医学毕业论文胸水淋巴细胞微核率检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义

XX大学 毕业论文 胸水淋巴细胞微核率检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的意 姓 名 2014年6月25日 胸水淋巴细胞微核率检测在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义 【关键词】胸腔积液 关键词微核;胸腔积液;染色体，人;染色体畸变 摘要目的 探讨胸水中淋巴细胞微核率PFLMNF对良、恶性胸腔积 液鉴别诊断的意义.方法 对良、恶性胸腔积液患者及健康人各20例采用细胞 分裂阻滞微核CB-MN法检测外周血淋巴细胞微核率PBLMNF及用丝裂 霉素C MMC诱发PBLMNF,直接用光镜观察PFLMNF,结果 PFLMNF与 PBLMNF有良好的相关性r0.935, P0.01.恶性胸腔积液患者自发PBLMNF 及诱发PBLMNF均显著高于对照组和良性胸腔积液组P0.01.良性胸腔积液组 PBLMNF与对照组无统计差异P0.05.恶性胸腔积液组PFLMNF较良性胸腔 积液组明显升高P0.01.结论PFLMNF检测方法简单、快速、实用，并可 以代替PBLMNF检测，PFLMNF检测可成为良、恶性胸腔积液鉴别诊断的一种 有实用价值的方法. Keywordsmicronuclei;pleural effusion;chromosomes, hu-man;chromosome aberrations AbstractAIM To investigate the significance of pleural fluid lymphocyte micronuclei frequency PFLMNF for diag-nosis of malignant pleural effusion and benign pleural effu-| sion.S The modified cytokinesis-blocked mi-cronucleus CB-MN technique was used to determine pe-ripheral blood lymphocyte micronuclei frequency PBLMNF and mitomycin C MMC -induced PBLMNF in20cases with benign pleural effusion, 20cases with malignant pleural effu-sion and20health controls, while PFLMNF was investigated in the40patients at the same time. RE SULTS There was a better correlation between PFLMNF and PBLMNF r0.935, P0.01 .Spontaneous PBLMNF and MMC-induced PBLMNF of the malignant effusion group were much higher than that of the benign effusion group or the control group （P0.01） .However, PBLMNFs in the latter two groups had no statistic difference （P0.05 ） .PFMNF in the malig-nant effusion group were significantly higher than that in the benign group （P0.01） .CONCLUSION PFLMNF test, which is a simple, fast, practical , can be used to re-place the PBLMNF test.lt is a practical diagnostic for malignant pleural effusion and benign pleural effusion. 0引言 胸腔积液常规方法多能定性诊断，但仍有部分难区分良、恶性.胸膜活检虽 可信，但有创伤、阳性率低.为此人们尝试胸水细胞染色体畸变率、p53突变作为 辅助诊断指标［1-5］，但需专门培训.微核检测简便、快速，是染色体损伤和染 色体畸变的可靠替代指标.近些年研究发现多种肿瘤患者外周血淋巴细胞微核率 （PBLMNF）及脱落细胞微核率增高［6-9］，肿瘤患者诱发微核率增加显著高 于正常人，表明肿瘤患者染色体稳定性差 ［10,11］.提示PBLMNF是潜在的肿瘤诊断的辅助指标.我们采用改良的Fenech ［12］创建的胞质分裂阻滞法检测胸水患者自发及丝裂霉素诱发PBLMNF,直 接在光镜下观察胸水淋巴细胞微核率（PFLMNF）, 了解PFLMNF能否反应 PBLMNF,探讨PFLMNF检测及诱发微核试验在良、恶性胸腔积液鉴别诊断中 的价值. 1对象和方法 1.1对象实验分3组，即恶性胸腔积液组、良性胸腔积液组及健康对照 组.①恶性胸腔积液组（A组）20 （男13,女7）例.年龄2867 （平均46.711.4） 岁.其中肺癌14例，胸膜间皮瘤3例，乳腺癌胸膜转移1例，肝癌胸膜转移2例. 全部经病理细胞学确诊.实验前均未作化疗、放疗.②良性胸腔积液组（B组）20 （男10,女10）例，年龄22-71 （平均46.514.8）岁，结核性胸膜炎16例， 根据临床表现、胸水生化检查及治疗结果确诊.系统性红斑狼疮胸腔积液1例， 经血液狼疮细胞多次检查确诊.肝硬化低蛋白血症胸腔积液3例，根据临床表现、 肝功检查、胸腔积液检查确诊.③健康对照组（C组）20 （男13,女7）例，年 龄26-71 （平均46.511.7）岁.胸腔积液患者均为住院确诊患者，标本为入院后 未作治疗的前两次胸腔积液.3组人群均无遗传性疾病，实验前Iwk无服用致畸 化学药物及反复放射线大量接触史. 1.2方法 1.2.1外周血淋巴细胞自发微核 取肝素抗凝血0.5mL加入含200mLL-l 小牛血清的RPMI1640培养液5mL （内含双抗各1x105 UL-1 ）,加入终浓度为 2gL-l PHA （植物血凝素）,50mLL-l CO2恒温培养箱37.0C培养36h,加入终 浓度为6mgL-l的细胞松弛素B,继续培养36h.培养物移入10mL刻度离心管中， 1000rmin-l离心8min（以下均相同）.弃上清液加入O.lmolL-1的KC1溶液3mL, 37.0C低渗3min,随后加入新配制甲醇冰醋酸（3 1）固定液2mL轻轻吹匀预 固定，离心弃上清液.加固定液5mL固定20min,离心弃上清液.加少许固定液吹 匀沉淀，34滴滴于冰冻载玻片上，由一端向另一端吹匀，气干.Giemsa-Wright （pH6.8）复染 15min. 1.2.2体外淋巴细胞诱发微核0.5mL肝素抗凝血培养前加入终浓度为 O.lmgL-1丝裂霉素C,其余实验步骤同上. 1.2.3