岛津LC20A型高效液相色谱仪操作规程——相关操作

岛津岛津 LC-20ALC-20A 型高效液相色谱仪操作规程型高效液相色谱仪操作规程 1．实验前的预备 预备所需的流动相，自动进样器用的清洗液（甲醇-水 5050） ，用 适合的有机滤膜（ μm）滤过。流动相装入溶剂储液瓶，确认 吸滤头已置于液面以下。 配制样品和标准品溶液，用适合的滤膜 μm滤过。 依照待检样品的需要改换适合的洗脱柱（连接时注意方向） 。 2．开机 接通电源， 打开输液泵 （脱气机自动打开） 、 检测器、 自动进样器、 柱温箱，顺序无关紧要；等待各仪器单元的指示灯变成绿色时进 行下一步操作。 打开电脑，双击桌面“LCsolution”图标，单击“仪器1” ，弹出 “登录”窗口，单击“确认” ，听到两声蜂鸣，表示LCsolution 色 谱工作站与仪器联机正常。 在 LCSolution 工作站 “仪器参数视图”中“自动排气”项进行 排气时刻设置，对输液泵及自动进样器进行必要的 Purge 操作， 排出相应流路中的气泡；检查输液泵在动作前的压力显示值，必 要时对此压力进行调零。 3．参数设定 点击“仪器参数视图”进入仪器参数设置界面选中“正常” 或“高级”项，别离设定“数据搜集” 、 “LC 时刻程序” 、 “检测器 A” 、 “柱温箱” 、 “操纵器” 、 “自动进样器”等参数。 “泵”参数 “模式”操纵送液模式， “泵 A 总流速”设定流速， “溶剂 B（C、D）浓度”为各相所占百分比， “压力限制（泵 A） ” 设置系统所能经受的压力范围，通常将“最大值”设置 为， “最小值”设为 0。 “柱温箱”参数假设利用柱温箱，那么选中“启用柱温箱”复 选框，在“柱温箱温度”设定柱温， “最高温度”设定最高爱 惜温度（通常默许 85℃） 。 “检测器 A”参数 “灯”项选“D2”表示将灯打开，选“关” 那么氘灯关闭； “波长通道 1（1） ”处设置检测波长；其余维 持默许值。 “数据搜集”参数选中“搜集时刻（检测器A） ” 复选框，设 置数据搜集的“开始时刻”和“终止时刻” 。 “LC 时刻程序”参数如采纳梯度洗脱方式，那么须编辑泵梯 度洗脱程序，也能够通过时刻程序操纵柱温箱温度， 检测波长 等参数。 *参数设定完毕，点击主菜单中“文件”下的下拉菜单“另存方 式文件为”保留方式文件。点击“下载”传送参数。 4．数据搜集方式编辑 点击“数据搜集”进入搜集数据编辑方式界面；点击主菜单 “方式”下的“数据分析参数（检测器 A） ”编辑数据分析参数， 设置“半峰宽” 、 “斜率” 、 “最小峰面积”等数据积分参数。 保留方式点击主菜单中“文件”下的下拉菜单“另存方式 文件 ”保留数据分析参数。 5．平稳系统 点击“仪器开/关” （现在“泵开/关”同时开启） ，使仪器处于 开启状态。系统开始运行，检查各单元参数应与方式设定一致， 等待系统平稳。一样情形下，由于流动相不同，互换平稳时刻不 同。能够观看检测器输出信号转变，若是输出信号稳固不变，即 以为接近平稳，能够调零等待，待基线平稳，压力稳固，系统平 稳后，预备进样分析。 6．进样分析 单针进样分析单针进样分析点击“单次运行”图标编辑样品参数如“样品 名” 、 “样品 ID”等样品信息；在“方式文件”项挪用本次分 析的方式文件名，在“数据文件”项选择数据存储途径；填 写本次分析的 “样品瓶” 、 “样品架” 、 “进样体积” ， 点击 “确 信”后，开始进样操作。 批处置分析批处置分析 点击 “批处置” ， 显现批处置表的对话框。 利用 “向 导”创建批处置表。