F-7000荧光分光光度计操作规程

日本日立 F-7000 荧光分光光度计基本操作规程 1、开机顺序 （1）开启计算机。 （按图中圆圈按钮） （2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮 （POWER） 。 （按下图中圆圈按钮） （3） 观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来， 都显示黄绿色。Xe LAMP 灯先亮，RUN 灯后亮。 2、打开运行软件。 （1） 双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000） 。主机自行初始化，扫描界面自动进入。 （2）初始化结束后，须预热 15-20 分钟若要进行定量分析，须预热 30 分钟以上，按界面提示选择操作方式。 3.点击右上角 ,进行方法设置。 若要预扫描，可选择 3-D scan（如下图）.设置好方法后（见下图） ， 再点击右上角 Pre Scan（如上图） ， 在 Instrument Monitor 菜单见下图的 Data mode 中选择 Fluorescence, 在EX Start WL中输入激发波长200， EX End WL中输入激发波长500, 在 EM Start WL中输入发射波长 210有利于保护检测器， 在 EM End WL 中输入 700nm，为节约扫描时间，扫描速度 Scan speed 可设置 为 30000。点击 update,可知扫描需要多少时间。EX slit 和 EM slit 一 般选择 5.0（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低 该数值） ，PMT Voltage （电压）中可选择700（若荧光强度太弱，可 提高该数值，若强度太高，可降低该数值） ，PMT Voltage 0-1000v 前 面的方框打勾后，可在上面的 PMT Voltage 中随意填写电压值。在 Response 中选择 Auto。 在Processing菜单中见下图的 Y Axis中的Max中填5000或10000， Min 中填 0。Contour 中填写 10，在 open data processing window after data acquisitior 前打勾。 再点击右上角 Pre Scan（如下图） ，进行预扫描。 然后选择图谱中颜色最浓、最深、纵坐标最高的漩涡中心点，点击这 个中心点，即可出现最佳激发波长、最佳发射波长及强度。 若中心点太密， 看不出 （如上图） ， 可点击右键， 选择 scale， 将 contour 由 10.00 改为 100。再点击确定。 即可出现下图情况 点击纵坐标最高的漩涡中心， 如上图和下图，在左上角即可出现最佳 激发波长（EX） 、最佳发射波长EM及强度。 待预扫描结束后，可再次点击, 进行重新设置，在General 菜 单的 Measurement 中选择 Wavelength scan（如下图） ； 在Instrument Monitor菜单见下图的scan mode中选择Emission, Data 中选择 Fluorescence, 在 EX WL 中输入预扫描中得到的最佳激发波 长， 在 EM Start WL中输入比最佳激发波长大 10nm 的数据有利于保 护检测器，在 EM End WL 中输入 700nm，Scan speed 中选择 240 或 1200，EX slit 和 EM slit 一般选择 5.0（若荧光强度太弱，可提高 该数值，若强度太高，可降低该数值） ，PMT Voltage （电压）中可 选择 700（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该 数值） ，PMT Voltage 0-1000v 前面的方框打勾后，可在上面的 PMT Voltage 中随意填写电压值。在 Response 中选择 Auto, 在 Replicates 中选择 1，在 Cycle time 中填 0。 在 Processing 菜单中见下图的 Y Axis 中的 Max 中填 1000 或 2000 或 10000 （可根据预扫描结果的荧光强度值填写 Y 轴荧光强度的最大 值） ，Min 中填 0。Contour 中填写 10，在 open data processing window after data acquisitior 前打勾。 4.点击右上角 Sample ABC,进行数据存储模式及途径设置（见下图） 。 5.点击上图右上角 Measure,即可对样品进行测试，测试完后在图谱右 上角点击 report，再点击文件菜单“另存为” ，可将图谱数据另存为 excel 格式。 6. 96 微孔板的操作，先安装相关装置，安装后（见下图）图中画圆 圈的支架突出部分要压住它边上按钮。 开机后在空白图谱上面可见 MPR 菜单见下图，点击该按钮。 出现下图情景 点击 Data save,可设置数据格式及存储路线（如下图） 。 点击上图中的 Exchange position，放微孔板的支架会跳出来，然后可 放入装有样品的微孔板，左下角为 A1 位置（见下图） 。 选择图中有样品的比色皿， 如下图， 点击 Sample set,可出现黄色背景， 若点击 Reset,可取消设置，黄色背景消失。可选择某一个样品进行预 扫描（设置方法同上面叙述过的方法一样） ，根据预扫描结果，再对 方法进行设置（设置方法同上面叙述过的方法一样） ，对批量样品进 行测试。 7、关机顺序（逆开机顺序实施操作） （1）关闭运行软件 FL Solution 2.1 for F-7000。 （2）关闭仪器主机电源。 （3）关闭计算机。 注意事项 （1）注意开机顺序。步骤 1-（2）若是未先开主机，则程序会抓取不 到主机讯号。 （2）注意关机顺序。 （3）为延长仪器使用寿命，扫描速度、负高压、狭缝的设置一般不 宜选在高档。 （4）关机后必须半小时（等氙灯温度降下）方可重新开机。 F-7000 荧光分光光度计使用操作步骤 1、开机 （1）开启计算机。 （2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮 （POWER） 。同时，观察主机正面面板右侧的 Xe LAMP 和 RUN 指 示灯依次亮起来，都显示绿色。 2、计算机进入 Windows XP视窗后，打开运行软件（如图 1） 。 （1） 双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000） 。主机自行初始化，扫描界面自动进入。 （2）初始化结束后，须预热15-20 分钟，按界面提示选择操作方式。 图 1FL Solution 2.1 扫描界面 3、测试模式的选择波长扫描（wavelength scan） （1）点击扫描界面右侧“”。 （2）在“General”选项中的“Measurement”选择“wavelength scan”测量模式，如图 2。 图 2 --“General”选项的界面 （3）在“Instrument”选项中设置仪器参数和扫描参数，如图 3。 图 3--- “Instrument”选项设置界面 主要参数选项包括 ① 选择扫描模式“Scan Mode