鲤鱼汤对大鼠心肌缺血再灌注后肾脏损害探究

鲤鱼汤对大鼠心肌缺血再灌注后肾脏损害 探究 ［摘要］目的观察鲤鱼汤对大鼠心肌缺血再灌注损伤后 肾脏损害的影响，并探讨其作用机制。方法Wistar大鼠 50只，随机分为对照组（10只）、模型组（20只）、治疗组 （20只），鲤鱼汤治疗组给予鲤鱼汤灌胃，每天1次，连续 15 d,对照组及模型组则给予0.9氯化钠溶液灌胃。利用冠 状动脉结扎法建立大鼠的心肌缺血再灌注损伤模型，检测相 关生化指标；光镜下观察心、肾的病理变化；ELISA方法检 测血清中炎性因子白介素-2 （IL-2）、Y干扰素（IFN- Y ） 的浓度。结果与对照组相比较，模型组血清中肌酸激酶 （CK）、IL-2、IFN-Y明显升高（P0. 05）,而内生肌酎清 除率（Ccr）明显降低（P 0.01）,血尿素氮（BUN）、血肌 W （SCr）未见明显变化；与模型组相比较，治疗组血清中 CK、IL-2、IFN-Y 明显降低（P 0.05）, Ccr 明显升高（P O.ODo结论 大鼠心肌缺血再灌注损伤对肾脏造成轻微 损害，而鲤鱼汤对肾损害具有保护作用，其机制可能与抑制 炎性因子IL-2、IFN-Y有关。 ［关键词］心肌再灌注损伤；鲤鱼汤；肾脏损害；IL-2； IFN-Y ［中图分类号］R543. 3 ［文献标识码］A ［文章编号］ 1674-4721 2012 12 c -0012-03 大量的临床研究表明常见的缺血性心脏病、高血压、感 染性心内膜炎等疾病均可造成严重的肾脏损害，而大多数肾 病患者均伴有高血压、心功能不全等心血管疾病，表明心血 管疾病与肾脏疾病存在着密切的关系［1］。近年来的研究显 示源于鱼蛋白的一些小分子肽不被肠道多种酶系降解，可 直接被人体吸收从而发挥降血压、降血脂、调节免疫等作用。 有学者从鲤酶解物中提取出血管紧张素转化酶抑制肽、抗氧 化活性肽及具有抗炎、抗菌等作用的糖脂类生物活性肽［2］。 故本实验在建立了大鼠心肌缺血再灌注损伤模型后，通过观 察鲤鱼汤对大鼠心肌缺血再灌注损伤后肾脏损害的影响，探 讨其可能的作用机制，以期为临床治疗心血管疾病肾损害提 供研究基础。 1材料与方法 1. 1实验动物 健康7周龄雄性Wistar大鼠50只，体重210 20 g, SPF级，由青岛市药检所动物中心提供。将大鼠随机分为正 常对照组10只、模型组20只和治疗组20只。 1.2鲤鱼汤的制备 鲤鱼汤野生黄河鲤，购于青岛产芝水库。除去鱼腮肠 杂，剔除夹脊白筋，留鳞。水鱼重量比4 lo武火煎煮至沸, 后文火煎煮90 min,期间搅拌助鱼肉分离。滤除鱼汤，二次 煎煮前擂碎鱼渣，余同前。2次鱼汤混匀，低温超滤浓缩至 250 （即 1 mL 含鲤鱼 2. 5 g）和 500 （1 mL 含鲤鱼 5 g）。 聚乙烯食品级塑料袋分装密封，置于-20C冰箱备用，使用 前1 h水浴箱37C加热。 1. 3大鼠心肌缺血再灌注模型的制备 造模方法参考文献［3］并加以改进，模型组和治疗组大 鼠麻醉后暴露心脏，结扎冠状动脉前降支，将一根直径2 mm 塑料管置于结扎线与冠状动脉之间，塑料管压迫引起冠状动 脉闭塞，造成急性心肌缺血。缺血35 min后抽去塑料管， 再灌注100 mirio 1. 4给药方法 1. 5检测指标 1.5. 1酶联免疫吸附法检测IL-2、IFN-Y取大鼠血清 及标准液各50 L加入酶标板，37C孵育30 min；每孔加酶 标抗体50 L, 37C孵育30 min。洗涤5次加底物显色；终 止反应后，酶标仪测0D值。 1.5.2血清生化指标实验第15天，以10水合氯醛3 mL/kg腹腔麻醉，心脏穿刺采血，37C恒温水浴箱中静置30 min后，3 000 r/min,离心10 min取上清液。日立7170全 自动生化分析仪检测血清肌酎（SCr）、尿素氮（BUN）等。 1.5.3组织学观察 应用苏木精-伊红染色方法，观察心 肌组织及肾脏的形态学改变情况。 1. 6统计学处理 2结果 2.1心肌和肾脏组织形态学变化 3讨论 心肌缺血再灌注损伤是指缺血的心肌细胞在恢复血供 后引起的更为严重的损害。有学者证实［4］,心肌损害后可 以大大增加肾脏受损的概率，在心肌有明显损害患者的血清 中，其肌酎水平大多数明显升高并且随着病情的进展而加 重。Richard PE Van D等［5］的研究表明，急性心肌梗死的 大鼠其肾功能明显受损，认为主要是由于在肾脏内发生了炎 性反应所导致的结果。现代研究表明，鲤鱼汤具有抑制炎性 反应、抗氧化、参与免疫调节等功能［6］。本实验即基于以 上研究结果而设计的。 IL-2、IFN-Y是机体免疫网络中重要的细胞因子，在免 疫调节中起到了关键的作用。IL-2属于抗炎因子，在机体内 可刺激NK细胞增殖和分化，从而杀灭微生物［8-9］ ； IFN-Y 是细胞免疫的效应因子，能促进TH1细胞的增殖，同时也是 CD8 T细胞发挥作用的重要方式［10-12］ o本实验结果表明， 与对照组相比，模型组血清中IL-2. IFN-Y明显升高，结 合肾脏本身的发生的病理反应，说明在心肌缺血再灌注后已 经造成的肾损伤可能与炎性反应有关。而治疗组血清中 IL-2. IFN-Y明显降低，由此可以认为，鲤鱼汤可通过降低 IL-2、IFN-y的浓度发挥其抗炎作用，这也可能是其肾保护 作用机制之一。 综上所述，本实验证实了鲤鱼汤对大鼠心肌缺血再灌注 损伤后肾损害具有保护作用，其机制可能与抑制炎性因子 IL-2、IFN-y有关，为鲤鱼汤的临床应用提供了一定的理论 基础。 [参考文献] [1] 杜金行，曹迎.心肾疾病相关性临床研究进展[J]. 中西医结合心脑血管病杂志，2007, 5 9 856-858. [2] 曹东旭，杨书文，刘娟娟，等.鲤鱼头中糖脂类活 性物质的提取分离及抗肿瘤活性研究[J].食品科学，2009, 30 13 245-249.[3]刘艳伟，刘水平，成建定，等. 大鼠心肌缺血再灌注模型的改进及心电图判断指标[J].实 用儿科临床杂志，2007, 22 7 525-527. [4] Hillege HL , Janssen WM , Bak AA , et al. Microalbuminuria is common , also in a nondiabetic nonhypertensive population , and an independent indicator of cardiovascular risk factors and cardiovascular morbidity [J]. J Intern Med, 2001, 249 519-526. [5] Richard PE Van D, Wouter BA, et al. Myocardial infarction enhances progressive renal damage in an experimental model for cardio-renal interaction[J]. J Am Soc Neph