脂肪酶测定SOP_LIP临床意义

文件编号 脂肪酶测定版本号 页码第页共页 1检测原理 当辅助脂肪酶、胆汁盐和氯化钙存在，脂肪酶能催化脂肪酶底物1,2-0-双十二烷基-rac-甘油-3- 戊二酸-（6 -甲基试卤灵）酯的水解（反应图示如下）。通过水解生成不稳定的中间产物戊二酸-6 -甲基试卤灵酯。然后中间产物被H20水解生成游离的甲基试卤灵，在577 nm波长上吸光。用 577/700 nm的双波长反应可测定脂肪酶的活性。反应的比率与样本中脂肪酶的含量成正比。 1, 2-0-双十二烷基-rac-甘油- 脂肪酶1, 2-0-双十二烷基-rac-甘油 ► 3-戊二酸-（6-甲基试卤灵）酯戊二酸6-甲基试卤灵酯（不稳定） 戊二酸6-甲基试卤灵酯 H20 戊二酸甲基试卤灵（在577 nm波长上吸光） ► 2标本采集与处理 2. 1采血方法 空腹采不抗凝静脉血23mL 2.2标本保存 血清中的脂肪酶在室温下可保持一周的稳定性，在2 8 C下可保持三周的稳定性。 2. 3注意事项 样本的细菌污染可能导致脂肪酶值升高。乙二胺四乙酸、草酸钾、氟化钠和柠檬酸盐己证明对脂 肪酶的测试结果有抑制作用，故不应使用。标本应避免溶血、脂血、黄疸。 3试剂和设备 3. 1试剂 采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。 3. 1. 1试剂组成 试剂船13孔为脂肪酶底物0.24 mM,胆汁盐10 mM,钠盐，钾盐，酒石酸盐缓冲液1.6 mM,片 剂；46孔为三羟甲基氨基甲烷缓冲液50 mM,氯化钙2.0 mM,辅助脂肪酶2. 8 x 105 U/Ld,片剂； 78孔为NaOH 0. 53 M,液体。 3. 1.2试剂准备 直接使用。 3. 1.3试剂保存 试剂28C保存，有效期内稳定。 3. 2质控品 美国BIORAD液体多项质控品。 文件编号 脂肪酶测定版本号 页码第页共页 3. 3校准品 西门子校准品。 3.4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 4. 1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 4. 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 4. 3标本处理 以25003000r/min,离心610min,分离血清上机测定。如不能及时检测，分离血清于2-8C保存。 4. 4标本检测 4. 4. 1手工编排测试项目样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample No处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的 按键改变Mode （按F7MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4NEXT PRIORITY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8NEXT FLUID选择标本类型）。 4. 4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4.4.3运行输入完毕后按F3LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行 样品检测。 4. 4. 4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。 5校准程序 5. 1校准品准备和储存 直接使用，28C保存。 5. 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 5. 3校准程序 主屏幕按 F5 PROCESS CTRLFl CALIBRATION,按 enterF2 SET-UP RUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator、校准液货号Calibrator 文件编号 月旨肪酶测定版本号 页码第页共页 Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4 ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样 品架上，按F7 L0AD/RUN-F4 RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 6. 1质控品准备和储存 质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10-70C可保存到瓶身有效期，未开启28C可保 存90d,开启后28C可保存30d o 6. 2质控水平和分析批长度 每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。 6. 3质控操作程序 与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。 7性能参数 本法线性范围为50 1500U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入 稀释因子后再重新检测。 8生物参考区间 114 -286 U/Lo 9临床意义 此酶活力增高常见于急性胰腺炎。 10参考文献 [1] 西门子医学诊断产品（上海）有限公司脂肪酶（LIP）测定试剂说明书。 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京东南大学出版社，2006 431-434o 编写 审核 批准