腺苷脱氨酶检测作业指导书

腺昔脱氨酶检测作业指导书 1检验目的 规范腺昔脱氨酶ADA检测试验，确保检测结果准确 性和重复性。 2测定方法 酶法。 3检测原理 ADA酶解腺昔Adenosine脱氨产生肌昔；再通过噤吟核 昔磷酸化酶PNP的作用，生成次黄嚎吟Hypoxanthine； 后者在黄噤吟氧化酶X0D氧化下生成尿酸Uric Acid和过 氧化氢H202；最后在过氧化物酶POD的作用下H202再 与 N-Ethyl-N-2-hydroxy-3-sulfopropyl-3-methylaniline EHSPT 4-氨基安替比林4-aminoantipyrine, 4AA反应， 生成紫红色的有色醍Quinone dye。通过动态测量有色酶 在550nm处吸光度上升的速度来测算ADA的活性。 4样本 血清、胸腹水、脑积液等；处理方法见生化标本采集程 序。 血清在2〜8 C下可稳定一周。 5仪器和试剂 5. 1仪器美国贝克曼-库尔特DXC800、AU58U全自动 生化仪。 5.2试剂由生之源公司、利德曼公司提供试剂（详见 试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。 5.3校准物Rodan混合校准品，符合WHO标准，贮存、 准备严格遵照其说明书。 5.4质控物Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO 标准，贮存、准备严格遵照说明书。 6校准 6.1仪器校准每年由该仪器维修工程师参照厂方的技 术规范对仪器进行一次校准。 6.2项目校准试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批 号更换后；由质控结果随时决定。 7操作步骤 上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操 作程序。 8参考范围 0〜20U/L。 9警告/危急值 未规定。 10性能指标 10. 1 线形上限△A/min 为 0. 40, 200U/L。 10.2精密度批内、批间CV分别为5. 2、6. 3o 10. 3准确度不准确度＜5o 10.4试剂贮存密闭避光贮存2〜8C可稳定12个月。 11干扰因素及变异的潜在来源 11. 1 胆红素＞340umol/L,葡萄糖＞55mmol/L,尿酸〉 3mmol/L,维生素〉1. 14mmol/L可引起干扰。重金属离子对 ADA有抑制作用。 11.2严重溶血可影响结果。 11.3标本中的LDH、丙酮酸及氨等物质可与试剂中的 DADH发生反应。这些物质必须在预孵育期间内完全消除。 11. 4高脂、黄疸标本对本测定有干扰；中、重度溶血 标本请通知病区重新抽血。 11.5样本采集后应尽快分离测定。试剂需要每天做空 白定标。 12临床意义 ADA活性是反映肝损伤的敏感指标，与ALT或GGT等组 成肝谱可较全面的反应肝脏病的酶学改变。 12. 1血清ADA活力升高常见于肝炎、肝硬化、血色 素沉着症、肿瘤引起的阻塞性黄疸、前列腺和膀胱癌、溶血 性贫血、风湿热、伤寒、痛风、重症地中海贫血、骨髓性白 血病、结核、自身免疫性疾病，传单、心力衰竭等。 12.2良恶性肿瘤的鉴别诊断ADA对良恶性肿瘤有很高 的鉴别诊断价值，结核性胸腹水ADA活性显著增高，癌性腹 水不增高。 12.3中枢神经系统疾病的诊断与鉴别诊断结核性脑 膜炎显著增高，病毒性脑膜炎不增高，颅内肿瘤及中枢神经 系统白血病稍高。