纤支镜毛刷细胞块技术应用方法与价值
纤支镜毛刷细胞块技术应用方法与价值 [摘要]目的探讨纤支镜毛刷细胞块技术的应用 方法和价值。方法对32例纤支镜毛刷常规涂片后再将剩 余细胞用10%中性福尔马林固定制成细胞蜡块(cellblock, CB),先行常规HE染色,再根据需要选择酶标行免疫组化。 结果CB常规HE染色细胞清晰,有一定的组织学结构,有利 于明确诊断;免疫组化则阳性定位准确,着色清晰,对肿瘤 分型效果较好。两种染色方法染色效果均好于常规涂片,差 异有显著统计学意义(P 0. 05)o结论用10%中性福尔马 林固定的纤支镜毛刷CB的制作方法简便、经济、染色效果 好,在诊断肺疾病、特别是肺肿瘤中有较高的实用价值和广 阔的应用前景,值得推广。 [关键词]纤支镜毛刷;细胞块;常规HE染色;免疫组 化;10%中性福尔马林 [中图分类号]R446. 6; R361.3 [文献标识码]B [文章 编号]1673-9701 (2013) 36-075-03 The application s and value of fiber lens brush cell block technique ZHANG Guizhen ZHU Zhenda CHEN Cheng Department of Pathology , Yuhang District Traditional Chinese Medicine Hospital of Hangzhou Cityin Zhejiang Province, Hangzhou 311106, China prospect, [Abstract] Objective To study the application s and value of fiber lens brush cell block technique. s For 32 cases of fiber lens brush after conventional smear in the remaining cells again fixed with 10% aldehyde wax block made from cells (cell block, CB), the first routine HE staining, again to choose according to the need to enzyme immunohistochemical marking line. Results CB routine HE staining cells clear, histologic structure to a certain extent, was conducive to clear diagnosis; Immunohistochemical positive for accurate positioning, color clear, has good effect for tumor classification. Two dyeing s were better than regular smear dyeing effect , so the significant difference of statistically was significant (P 0.05). Conclusion The production of the fiber lens brush CB fixed with 10% of aldehyde is simple, economic and The dyeing effect is good , in the diagnosis of pulmonary diseases , especially lung cancer has a high practical value and broad application the production is worth promoting. [Key words] Fiber lens brush; Cell block; Routine HE staining; Immunohistochemical; 10% aldehyde 纤支镜毛刷细胞学检查是诊断肺疾病、特别是肺肿瘤的 重要手段之一,已被广泛用于临床,当纤支镜活检和经皮肺 穿刺活检由于多种因素被迫放弃,此时的纤支镜毛刷细胞学 检查是术前最佳的病理检查方法,显得尤为重要,并对已不 适合手术治疗的老弱患者和晚期癌症患者来说也是较佳的 病理检查方法。笔者对32例纤支镜毛刷常规涂片后再将剩 余细胞制成细胞蜡块(cell block, CB),先行常规HE染色 镜下观察,再根据需要选择酶标行免疫组化(如CEA、LCA、 CK5/6、CK7、CgA、Syn、P63、34BE12、TTF-1 等),两者结 合观察,对肺疾病进行病理诊断,特别是对肺肿瘤进行组织 学上的分型,效果较好,现报道如下。 1资料与方法 1. 1实验材料 50 mL尖底塑料试管1支,直立平衡离心机1台,盛10 mL 10%中性福尔马林的小瓶1只,老虎钳1把,震荡器1台。 1. 2方法 1. 2. 1毛刷处理 毛刷刷取细胞后快速涂片2张,95%乙 醇迅速固定,常规HE染色。涂片后马上用老虎钳剪断毛刷 放入盛有10 mL的10%中性福尔马林的瓶内固定。 1.2.2制片方法 毛刷在10%中性福尔马林液固定lh后用干 净的镶子取出,用针尖挑(或刮)出刷内物,尽量挑干净, 再把毛刷在固定液内漂洗,而后把固定液倒入试管内。再重 新倒入10 mL左右的10%中性福尔马林在瓶内,在震荡器上 震下刷内残余的细胞,再把这10 mL的中性福尔马林倒入同 试管内,再加一定的量,使试管内的福尔马林总量达30〜40 mL,离心3000 r/min、15 min,取出放在试管架上固定2〜 4h左右,如标本上午送来的则当天即可与常规组织同脱水, 如下午两三点后送来则固定过夜。固定好后倒去固定液,此 时沉淀物已结块,小心取出,放在滤纸上滴入伊红包好,与 常规组织同时进行脱水、包埋予0.4 mm厚连续切片8张左 右,其中1张常规HE染色镜下观察,再根据需要选择酶标 行免疫组化。 1.2.3染色合格标准 将常规HE合格标准定为:细胞清 晰,核浆对比分明,组织学结构可有(或无),有利于明确 诊断。将免疫组化合格标准定为:阳性定位准确,着色清晰, 有助于肿瘤的分型。 1.2.4 免疫组化方法 CEA、LCA、CK5/6、CK7、CgA、Syn、 P63、34BE12、TTF-1等单克隆抗体购于北京中杉公司,实 验流程采用EnVision二步法。 1.2.5统计学处理 采用SPSS16. 0统计学软件处理。用 Kolmegorov-Smirnov方法进行正态性检验,使用x 2检验对 正态分布的构成比进行比较,P 0. 05)o见表1。 表1三种不同方法检测结果比较[n (%)] 图L2CB中的片状异型鳞状上皮组织,