脑膜瘤mmps和timps的表达意义

脑膜瘤MMPs和TIMPs的表达意义 作者吴茂春，袁先厚，文志华，江普查 【关键词】脑膜瘤 [Abstract] AIM To investigate the relationship between expression of MMP2, MMP 9, TIMP1, TIMP2 in meningiomas and their brain invision. S The protein expression of MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 was detected by immunohistochemistry and the mRNA expression of MMP2, MMP9 was detected by in situ hybridization in 45 patients with meningiomas. RESULTS The positive rates of the expression of MMP2, MMP9 were 90. 09/10, 90. 09/10 in brain invasive group and 40.014/35, 42.915/35 in nonbrain invasive group respectively, and the positive rates of the expression of MMP2, MMP9 were significantly higher in brain invasive,atypical, malignant tumors than that of nonbrain invasive, benign tumors Plt；0.05. The expr ession levels of TIMP1, TIMP2 were no significantly different in all tumors Pgt；0. 05. CONCLUSION The expression of MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 are critical to brain invasive of meningiomas. [Keywords] meningiomas； matrix metalloproteinase MMP； tissue inhibitors of metalloproteinase TIMP； immunohistochemistry； in situ hybridization 【摘要】目的研究基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9 matrix metalloproteinase, MMP2, MMP9及其特异性抑制剂金属 蛋白酶组织抑制剂1和金属蛋白酶组织抑制剂2 tissue inhibitor of metalloproteinase, TIMP1, TIMP2在脑膜瘤组织中的表达及其 与肿瘤脑浸润，病理性质的关系.方法用原位杂交法检测45例脑 膜瘤组织中MMP2, MMP9 mRNA的表达；用免疫组化检测MMP2, MMP9, TIMP1和TIMP2蛋白的表达.结果有脑浸润的脑膜瘤MMP2, MMP9 的表达阳性率较无脑浸润的脑膜瘤明显增高Plt；0.05；非典型性 及恶性脑膜瘤较良性脑膜瘤高表达MMP2, MMP9 Plt；0. 05； TIMP1, TIMP2的表达在各肿瘤中差异无显著意义Pgt；0. 05.结论MMP2, MMP9, TIMP1和TIMP2对脑膜瘤的脑浸润有重要影响. 【关键词】脑膜瘤；基质金属蛋白酶；基质金属蛋白酶组织 抑制剂；免疫组化；原位杂交 0引言 脑浸润是脑膜瘤重要的生物学特征，肿瘤组织产生的多种蛋白 酶对细胞外基质extracellular matrix和基底膜的降解是肿瘤浸 润和转移的首要条件[1,2] . MMP2和MMP9是最重要的基质蛋白酶 [3],TIMP1和TIMP2是MMPs的组织抑制剂[2,4].系统地研究MMPs 和TIMPs在脑膜瘤中的表达及其与脑浸润的关系，较少.我们应用免 疫组化和mRNA原位杂交法检测脑膜瘤组织中MMP2, MMP9, TIMP1和 TIMP2的表达，并探讨这些酶的表达与该肿瘤脑浸润的关系. 1材料和方法 1. 1材料199603/200106武汉大学中南医院神经外科手术切除 的脑膜瘤标本45 （男21,女24）例，年龄15〜68 （中位38）岁.按 1993年WHO关于神经系统肿瘤的分类标准良性32例，非典型性5 例，恶性8例.肿瘤组织用40 g12539；L-l甲醛固定，石蜡包埋， 连续切片，用于原位杂交实验的切片厚约6 uni,免疫组化实验的切 片厚约4 nm. MMP2原位杂交试剂盒及MMP9探针由武汉博士德生物 公司提供；鼠抗人MMP2, MMP9 mAb及SP免疫组化试剂盒，DAB显色 试剂盒由北京中山生物公司提供；鼠抗人TIMP1, TIMP2, GFAP mAb 购自福建迈新生物公司.脑浸润用以下标准判定［5］①有肿瘤脑 界面的HE染色片发现肿瘤组织浸入脑组织；② 受浸脑组织中有胶质 细胞增生和神经元降解；③石蜡切片GFAP （胶质纤维酸性蛋白）免 疫组化染色显示阳性.以上任一标准阳性即认为肿瘤有脑浸润性. 1.2方法4 Pm厚石蜡切片按免疫组化SP法常规操作技术进 行处理，DAB显色，苏木素复染，常规脱水，透明，封片.阳性对照 用已知阳性片，阴性对照用PBS替代一抗.原位杂交用地高辛标记 MMP2, MMP9多相寡核昔酸探针与脑膜瘤组织进行原位杂交，经预杂 交，杂交后，按试剂盒说明进行，加入标记生物素的抗地高辛抗体， 进行显色反应，梯度乙醇脱水，透明封片.肿瘤细胞及少数间质细胞 胞质内呈棕黄色颗粒为阳性.判断方法根据棕色反应的强度及面积 综合评判.每张切片的阳性细胞的阳性强度按无着色、淡黄色、棕黄 色和棕褐色分别记分0, 1, 2和3分；着色阳性面积按无着色、着色 小于1/3, 1/3〜2/3,大于1/3分别记分0, 1, 2, 3分.根据两项记 分之和判断结果大于等于3分为阳性. 统计学处理采用x 2检验，Plt；0. 05为有显著性差异. 2结果 2. 1组织学类型与脑膜瘤浸润性GFAP应在正常或肿瘤性星形 胶质细胞胞质表达，而本组45例脑膜瘤中有10例呈阳性（Fig 1）, 总脑浸润率为22.非典型性与恶性脑膜瘤的脑浸润率分别为40 （2/5）88 （7/8）,明显高于良性脑膜瘤的脑浸润率3（1/32）,两 者比较差异显著（Plt；0.05,）. 2. 2 MMPs, TIMPs 的表达 MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 蛋白表 达在肿瘤细胞和少量间质细胞胞质内（Fig 2, 3）.统计结果显示， 有脑浸润的脑膜瘤组织MMP2, MMP9表达阳性率较无脑浸润的脑膜瘤 高（Plt；0. 05）；非典型性及恶性脑膜瘤MMP2, MMP9表达阳性率较 良性