基因工程制药复习提纲答案

名词解释 1. 基因工程基因工程是值在体外合成或重组特定的DNA,再与载体连接，最后导入到宿 主细胞内表达、扩增出人们需要的蛋白质，而且使这种性状可遗传给后代的技术。包括 上游技术和下游技术。 2. 基因工程制药基因工程制药是通过基因工程的方法生产药物，具体包括获得目的基因、 构建重组质粒、构建基因工程菌、培养工程菌、产物分离纯化、产品加工检验等步骤。 3. 逆转录逆转录reverse transcription是某些RNA病毒由逆转录酶直接利用RNA为模 板合成DNA的过程。 4. CDNA以生物细胞的mRNA为模板，在逆转录酶的作用下合成cDNA的第一条链，然后 在合成双链DNA,并将合成的cDNA双链重组到质粒载体或噬菌体载体上，倒入宿主细 胞进行增殖。在这个过程中合成的双链DNA叫做cDNAo 5. 引物引物是人工合成的单链DNA小片段，碱基顺序分别与所要扩增的模板DNA双链的 5端相同。是PCR的起始点。 6. 表达载体所谓表达载体expression vector是指具有宿主细胞基因表达所需的调节控制 序列，能使外源基因在宿主细胞内转录和翻译的载体。 7. 克隆载体克隆载体cloning vector是把一个有用的制药DNA片段通过重组DNA技术， 送进受体细胞中进行繁殖的工具。 8. 载体 载体vector,指在基因工程重组DNA技术中将DNA片段目的基因转移至 受体细胞的一种能自我复制的DNA分子。 9. 报告基因载体分子上有一种特殊意义的基因序列，它们表达的目的是为了证明载体已经 进入宿主细胞，并将含有外源基因的宿主细胞从其他细胞中区分并挑选出来。这种基因 就是报告基因。 10. 启动子启动子是位于结构基因5,端上游的DNA序列，能被RNA聚合酶识别并结合，具 有转录起始的特异性 11. PCR聚合酶链式反应是一种体外放大扩增特定DNA片段的分子生物学技术，它主要包括 变性、退火、延伸三个过程，并且多次循环。 12. 包涵体包涵体inclusion body是存在于细胞质中的一种不可溶的蛋白质聚集折叠而 形成的晶体结构物。通常包涵体虽然具有正确的氨基酸序列，但是空间结构却是错误的。 13. 蛋白表达系统蛋白表达系统是指由宿主、外源基因、载体和辅助成分组成的体系，通过 这个体系实现外源基因在宿主细胞中表达的目的。 14. 单克隆抗体由单一 B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，称为 单克隆抗体。 15. 基因工程抗体 基因工程抗体就是按不同的目的和需求，对抗体基因进行加工、改造和 重新装配，然后导入适当的受体细胞中表达得到的抗体分子。 16. 改形抗体改性抗体reshaped antibody,RAb是指利用基因工程技术，将人抗体可变区 V中互补决定簇序列改换成鼠源单抗互补决定簇。重构成既具有鼠源性单抗的特异 性又保持抗体亲和力的人源化抗体。 17. 嵌合抗体在基因水平上将鼠源单克隆抗体可变区和人抗体恒定区连接起来并在合适的 宿主细胞中表达，这种抗体叫做嵌合抗体chimeric antibody。 18. 镶面抗体将鼠源单抗可变区中氨基酸残基改造成人源的，消除了异源性且不影响可变区 的整体空间构象。 19. 单链抗体单链抗体single chain antibody fragment, scFv,是由抗体重链可变区和轻链 可变区通过15〜20个氨基酸的短肽linker连接而成。scFv能较好地保留其对抗原的亲 和活性，并具有分子量小、穿透力强和抗原性弱等特点。 20. 双特异性抗体双特异性抗体bispecific antibody,BsAb是指具有两种抗原结合特性的抗体 21. 展示技术 是在基因或突变体文库中选择有用的基因或突变体的一种高通量的筛选方法，该技术的特点 是利用筛选基因的表型和基因型密切相连的特性，通过筛选表型而获得基因型 22. 重组蛋白药物的复制 对专利期满的重组蛋白药物进行复制生产 23. 易错PCR 易错PCR是指通过改变PCR反应条件来调整PCR反应中的突变频率，降低聚合酶固有的突 变序列的倾向性，提高突变谱的多样性，使得错误碱基随机地以一定的频率掺入到扩增的基 因中，从而得到随机突变的DNA群体，最后用合适的载体克隆突变基因。 24. Gene 改组 DNA改组是指DNA分子的体外重组，是基因在分子水平上进行有性重组sexual recombinationo通过改变单个基因或基因家族，gene family原有的核昔酸序列，创造新基 因，并赋予表达产物以新功能。 25. 盒式诱变 是一种定点突变技术，将目的基因的一段DNA删掉，并用人工化学合成所具有的突变核昔 酸的双链寡核昔酸片段取代，产生相应的突变体。 26. 大引物诱变法 一种简单的PCR定点诱变法，是以第一轮PCR扩增产物作为第二轮PCR扩增的大引物，只 需三种扩增引物进行两轮PCR反应，即可获得突变体DNA 27. 基因工程疫苗 使用DNA重组生物技术，把天然的或人工合成的遗传物质定向插入细菌、酵母菌或哺乳动 物细胞中，使之充分表达，经纯化后而制得的疫苗。 28. 新型疫苗 新型疫苗是采用生物化学合成技术、人工变异技术、分子微生物学技术、基因工程技术等现 代生物技术制造出的疫苗，是近年来新发展的疫苗。其有别于传统常规疫苗。包括基因工程 亚单位疫苗、重组疫苗、合成肽疫苗、基因工程载体疫苗、核酸疫苗和抗独特型抗体疫苗等。 29. 灭活疫苗 灭活疫苗是先对病毒或细菌培养，然后用加热或化学剂通常是福尔马林将其灭活使其失 去致病力，但仍保留免疫原性而制成的生物制剂 30. 弱毒疫苗 弱毒疫苗，是一种病原致病力减弱但仍具有活力的完整病原疫苗，也就是用人工致弱或自然 筛选的弱毒株，经培养后制备的疫苗。 31. 合成多肽疫苗 用化学手段合成病原微生物的保护性多肽活表位并将其连接到大分子载体上，再加入佐剂制 成的疫苗。 32. 基因缺失疫苗 用基因工程技术将病毒或细菌的致病性基因进行缺失，从而获得弱毒株活疫苗。 33. 亚单位疫苗 指除去病原体中无免疫保护作用的有害成分，保留其有效的免疫原成分制成疫苗。 34. 重组活载体疫苗 用基因工程技术将病毒或细菌构建成一个载体，把外源保护性抗原基因插入其中使之表达的 活疫苗。 35. 反向遗传操作 与经典的从表型改变到进行基因特征研究的思路相反，是指通过构建RNA病毒的感染性分 子克隆，在病毒CDNA分子水平上对其进行体外人工操作 36. 基因疫苗 基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码某种抗原蛋白的外源基因插入到含真核表达系统的质 粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达合成抗原蛋白，诱导机体 产生免疫应答。 37. 核酸疫苗 核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA ）直接导入动物体细胞内，并通 过宿主细胞的表达系统合成抗原蛋白，诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答，以达到预 防和治疗疾病的目的 38. 肿瘤疫苗 是通过激活患者自身免疫系统，