消毒与灭菌技术进展

消毒与灭菌技术进展消毒与灭菌技术进展 一、基本概念和消毒观念的改变一、基本概念和消毒观念的改变 （一）基本概念（一）基本概念 1．灭菌保证水平（Sterility assurance level, SAL）灭菌后产品上存在单个或微生物的机 率，国际上规定产品的灭菌保证水平为10-6，即在经灭菌处理后应使终末产品未达到灭菌要 求的最大机率 （每个样本中有菌存活的机率） 不超过百万分之一。 即若物品的原带菌量为106， 达到10-6灭菌保证水平所需要的时间应为12个D值。 2．D值指杀灭90的微生物所需要的时间。 （二）消毒观念的改变（二）消毒观念的改变 1．手消毒取消了消毒剂泡手消毒。改用流动水洗手，速干手消毒剂和免洗消毒剂揉 搓手消毒。 2．供应室消毒洗消程序由消毒清洗灭菌，改为清洗消毒清洗灭菌。 3．实验室生物安全使用洁净工作台，只对实验样品进行保护。现改用生物安全柜， 对实验样品、操作人员和环境均要保护。 原仅对甲类传染病的病原微生物有严格的要求， 现 对大部分病原微生物（包括条件致病菌）均有要求。 4．医疗废物处理处理程序由先毁形、消毒，再打包焚烧。现改为分类存放，集中储 运进行消毒灭菌处理。 采用多种方法， 除了焚烧外， 还有蒸煮法、 干热灭菌法、 化学处理法、 微波处理法、电子加速器等方法。 5．微生物对理化消毒因子的抗力的研究进展 微生物对化学消毒剂抗力问题一般认为细菌芽孢抗力最强。现认为朊毒体抗力更强。 浸入1NNaOH 1h，冲洗放入开放的容器中，121℃ 1h。 或浸入1NNaOH 1h，不冲洗，直接121℃ 1h， 或121℃ 2h 或134℃ 18min。 （1）微生物对化学消毒剂的抗力由A到G为由弱到强。 A 艾滋病毒、正粘病毒、副粘病毒、疱疹病毒、豆苗病毒、冠状病毒、其他有包膜病 毒、革兰阴性杆菌、某些丝状真菌、革兰阳性球菌、人乙肝炎病毒 B 金黄色葡萄球菌、双向性和丝状真菌、酵母菌、藻类、某些革兰阴性杆菌、细菌繁 殖体 C 腺病毒 D 轮状病毒、某些真菌孢子、脊髓灰质炎病毒、鼻病毒、微小病毒（SS DNA、甲肝 病毒 E 结核分枝杆菌 F 细菌芽胞 枯草杆菌芽胞、梭状杆菌芽孢 G 朊毒体（感染性蛋白质） （2）微生物对紫外线的抗力 细菌对紫外线的抗力 细菌种类 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 霍乱弧菌 结核分支杆菌 铜绿甲单胞菌 枯草杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 枯草杆菌芽孢 病毒对紫外线的抗力 病毒种类 脊灰病毒 甲肝病毒 uv照射剂量（μWs/cm2） 3900 6000 6500 10000 10500 11000 15200 22000 uv照射剂量（μWs/cm2） 6600 8000 真菌对紫外线的抗力 真菌种类 扩展青霉菌 灰绿霉菌 黄曲霉菌 黑根霉菌 （3）微生物对热力的抗力 uv照射剂量（μWs/cm2） 22000 88000 99000 220000 各种微生物对湿热的抗力 微生物种类 病毒 细菌繁殖体 酵母菌 霉菌 真菌和霉菌孢子 低抗力细菌芽孢 嗜热脂肪芽孢杆菌 耐热细菌芽孢 朊毒体 二、消毒器械研究进展二、消毒器械研究进展 （一）过氧化氢等离子体灭菌（一）过氧化氢等离子体灭菌 80 ℃ 1～5min 1～5min 1～5min 1～5min 5～10min 100 ℃ 1min 1～60min 60min～60h 121 ℃ 8min 120min 134 ℃ 1min 超过6h 18min 60min 1．