肌钙蛋白I测定SOP_CTNI临床意义

文件编号 肌钙蛋白I测定版本号 页码第页共页 1检测原理 CTNI方法是基于双抗体夹心原理的一步法酶免疫测定。样本与用心肌肌钙蛋白2分子的特异单克 隆抗体包被的二氧化铭颗粒，和标记了心肌肌钙蛋白T的特异单克隆抗体的结合试剂碱性磷酸酶 （ALP）］共同孵育，形成颗粒/心肌肌钙蛋白1/结合夹心。自由轲合物可通过磁性分离和清洗来清除。 分离和清洗之后，颗粒/心肌肌钙蛋白T/结合剂夹心转移到比色杯中，在那里，夹心结合的碱性磷 酸酶触发扩增反应。使人造黄素腺嘿吟二核昔酸磷酸（FADP）脱去磷酸，生成黄素腺噂吟二核昔酸 （FAD）。结合到apo D-氨基酸氧化酶（脱辅基的）并将其转换为活化的全D-氨基酸氧化酶。然后每个 全D-氨基酸氧化酶分子生成多个分子过氧化氢（H202）,后者在有辣根过氧化物酶（HRP）的条件下， 将3, 5-二氯-2-羟苯璜酸（DCHBS）和4-氨基安替比林（4-AAP）转换为在510 nm处吸光的有色产 品。测定的颜色变化与患者样本中存在的心肌肌钙蛋白T浓度成正比。 cTnl CrO厂Ab Fab -ALP ►CrO厂Ab- cTnl- Fab -ALP CrO厂Ab Fab -ALP CrO；-Ab- cTnl- Fab -ALP CrO厂Ab Fab -ALP 清洗、CrO-Ab- cTnl- Fab -ALP CrO厂Ab （转移到比色杯） FADPCrO〃-Ab- cTnl- Fab -ALP FAD Pi ► apo D-氨基酸氧化酶FAD」全D-氨基酸氧化酶 D-脯氨酸 02全D-氨基酸氧化酶」H202 H2O2 DCHBS 4-AAP HRP 「 颜色（在510nm处吸收） 2标本采集与处理 2. 1采血方法 空腹不抗凝静脉血23mlo 2. 2标本保存 室温保存，及时送检和检测。样本在28CT可存储14天，在-20 C下可保存8周。 2. 3注意事项 推荐选用血清。在存在EDTA、柠檬酸盐、草酸盐下采集的血样和含抗凝血剂不足的冷冻血浆，可 能导致铭颗粒的凝结，不可以使用。标本应避免乳糜、溶血、黄疸。 3试剂和设备 3. 1试剂 文件编号 肌钙蛋白I测定版本号 页码第页共页 3. 1. 1试剂组成 试剂船1孔为FADP 0. 056 mg/mL, D-脯氨酸68. 8mg/mL,片剂；2孔为Apo-D-氨基酸氧化酶0. 23 mg/mL,辣根过氧化物酶，过氧化物酶 0.19 mg/mL, DCHBS 3. 9 mg/mL, 4-AAP 1. 18 mg/mL,片剂；5 孔为抗体-Cr02 1.6 mg/mL,片剂；6孔为抗体-碱性磷酸酶，液体；7孔为缓冲液，稳定剂，液体；8 孔为馅片剂稀释液，稳定剂，液体。 3. 1. 2试剂准备 直接使用。 3. 1. 3试剂保存 试剂28C保存，有效期内稳定。 3. 2质控品 美国BIORAD质控液。 3. 3校准品 西门子校准品。 3.4仪器 SIEMENS DIMENSION Xpand Plus/RxL Max 全自动生化分析系统。 4操作程序 4. 1检测过程流程 签收样品一离心一上机检测一审核报告一签发报告一标本保存。 4. 2样品签收 严格按照标本接收程序签收标本。 4. 3标本处理 以25003000r/min,离心610min,分离血清上机测定。若标本不能及时检测，将分离的血清冷藏 与2-8 C的冰箱内。 4. 4标本检测 4. 4. 1手工编排测试项目样品按编号装入样品架，主屏幕按FkENTER DATA,在Position处输入样 品所在样品架字母及所在位置号，按enter,在Patient Name处选择性输入病人名字，按enter,在Sample N。处输入样品号，按enter,在Tests处使用检验键或检验组合键选择相应项目，根据需要选择相应的 按键改变Mode （按F7MEXT MODE选择样品管类型）、Priority （按F4NEXT PRIORIY选择样品的 处理模式）、Fluid （按F8NEXT FLUID选择标本类型）。 4. 4.2双向条形码标本分离血清后直接运行仪器。 4. 4.3运行输入完毕后按F3LOAD LIST,确认样品已经装载在样本盘上，按Run键，仪器开始进行 文件编号 肌钙蛋白I测定版本号 页码第页共页 样品检测。 4. 4. 4检验后标本保存 标本检验完成后用采血管原盖盖紧，保存于标本冷藏库内，按日期放好，保存期为7天。 5校准程序 5. 1校准品准备和储存 直接使用，28C保存。 5. 2校准条件 在室内质控失控、更换试剂批号、更换仪器主要配件或进行大保养后均需校准。无特殊情况校准 周期为3个月。 5. 3校准程序 主屏幕按 F5 PROCESS CTRLFl CALIBRATION,按 enterF2 SET-UP RUN,按项目键选择所需要 校准的项目名称,选中相应试剂批号LOT,输入操作者姓名Operator,校准液货号Calibrator Product和批号Lot,以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position,最后把校准液各个水 平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4 ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样 品架上，按F7 LOAD/RUNF4 RUN或“RUN”运行键运行校准程序。 6质量控制程序 6. 1质控品准备和储存 质控品为液体，可以直接使用。 6. 2质控水平和分析批长度 每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。 6. 3质控操作程序 与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。 7性能参数 本法线性范围为0. 04 40. 00ng/mL,对于超过测定线性范围的结果，用样本稀释液进行稀释，输入 稀释因子后再重新检测。 8生物参考区间 0.00 0.05ng/mL。 9临床意义 血清肌钙蛋白作为一种理想的心肌细胞损伤的特异性标记物，用于急性心肌梗死及各种原因引起 的炎性和非炎性心肌损伤。 10参考文献 文件编号 肌钙蛋白I测定版本号 页码第页共页 [2]叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京东南大学出版社，2006 353354。 编写 审核 批准