医学毕业论文apc、βcatenin和cmyc在大肠癌中的表达及其意义

XX大学 毕业论文 APC、8 catenin和c myc在大肠癌中的表达及其意义 2014年6月25日 APC、p catenin和c myc在大肠癌中的表达及其意义 作者戴文斌，任占平，陈蔚麟，杜娟，石吉吉，唐德艳 【摘要】 目的 探讨APC、P catenin和c myc在大肠癌发生、发展中的作 用。方法 采用免疫组化方法检测30例正常大肠黏膜、30例大肠腺瘤、10例大 肠腺瘤恶变及50例大肠癌组织中APC、P catenin和c myc蛋白的表达情况。 结果大肠癌和大肠腺瘤恶变APC阳性率分别为44.0、40.0,显著低于大肠 腺瘤86.7和正常大肠黏膜100 PO.Olo大肠癌、大肠腺瘤恶变和大 肠腺瘤P catenin胞浆和或胞核异位表达率分别为62.0、50.0、30.0,显 著高于正常大肠黏膜0 P0.01,大肠癌p catenin异位表达率显著高于大肠 腺瘤P0.01。大肠癌、大肠腺瘤恶变、大肠腺瘤c myc阳性率分别为56.0、 60.0、46.7,显著高于正常大肠黏膜0 PO.Olo大肠癌中P catenin膜表 达缺失率为46.0,显著高于大肠腺瘤10.0和正常大肠黏膜0 P0.01, 且与大肠癌组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移、Dukes分期有关。APC蛋白 表达与大肠癌组织分化程度有关。大肠癌中。catenin异位表达与c myc阳性 表达呈正相关关系r0.63, P0.01,而与APC阳性表达呈负相关关系r-0.39, P0.05o结论APC失表达和或catenin异位表达，激活癌基因c myc过表 达与大肠癌的发生、发展密切相关，可能是大肠癌发生的早期事件；P catenin 膜表达缺失与大肠癌的侵袭、转移有关。 【关键词】大肠癌；APC； P catenin； c myc 大肠癌的发生、发展是一个多因素、多阶段、多基因异常改变的复杂过程。 近年来，分子生物学研究发现Wnt信号传导通路成员各癌基因、抑癌基因的异 常，激活下游相关靶基因的转录及细胞黏附分子异常与大肠癌的发生、发展密切 相关，其中P catenin在Wnt信号传导通路和细胞黏附中发挥关键作用。 P catenin具有双重功能，它是Wnt信号传导通路中的重要成员，。catenin介 导的Wnt信号传导通路异常激活与大肠癌的发生关系密切，同时P catenin参 与的E cadherin/p catenin复合体结构和功能异常在大肠癌的侵袭、转移中起 重要作用。本研究应用免疫组化技术检测APC、P catenin及c myc蛋白在正 常大肠黏膜、大肠腺瘤、大肠腺瘤恶变和大肠癌中的表达及其关系，以探讨Wnt 信号传导通路及细胞黏附分子异常在大肠癌发生、发展中的作用。 1资料与方法 1.1资料 随机抽取我院1998年1月〜2002年12月大肠癌根治性切除 经病理确诊的50例大肠腺癌及同期手术切除和结肠镜活检并经病理确诊的30 例大肠腺瘤，10例大肠腺瘤恶变标本。其中取癌旁10cm以上正常大肠黏膜组织 30例作正常对照。大肠癌标本中男27例，女23例；年龄19〜81岁，中位年龄 60.5岁。大肠癌组织学分型，乳头状腺癌1例，管状腺癌43例，黏液腺癌4例， 印戒细胞癌2例，其中高分化腺癌11例，中分化腺癌22例，低分化腺癌17例。 已浸润至浆膜层者37例，未及者13例；伴有淋巴结转移者13例，无淋巴结转 移者37例。按Dukes分期，A期11例，B期26例，C期9例，D期4例。大 肠腺瘤标本中，管状腺瘤19例，混合型腺瘤8例，绒毛状腺瘤3例，腺瘤伴轻、 中、重度不典型增生各10例。 1.2主要试剂与免疫组化方法 1.2.1主要试剂 浓缩型兔抗人APC多克隆抗体C 20、鼠抗人 p catenin单克隆抗体SC 7963、鼠抗人c myc单克隆抗体SC 40均购自美 国 Santa Cruz 公司，工作浓度分别为1 200、1 100、1 100。Envision 试 剂盒购自福州迈新公司。 1.2.2免疫组化 所有标本均做4pim连续切片，作HE和免疫组化染色。 按Envision二步法进行免疫组化染色，3种抗体孵育前，切片均经微波抗原修复, 具体方法参照说明书。以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知大肠癌阳性组织 作为阳性对照。 1.3结果判断免疫组化染色阳性信号为细胞出现棕黄色细小颗粒。 P catenin染色结果判断标准按照Maruyama等［1］方法，分别从细胞膜、细胞浆、 细胞核三方面判断 catenin在细胞内的分布细胞膜＞70细胞阳性为正常表 达，反之为表达缺失；细胞浆或细胞核＞10细胞阳性为胞浆或胞核阳性表达， 胞浆或胞核表达称为异位表达；细胞膜表达缺失、胞浆或胞核表达统称为表达异 常。APC以细胞浆，而c myc以细胞核＞10细胞阳性为阳性表达，反之为阴 性表达。 1.4统计学处理 运用SPSS10.0统计软件进行％2检验和相关性检验。 2结果 2.1 APC、P catenin和c myc蛋白在不同大肠组织中的表达 APC阳性表达定位于上皮细胞浆，见图lo P catenin正常表达定位于上 皮细胞膜，见图2。大肠腺瘤、大肠腺瘤恶变和大肠癌组织 catenin胞膜表达 不同程度缺失，P catenin呈胞浆和（或）胞核异位表达，见图3。c myc阳性呈 胞核表达。正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤、大肠腺瘤恶变、大肠癌组织中APC、 P catenin 和 c myc 的表达情况，见表 1。表 1 APC、P catenin 和 c myc 蛋白在正常大肠注*分别与大肠腺瘤恶变、大肠癌比较，P0.01； **分别与大肠 腺瘤、大肠腺瘤恶变、大肠癌比较，P0.01；与大肠癌比较，P0.01； 分别与大 肠腺瘤、正常大肠黏膜比较，P0.01； △分别与大肠腺瘤、大肠腺瘤恶变、大肠 癌比较，P0.012.2APC、（3 catenin和c myc蛋白表达与大肠癌临床病理参数的 关系 见表2。表2 APC、P catenin和c myc蛋白表达与大肠癌临床病理参 数的关系注*与未及浆膜层组比较，P0.05； **与低分化组比较，P0.01； 与有 淋巴结转移组比较，P0.01； △与AB期组比较，P0.012.3 APC＞ p catenin和 c myc蛋白在大肠癌中表达的相关性 见表3。表3 APC、|3 catenin和c myc 蛋白在大肠癌中表达的相关性注catenin异位表达与c myc阳性表达呈 正相关，r0.63； Ap catenin异位表达与APC阳性表达呈负相关，r-0.39 3讨论 Wnt信号传导通路是调控细胞生长、发育和分化的重要通路，其异常激活 与肿瘤的发生密切相关［2］,而E cadherin/p catenin复合体是介导同型细胞间 黏附的连接复合体，其在维持正常上皮的极性和完整性中起重要作用，肿瘤细胞 间黏附的丧失是肿瘤侵袭、转移的关键。P catenin是一个多功能蛋白，它在介 导Wnt信号传