和络舒肝片质量标准研究

和络舒肝片质量标准研究 【摘要】目的研究和络舒肝片的质量控制方法。方法 采用薄层 色谱法对制剂中莪术与当归进行定性鉴别，并用高效液相色谱法对芍 药昔进行含量测定。结果薄层色谱中均能检出莪术与当归，方法专属 性强。芍药昔在0. 020 7〜0.207 ug浓度范围内线性关系良好r 0. 999 8,平均加样回收率为99. 20n 5,RSD0. 71。结论 所建 立的鉴别方法专属性强，定量方法简便、准确，可用于和络舒肝片的质 量控制。 【关键词】和络舒肝片；莪术；当归；芍药昔；薄层色谱法；高 效液相色谱法 Abstract Objective To establish the quality standard of Heluoshugan Tablets. Rhizoma curcumae and Radix angelicae sinensis were identified by TLC. The content of Paeoniflorin was determined by HPLC. Result Rhizoma curcumae and Radix angelicae sinensis were identified qualitatively by TLC. The linear range of Paeoniflorin was 0. 020 7〜0. 207 u g r 0. 999 8. The average recovery was 99. 20 n5, RSD 0. 71. Conclusion The established standard is suitable for the quality control of Heluoshugan Tablets. Key words Heluoshugan Tablets； Rhizoma curcumae； Radix angelicae sinensis； Paeoniflorin； TLC； HPLC 和络舒肝片是由白芍、莪术、当归、白术（炒）等组成的复方中药 制剂，具有舒肝理气、清化湿热、活血化瘀、滋养肝肾的功效。为有效 控制该制剂质量，在参考文献［1-2］的基础上，笔者对莪术与当归进行 了薄层定性鉴别，并采用高效液相色谱法对方中君药白芍中的有效成 分芍药昔进行了含量测定。 1仪器与试药 LC2010AT高效液相色谱仪（日本岛津公司）；色谱柱Kromasil C18（5 um, 250 mm X 4. 6 mm）； HT-230A 型柱温箱；6010 型紫外分光光 度计（日本岛津公司）；N2010色谱工作站（浙江大学）；BP160P电子天 平（北京赛多利斯天平有限公司）;CQ250超声波清洗器（上海必能信超 声有限公司）；石英亚沸纯水器（江苏金坛环宇科学仪器设备厂）；硅胶 G薄层板（青岛市化学工业研究所）o芍药昔对照品（购于中国药品生物 制品检定所，批号110736-200325）；莪术、当归对照药材购于中国药 品生物制品检定所。甲醇为色谱纯,水为重蒸水;其他试剂均为分析纯。 2薄层色谱鉴别 2. 1莪术 取本品5 g,加正己烷15 mL,超声处理5 min,滤过，取滤液作为 供试品溶液。按处方比例制成缺莪术的片剂，同供试品溶液的制备方法 制得阴性对照液。取莪术对照药材1 g,加正己烷15 mL,超声处理5 min, 滤过,取滤液作为对照药材溶液。 吸取上述3种溶液各10 U L,分别点于同一硅胶G薄层板上，以 石油醍60〜90 C-乙酸乙酯15 1为展开剂，展开，取出，晾干，喷 以5香草醛硫酸溶液。供试品色谱中，在与莪术对照药材色谱相应的 位置上显相同颜色的斑点，阴性对照液无此斑点。 2.2当归 取本品5 g,研细，加乙醍10 mL,超声处理5 min,滤过，滤液挥去 乙酷，残渣加乙酸乙酯0. 5 mL使溶解，作为供试品溶液。按处方比例制 成缺当归的片剂，同供试品溶液的制备方法制得阴性对照液。取当归对 照药材1 g,加乙醍10 mL,超声处理5 min,滤过,滤液挥去乙醍，残渣 加乙酸乙酯2 mL使溶解，作为对照药材溶液。 吸取上述阴性对照溶液和供试品溶液各5 uL,对照药材溶液2 UL,分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-三氯甲烷1 1为展开剂, 展开，取出，晾干，置紫外光灯365 nm下检视。供试品色谱中，在与当 归对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照液无 此斑点。 3芍药昔含量测定 3.1色谱条件及系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，甲醇-水-冰醋酸30 70 0. 5为流动相，检测波长为230 nm,柱温35 C,理论塔板数按芍药昔峰 计算应不低于2 000o 3.2对照品溶液的制备 精密称取在110 C干燥至恒重的芍药昔对照品7. 02 mg,置100 mL量瓶中，加70甲醇溶解并定容至刻度,再精密量取此储备液1 mL, 置10 mL量瓶中，加70甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1 mL含7. 02 u g的溶液，即得。 3. 3供试品溶液的制备 取本品20片，精密称定，研细，混匀，取粉末约0.4 g,精密称定, 置量瓶中，精密加70甲醇50 mL,称定重量，超声处理（功率160 W,频 率40 kHz） 60 min,放冷，用70甲醇补足减少的质量，摇匀，滤过，取续 滤液,即得。 3. 4阴性对照溶液的制备 按处方比例制备缺白芍的阴性对照品，按“3. 3”项下方法制备阴 性对照溶液。3. 5干扰试验 取阴性对照样品溶液、对照品溶液、供试品溶液各10 UL,在上 述拟定的色谱条件下分别进样，测得阴性对照溶液、对照品溶液、供试 品溶液的色谱图，见图lo结果在与芍药昔相同保留时间处，供试品溶 液出现芍药昔色谱峰，阴性对照品无该色谱峰出现，表明阴性对照无干 扰。 3. 6线性关系考察 取芍药昔对照品约10 mg,精密称定，置100 mL量瓶中，用70甲 醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取2.0、5.0、8.0、10.0、20.0 mL, 置100 mL量瓶中，用70甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精 密量取上述供试品溶液各10 UL,分别注入液相色谱仪，记录色谱图。 以对照品进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，按最小二乘法计算回归方 程和相关系数。得回归方程Y27 398X-503. 4, r 0. 999 8。结果 表明，芍药昔在0. 020 7〜0.207 ug范围内呈良好的线性关系。 3. 7精密度试验 精密吸取同一芍药昔对照品溶液10 uL注入液相色谱仪，连续 进样5次,测定峰面积。结果RSD 0. 34,表明仪器精密度良好。 3. 8稳定性试验 取同一份供试品溶液，分别于0、2、4、6、8 h进样10 Li L,记 录色谱图,测定峰面积。结果RSD 0. 16,表明供试品溶液在8h内稳 定性良好。 3. 9重复性试验 取同批样品5份，分别制备供试品溶液,进