暴露胃部,将浸有冰醋酸且直径5 mm的圆形滤纸贴于胃窦前壁浆膜面上,避开血管,接触30 s, 连续2次。用棉签吸干冰醋酸,生理盐水冲洗腹腔,还纳鼠 胃,逐层缝合切口、消毒;术后大鼠给予正常饮食。 1.2.4给药造模3 d后开始灌胃给药,10 mL/ (kg • 次),1次/d,连续给药2周。其中正常组、模型组给予生理 盐水;黄芷多糖高、中、低剂量组分别给予浓度为8.4.2 mg/mL 的黄芷多糖;雷尼替丁组给予浓度为3 mg/mL的盐酸雷尼替 丁混悬液。 1.2.5指标观察与测定 大鼠末次给药后,禁食不禁水 24 h,乙醍麻醉,打开腹腔,腹主动脉取血4 mL,以转速 3000 r/min,低温离心10 min,分离血清,按试剂盒方法, 测定血清S0D活性及MDA水平。结扎贲门,取胃,沿胃大弯 剪开,洗去胃内容物,展开于平板上,用游标卡尺测量每个 溃疡的最大长径和最大宽径,将最大长径和最大宽径相乘作 为胃溃疡面积(gastric ulcer area, GUA),如有多个溃疡, 溃疡面积合并计算。 1. 3统计学方法 采用SPSS 13.0进行统计分析,正态分布计量资料以均 数土标准差(x±s)表示,多组间比较采用方差分析,两两 比较采用LSD-t检验。以P 0. 05)o与黄芷多糖低剂量组比 较,黄芷多糖高、中剂量组及雷尼替丁组的GUA显著缩小(P 3讨论 胃溃疡是临床常见的消化系统疾病,常反复发作,临床 表现为暧气、反酸、饥饿不适、中上腹胀闷、疼痛等,可发 生出血、穿孔、幽门梗阻,甚至癌变等并发症。胃溃疡病因 复杂,是综合因素的结果,它与遗传、精神、饮食、化学、 感染、环境等因素相关。目前认为,胃溃疡的形成是胃黏膜 的攻击因子与防御因子失衡所致[7]。攻击因子包括胃酸、 胃蛋白酶、幽门螺杆菌、非笛体抗炎药等;防御因子包括胃 黏膜、胃黏液、碳酸