沉降菌测试标准操作规程

题目沉降菌测试标准操作规程沉降菌测试标准操作规程 制定人年月日编码 SOP-ZL-HJ-006-01 审核人年月日颁发部门质量管理部 批准人年月日执行时间年月日 分发部门质量管理部、档案室 目的目的建立洁净室（区）中沉降菌的测试标准操作规程，保证药品在规定洁净级别的区 域内进行生产。 范围范围适用于洁净室（区）的沉降菌的测试。 职责职责质量管理部、QA 检测员 内容内容 1、测试方法 本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集空气中的生物粒子于培养基平皿，经 若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数 来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室区的洁净度。 2、仪器、设备、培养基 2.1 培养皿Φ90mm15mm 培养皿 2.2 培养基营养琼脂培养基 2.3 生化培养箱必须定期对生化培养箱进行校验。 2.4 自动台式灭菌器使用时应严格按照仪器说明书操作。 3、测试条件 3.1 温度和相对湿度洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应， 温度控制在 18℃～26℃，相对湿度控制在 45～65为宜。 3.2 压差空气洁净度不同的洁净室（区）之间压差应≥10Pa。 4、测试状态动态测试和静态测试。静态测试时，室内测试人员不得多于2 人；动态测 试时，现场人员数按洁净区人员控制管理制度中规定执行，记录中注明现场人员数 量及测试点位置。 5、测试时间对单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于 10 分钟后开始；对非 单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于 30 分钟后开始。 第 1 页 共 9 页 6、采样点数量及布置 6.1 最少采样点数目 房间面积（m2） ＜10 ≥10＜20 ≥20＜40 ≥40＜100 ≥100＜200 ≥200＜400 ≥400＜1000 ≥1000＜2000 ≥2000 洁净度级别 100 23 4 8 16 40 80 160 400 800 10000 2 2 2 4 10 20 40 100 200 100000 2 2 2 2 3 6 13 32 63 6.2 最少培养皿数 在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见下表 洁净度级别 100 10000 100000 6.3 采样点布置类型 所需Φ90mm 培养皿数以沉降 0.5 h /静态或 4h /动态计 14 2 2 bca d ef 第 2 页 共 9 页 g hi 6.4 采样点的位置 6.4.1 一般布置在离地面 0.8-1.5m 之间或操作平台的高度，除受洁净室（区）的设备限 制外，应在整个洁净室（区）均匀布置。 6.4.2 每个采样点一般采样一次，也可以多于 1 次。 6.4.3 布置采样点时，应避开回风口，测试人员应在采样口的下风侧。 7、培养基制备 7.1 依据检测区域的取样点数，按照培养基配制标准操作规程制备适量的营养琼脂 培养基。 7.2 在超净工作台内， 以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约 15ml 的装量分 装，待培养基凝固后移出洁净区。 7.3将制备的营养琼脂平皿倒置于生化培养箱内35℃培养48小时， 确认无菌落数后使用。 7.4 培养皿传进洁净室（区）测试前要进行表面消毒。 8、测试 8.1 将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖， 使培养基表面暴露在空气中。 8.2 静态测试时，培养皿暴露时间为30min，动态测试时，培养皿暴露时间为不大于4h。 9、培养取样结束后将平皿倒置于生化培养箱内35℃培养 72 小时，并以未采样的营养 琼脂平皿作对照皿。 10、结果计算 10.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。 10.1.1 用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、 标记或在菌落计数器上点计， 然后用 5～ 10 倍放大镜检查，有否遗漏。 10.1.2 培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠， 可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。 10.2 每个测点的沉降菌平均菌落数的计算 M1M2Mn n 式中 M---平均菌落数 M 第 3 页 共 9 页 M1---1 号培养皿的菌落数 M2---2 号培养皿的菌落数 Mn---n 号培养皿的菌落数 n---培养皿的总数 11、结果评定 11.1 每个测点的沉降菌的平均菌落数必须低于所规定评定标准的界限。 11.2 在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次， 两次测试结果均合格才能判为符合。 11.3 若测试结果超标时应及时与生产部门联系，对该区域进行消毒或其它处理，然后重 新测试至合格。 11.4 洁净区沉降菌控制标准 洁净度级别 沉降菌 cfu/4 小时 标准 警戒限 纠偏限 A ＜1 -- -- B 5 3 4 C 50 40 45 D 100 80 90 1、表中数值均为平均值。 2、单个沉降碟的暴露时间可以少于 4 小时， 同一位置可使用多个沉降碟连续进行检测并 积累计数。 12、注意事项 12.1 采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。 12.2 应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。 12.3 测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 13、检测频率1 次/3 个月。 14、附录 附录沉降菌测试记录 15、历史修订记录和原因 版本号 01 第 4 页 共 9 页 修订原因 新订 修订日期 附录 沉降菌测试记录沉降菌测试记录 编码SOP-ZL-HJ-006-01-R1 测试区域 测试依据 测试日期 测试状态 培养温度 测试房间 现场操采样点布 房间编号 作人员置类型 数 ab PLES123 PLES124 PLES125 PLES126 PLES127 PLES128 PLES129 PLES130 PLES131 PLES132 PLES133 PLES138 PLES139 PLES140 PLES141 PLES142 PLES143 PLES144 测试人员 培养基用量 培养时间 报告日期 沉降菌菌落数/cfu 测点 1 测点 2测点 3测点 4 符合规定 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 更鞋间 男一更 女一更 男二更 女二更 手消毒间 外用酊剂线 酊剂配制间 酊剂灌装间 预留间 1 溶液剂灌装间 理瓶、洗瓶间 瓶子暂存间 洗衣整衣间 消毒液配制间 不合格品存放 洁具存放间 模具存放间 第 5 页 共 9 页 容器存放 容器洗涤 内包材存放间 溶液剂配制间 半固体配制间 废弃间 中检室 中间站 PLES145 PLES146 PLES147 PLES148 PLES149 PLES150 PLES151 PLES152 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 是□否□ 称量