4%多聚甲醛的配制

4多聚甲醛的配制 0.1M PBS配制 80g NaCl 2g KCl 14.4g Na2HPO4 2.7g KH2PO4 溶于800ml蒸馏水中，用HCl调整溶液的pH值至7.4，最终加蒸馏水定容至1L即可。 在15lbf/in21034105Pa高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中，在放置磁力搅拌棒的容器中,将4克多聚甲醛EM级溶解于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风厨中60℃加热打开瓶盖使溶解,冷却至室温, 用HCl调整溶液的pH值至7.4,运用前簇新配制. 4多聚甲醛固定液 用途进行免疫组织化学方法探讨时常选用该固定液。动物灌注固定及后固定（动物器官经该液灌注后，然后取材，再用该液浸泡2-24小时）也常选该固定液固定。 试剂 多聚甲醛 40g PBS0.1 mol/L PH 7.4 500 ml 混合后加热至60℃，搅拌并滴加1N NaOH 至清亮为止，冷却后加PBS 至总量1000 ml。 注固定时间24小时。 我们试验室始终沿用的4％多聚甲醛固定液（用于固定鼠或者兔的脑组织标本）的配方是 多聚甲醛（粉末状）40g 磷酸二氢钠2.965g 磷酸氢二钠29g 蒸馏水1000ml 然后一块放到三角烧瓶中，在磁力搅拌器上加热（60℃）振荡24小时。 原来始终用的挺好，配出来也很清亮。 但是这几次也是用同样的方法配出来后，在加热时是清亮的，但是瓶底有不少不溶的杂质。等不再加热，室温后，溶液就混浊了。再加热到60度又清亮了。再冷却到室温后又混浊了。 不知道为啥请高手指引一二，不胜感谢 4％多聚甲醛固定液里头的陪法有点小技巧多聚甲醛是教易溶于碱性条件下的,先加多聚甲醛和氢二钠,干脆在通风状况下加热溶解,一般15到20分钟就可以,也许放置20分钟后再加二氢钠,溶解后,调PH直到7.2左右即可,最终别遗忘放DEPC. 其实武汉博士德就有4％多聚甲醛固定液卖的,我们以前都是自己配,一是麻烦,二是要用到DEPC,有毒而且易挥发,还带香味,闻到后喉龙就不舒适.后来就干脆找他们买了,便利便宜,省事,最主要的,他们专业点,东西好用 你要考虑以下几过因素 1.蒸馏水干净. 2.三角烧瓶干净. 3.试剂没问题. 多聚甲醛就是很难溶解，你把它放在37度温箱里若干天再去看它会有惊喜。以前用过磁力搅拌棒转一上午都不行，放在一边过几天再看就溶解了。 假如要求中性多聚甲醛就用pbs或者用磷酸氢二钠二氢钠，假如不要求中性用水就可以啦 我要做免疫组化试验。用ABC法，DAB显色。 组织的固定液，查外文资料用的都是4％多聚甲醛／0.1M PBS。但是试验室的老师说，是用0.01M的PBS配制，不知道是不是一样的 还有就是冲洗液，我查的英文资料都是用0.1M PBS。但是试验室老师说是0.01M PBS。 不知道大家对这个又没有阅历。 固定用0.1M PBS，冲洗用0.01M PBS pbs 0.1M的PBS Nacl 8.5克 Na2HPO4.12H2O 30.8克 NaH2PO4.2H2O 2.8 克 双蒸水 定容至1000ml 0.1M PBS缓冲液的配制 Nacl 4g Kcl 0.1g Na2HPO4.12H2O 1.445g KH2PO4l 0.1g 用500ml 去离子水溶解，5.6NaCO3调PH至7.2左右 假如只单纯看看HE的话时间倒无所谓，但假如试验还要做免疫组化、原位杂交等，那么最好不要超过24小时，否则就等着吧，哈哈。