等离子体的定义气体原子在一定的物理条件（高温、电磁场等）下部分或完全电 离，电子和原子核（离子）相互共存，宏观上正负电量相等，呈现电中性，这种状态的物质 称为等离子体，是物质存在的第四种状态。 2．过氧化氢气体等离子体灭菌原理过氧化氢经电磁场作用激发产生大量的活性氧、 高能自由基团，例如，氢氧自由基、过氧氢自由基、激活的氧原子、激活的氢原子、激发态 的过氧化氢分子等，其电子呈高能状态，当这些分子回到基本状态时， 可散发出可见光和紫 外光。这些活性基团可通过击穿效应、电场效应、 紫外线效应、高能粒子和活性自由基效应 破坏菌细胞膜外电位的平衡等作用方式杀灭各种微生物。 3．灭菌效果 将染菌不锈钢载体（长度 4cm、直径0.7mm）放置于聚四氟乙烯材质导管（长度 2000mm，径1mm； ）中间，断开处用长度 6cm，直径 2mm 的聚四氟乙烯材质导管密封， 整个聚四氟乙烯材质导管用过氧化氢等离子体专用包装袋包装。 按照仪器使用说明书使达到 满载状态，并按规定的程序（抽真空到 80pa注入过氧化氢 2ml维持 15min继续抽真空 到 80pa进行辉光放电 3min，重复以上循环一次） 。进行灭菌处理。灭菌程序结束后， 以无 菌操作取出染菌不锈钢载体，投入TSB 肉汤，放置 37℃温箱培养 7 天后，观察最终结果。 凯斯普过氧化氢等离子体低温灭菌机CASP-80A 模拟现场试验结果 试验序号 1 2 3 4 5 试验组细菌生长情况 上层 下层 对照组细菌生长情况 阳性 阴性 注“–”表示阴性，无菌生长；“”表示阳性，有菌生长。 染菌载体片活菌计数均数和围2.72106cfu/载体（2.08106cfu3.10106cfu/载体） 4．特点低温低湿，灭菌时间短仅需45～60min，操作使用方便，效果可靠，不留残 毒、不污染环境。对器材损伤小，适用于对不耐热器材的灭菌。 5．需注意的问题 血清和其他有机物等对其灭菌效果有影响。 不适用于液体、织物、纸制品等可吸收过氧化氢的物品。 需要特著的包装和容器。 对于管腔类医疗器械如镜、导尿管等灭菌效果与管腔长度、直径及是否有盲端有关。 目前美国强生、国、新华、三元、德润等公司均有产品。 （二）（二） 、酸性氧化电位水、酸性氧化电位水（又称强酸性水、酸化电位水、强酸性电解水） 酸性氧化电位水的研究始于 1987 年，由日本独立开发作为对耐甲氧西林的金黄色葡萄 球菌（MRSA）有显著效果的杀菌剂。 1．生成原理酸性氧化电位水是将添加了0.05 NaCl 的自来水，通过氧化电位水生成 机中带有离子隔膜的组合电解槽， 电解而成是一种具有高氧化还原电位 （ORP1050-1180mV） , 低 pH2.0-2.7、含低浓度的有效氯10-50mg/L的水， 2．理化性质 酸性氧化电位水是一种无色透明的液体, 具有氯味, 其氧化还原电位在1100-1180mV之 间，pH 值在 2.0-2.7 之间, 有效氯含量一般为 30-60mg/L。主要生成物为次氯酸、氯气、盐 酸、活性氧、活性羟基、过氧化氢。在室温、密闭、避光的条件下，较稳定，而在室温暴露 的条件下，不稳定，可自行分解成自来水，故不宜长期保存，最好现用现制备。 3．对微生物的杀灭作用 酸性氧化电位水可快速杀灭各种细菌繁殖体。H.Tanaka 等（1996）应用悬液试验，酸 性氧化电位水与菌悬液比例大于501 时，对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌、 MRSA、表 皮葡萄球菌、粪肠球菌、大肠杆菌O157H7、克