单击“向导” ，弹出“批处置表向导”对 话框，选择“新建”批处置表，在“方式文件”项选择方式 文件，选择“开始样品瓶” 、 “样品架” ，输入“进样体积” ， 点击“下一步” ； “样品组数”选择 1，样品类型选择“仅未 知” ，点击“下一步” ；输入“样品名” 、 “样品 ID” ，在“数 据文件”项下选择数据存储途径，在“每组中的未知样品瓶 数”项输入批处置个数，点击“下一步” ；批处置向导-汇总 报告不做设置， 点击 “下一步” ； 选择 “关机方式文件” 及 “冷 却时刻” ；点击完成，初步成立一个批处置表。在成立好的批 处置表中，能够依照需要，手动更改样品信息及分析方式。 单击“批处置开始” ，批处置表开始运行。 7．报告编辑 在“LC 再解析”中，点击“LC 数据分析” 。进入数据后处置界 面。打开一个数据文件，能够在“色谱图视图”中观看LC 色 谱图，在色谱图上单击右键，能够更改积分参数，调整色谱图 显示方式。 点击“数据报告”进入报告界面，调入报告格式文件，用鼠标将 报告格式文件拖曳到右边报告栏内。 报告格式，也能够通过内 容选择图标，在报告中确信位置后，添加即可。右键功能很壮 大，能够依照需要对报告进行修改。 8．系统清洗 数据搜集完毕后， 关闭检测器， 继续以工作流动相冲洗 20min 后， （如流动相含缓冲盐，换为不含缓冲盐的同比例流动相再冲洗 20min） ，可采纳以下方式冲洗系统 ①换用纯水 （至少含 5的有机相） 冲洗系统及色谱柱至 少 60min，最后用甲醇或乙腈冲洗至少 30min； ②在 “LC 时刻程序” 中设置梯度程序清洗系统及色谱柱。 冲洗完成后，将整个流路都置于有机溶剂中。 注由于仪器单向阀结构及材质缘故，建议流路最终保留在注由于仪器单向阀结构及材质缘故，建议流路最终保留在 甲醇中，假设长期利用乙睛流动相或用乙睛冲洗流路，易造成单甲醇中，假设长期利用乙睛流动相或用乙睛冲洗流路，易造成单 向阀堵塞。向阀堵塞。 9．关机 清洗完成后，点击“仪器开/关” ，观看“泵A 压力”降至后， 拆下色谱柱，连接二通阀；点击“关机”关闭系统，关闭仪器各 单元电源按钮。 10、填写记录 认真填写仪器利用记录，整理实验台面。 岛津岛津 LC-20ALC-20A 型高效液相色谱仪操作注意事项型高效液相色谱仪操作注意事项 流动相流动相 一、 流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需通过滤后 利用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的利用范围； 二、 水相流动相需常常改换（一样不超过 2 天），避免长菌变质。 样品样品 一、 采纳过滤或离心方式处置样品，确保样品中不含固体颗粒； 二、 用流动相或比流动相弱（假设为反相柱，那么极性比流动相大；假设为正 相柱， 那么极性比流动相小） 的溶剂制备样品溶液， 尽可能用流动相制备样品液； 3、手动进样时，进样量一样为定量环的 1/2 以下，利用定量管定量时，进样体 积应为定量管的 3～5 倍。 色谱柱色谱柱 一、 利用前认真阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH 值范围、流动 相类型等； 二、 利用符合要求的流动相； 3、 依照需要决定是不是利用爱惜柱； 4、如所用流动相为含盐流动相， 反相色谱柱利用后， 先用水或低浓度甲醇水 （如 5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗； 五、 色谱柱在不利历时，应用甲醇冲洗，取下后紧密封锁两头保留； 六、 不要高压冲洗柱子； 7、 不要在高温下长时刻利用硅胶键合相色谱柱； 8、利用进程中注意轻拿轻放。 操作进程 一、 开机操作