胭脂红检验操作规程

胭脂红检验操作规程 目 的建立胭脂红的检验操作规程 范 围适用于胭脂红的检验 职 责QC主任及检验员 执行标准中华人民共和国国家标准GB 4480. 194 规 程 1外观本品为红色至深红色粉末。 2鉴别 2. 1试剂 a 无水乙醇GB/T 678； b 正丁醇HG/T 3-1012； c 乙酸铉GB/T 1292 100g/L 溶液； d 氨水GB /T 631 496 溶液； e胭脂红标准样品含量N82. 0, N60. 0。 2.2仪器、设备 a分光光度计； b 层析滤纸1号中速，150mm X 250mm； c 层析缸100mm X 200mm； d微量进样器10 U Lo 2. 3操作步骤 2. 3. 1称取0.1g试样，精确至0.01g,溶于100mL水中，呈红色澄清溶液，试样微溶于 乙醇，不溶于油脂，具有酸性染料的特性，能使动物纤维染色。 2. 3. 2称取约0. 001g试样，溶于100mL乙酸铉溶液中，其最大吸收波长为5082nmo 2. 3.3取试样水溶液做纸上层析，其主色点的Rf值，应与标准样品相同。 纸上层析条件 展开剂正丁醇无水乙醇氨水溶液623。 温度20〜25C。 试验溶液浓度0. Ig/lOOmLo 试验溶液用量2 u Lo 展开剂前沿上升限度150mm。 3胭脂红含量的测定 3. 1分光光度比色法 3. 1. 1方法提要 将试样与已知含量的标样分别用水溶解后，在最大吸收波长处，分别测其吸光度，然后计 算出试样的含量。 3. 1. 2试剂和材料 胭脂红标准样品含量N82. 0, N60. 0。 3. 1. 3仪器、设备 a. 分光光度计； b, 比色皿10mm。 3. 1.4操作步骤 a. 胭脂红标样溶液的制备 称取胭脂红标准样品0. 500g，精确至0.0002g,溶于适量水中，移入lOOOmL容量瓶中， 稀释至刻度，摇匀。准确吸取10mL,移入500mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。 b. 胭脂红试样溶液的制备 称量与操作方法同标样溶液的制备。 c 操作 将标样溶液与试样溶液分别置于10mm比色皿中，在508nm波长处用分光光度计测定各自 的吸光度。以水作参比液。 3. 1. 5计算 胭脂红的质量百分含量X。按下式计算 Xi A/As X Xs 式中A一试样溶液的吸光度； As标样溶液的吸光度； Xs一柠檬黄标准样品的质量百分含量。 4干燥失重取本品在135C干燥5小时，减失的重量不得过10. 0 QC-S0P-30U-03o 5水不溶物含量的测定 5.1分析步骤 称取约3g的试样，精确至0.01g,置于500 mL烧杯中，加入5060C水250mL使之溶 解，用已在1352C烘至恒重的4号砂芯土甘垠过滤，并用热水充分洗涤到洗涤液无色，在 1352C恒温烘箱中烘至恒重。 5. 2计算（本品水不溶物不得过0. 20） 水不溶物的质量百分含量以2）按下式计算 X2 （mi/nio） X 100 式中nh干燥后水不溶物的质量，g； m2试料的质量，go 6异丙醍萃取物含量的测定 6. 1试剂 a. 异丙醍 b. 盐酸（GB/T 622） 2 98, 3 7 溶液； c. 氢氧化钠（GB/T 629） 5 g/L、20 g/L、100 g/L 溶液; d. 硫酸亚铁（GB/T 664） c （FeSOQ 0. Imol/L 标准溶液； e. 硫氤酸铉（GB/T 660） c （NH4CNS） 0. Imol/L 标准溶液； f. 三氯化钛标准溶液c （l/3TiCl3） 0. Imol/L溶液，溶液需新配制，配制方法见附录A （补充件）。 6. 2操作步骤 称取约2 g试样，精确到0. 01g,用水100 mL溶解后，试验溶液移入500 mL分液漏斗中， 加异丙酷40 mL，摇动Imin,静置分层，分出染料水层，置于另一分液漏斗中，留存的异 丙醍，每次用水25mL洗涤，共洗二次，弃去洗涤液，将异丙醍液通过脱脂棉直接滤入已 知质量的150mL磨口锥形瓶中，第一次分出的染料溶液，加入100 g/L氢氧化钠溶液2 mL, 用异丙醍40 mL同上法进行第二次萃取，异丙醍用5 g/L氢氧化钠溶液25mL洗涤一次， 每次用水250mL再洗涤二次，弃去洗涤液，将异丙醍液通过脱脂棉滤入同一锥形瓶中，第 二次分出的染料水溶液，加入5mL盐酸溶液（3 7）,再用异丙酷40mL进行第三次萃取， 异丙醍液用25mL盐酸溶液（2 98）洗涤一次，每次用水25mL再洗涤二次，合并三次异 丙酷萃取液，在80〜85C水浴中蒸去异丙醍，然后将锥形瓶置于温度为80〜85C的烘箱 中，烘至恒重。同时以100mL水代替试样溶液，以相同方法做一空白试验。 6. 3计算 异丙酷萃取物的质量百分含量（X。按下式计算 X3 （m4m5） / m3X 100 式中叫一萃取物的质量，g； IDs 空白试验时萃取物的质量，g； IDs试料的质量，go 7副染料含量的测定 7. 1方法提要 用纸上层析法将各组分分离、洗脱，然后用分光光度法定量。 7. 2试剂和材料 a. 无水乙醇GB/T678； b. 正丁醇HG/T 3-1012； c. 丙酮GB/T 686 1 1 溶液； d. 氨水HG/T 631 4 96 溶液； e. 碳酸氢钠GB/T 640溶液4g/L溶液。 7. 3仪器、设备 a. 分光光度计； b. 层析滤纸1号中速，150mmX250 mm； c. 层析缸t240 mm X 300 mm； d. 微量进样器100 uL； e. 纳氏比色管50mL,具磨口塞； f. 3号玻璃砂芯漏斗。 7.4操作步骤 7. 4.1纸上层析条件 展开剂 正丁醇无水乙醇氨水溶液 6 2 3； 温度20〜25C。 7. 4. 2试样洗出液的制备 称取1 g胭脂红试样，精确至0. 01g,置于烧杯中，加入适量水溶解后移入100 mL容量瓶 中，稀释至刻度，摇匀，用微量进样器吸取200 UL,均匀地点在离滤纸底边25 mm的一 条基线上，成一直线，使其溶液在滤纸上的宽度不超过5 mm,长度为130 mm,用吹风机 吹干，将滤纸放入层析缸中展开，滤纸底边浸入展开剂液面下10 mm,待展开剂前沿线上 升至150 mm或直到副染料分离满意为止，取出层析滤纸，用吹风机以冷风吹干。 同时用空白滤纸在相同条件下展开该空白滤纸必须和试样溶液展开用的滤纸在同一张 600 mmX 600 mm的滤纸上相邻部位裁取。 将各个副染料和在空白滤纸上与副染料相对应的部位的滤纸，按同样大小剪下，并剪成约 5 mmX 15 mm的细条，分别置于50mL的纳氏比色管中，各准确加入丙酮溶液5 mL,摇动3- 5min后