非结合雌三醇（游离雌三醇）测定（uE3）测定标准操作规程

非结合雌三醇（游离雌三醇）测定（uE3）测定标准操作规 程 1检验目的 规范本实验室的检验操作，确保非结合雌三醇（游离雌 三醇）测定3E3）检测结果及报告的准确性、可靠性和有 效性。 2标本采集与处理 2. 1标本采集 2. 1. 1常规静脉采血约2ml,不抗凝，置普通试管中。 或采用含分离胶的真空采血管。也可采集血浆标本，用肝或 EDTA抗凝。 2. 1. 2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标 识符（条码）。 2. 1. 3急诊标本米集后，在检验申请单上填写标本米集 时间。 2. 1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验 科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本 予以拒收。 2. 1. 5下列标本为不合格标本 2. 1. 5. 1标本量不足少于0. 3ml的全血标本，或少于 0. 1ml的血清或血浆。 2. 1. 5. 2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、 严重浑浊的标本。 2. 1. 5. 3无法确认标本与申请单对应关系的。 2. 1. 5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。 2. 2标本保存 2. 2. 1接收标本后在60min内将标本离心分离出血浆, 避免溶血。离心必须达到4000rpmX15min,离心后的血清中 不能含有颗粒物或微量纤维蛋白。 2.2.2标本保存时间室温15〜25C下可稳定8h, 普通冰箱中2-8C稳定2d,在-20C最多可保存4周。 避免反复冻融。 2. 2. 3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4-8C 冰箱内保存7do 2. 3标本米集的注意事项 2. 3. 1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动, 早上或上午采血。 3方法原理 采用竞争性酶联免疫发光分析法。标本中的uE3与ALP 标记的uE3竞争结合抗uE3 McAb-抗体。结果抗原抗体复合 物与固化的结合蛋白结合，经磁性分离，洗涤洗去未结合的 物质，加入化学发光底物Lumi-Phos 530,测量反应产生的 光，光子的量与标本中uE3的浓度成反比，由多点校准曲线 求得标本中总uE3的浓度。 4试剂及其他用品 4. 1试剂Access游离雌三醇测定试剂包，由美国 BECKMAN COULTER公司出品，试剂盒产品号33570。未打开 的试剂包保存于2-8C可稳定至有效期，不可冻存。开启的 试剂包载入系统中可使用28do 4. 2试剂盒组分 4. 2. 1微粒子包被珠包被了羊抗鼠IgG的磁性微粒子、 含BSA的Tris缓冲液。 4. 2.2鼠抗uE3抗体,Tris缓冲液。 4. 2.3液体试剂碱性磷酸酶标记的雌三醇。 4. 2.4试剂包即开即用，无须特殊准备。 4.3其他试剂与用品 4. 3. 1化学发光底物ACCESS的通用发光剂底物液，Cat. No. 81906o 4. 3.2清洗缓冲液、反应杯等。 5校准品与校准模式 5. 1校准品采用Access专用配套游离雌三醇校准液， Cat. No. 33575, 5个浓度。有校准卡片。 5.2校准类型和校准点数目非线性模式，6个校准点。 仪器根据校准曲线卡片数据（6参数对数拟合曲线）自动建立 校准曲线。 5.3校准周期在同一批号试剂使用期间校准曲线有 效，但在间隔28d后需要重新校准。每次完成维修保养程序 后或质控失控时，也要重新校准。 5.4校准液重建方法液态校准液，即开即用。校准液 开启后于2〜8C保存最长不超过13周，或于-20C保存13 周。避免反复冻融。 6质控品与室内质控规则 6. 1质控品米用E3质控品或米用自备混合血清。 6.2质控液重建方法液态质控液，即开即用，充分颠 倒混匀，无需特殊准备。 6.3质控品测定在每一批标本中测定质控血清一次。 6.4质控规则采用L-J质控图，以3s为失控限。标 准差由本室实验数据得出。 6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各 种有效的纠正措施及时纠正，并在确认重新回复到控制状态 后开始标本检测。 7适用仪器美国BECKMAN COULTER公司的DXI 800自 动发光免疫分析仪。 8标本检测步骤 装载试剂一进行校准一进行质控一输入标本检 测项目一加载标本一标本测定一结果复核一报告。 9主要分析参数 无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试 剂条码的信息自动进行分析。 10结果计算 仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结 果单位以ng/mL表示。 11检验结果的报告及范围 11.1结果的报告 11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。 11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报 告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的 医学信息。 11. 1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也 在报告单上指出。 11.2报告范围 0. 02〜6. 9 ng/mL超过此范围的结果报告时必须附有证 明该结果准确可靠的文字说明，例如系根据标本重新稀释 后重复测定的结果。 12操作性能 12. 1精密度批内CV 1. 4〜6. 1；批间CV 3. 2〜7. 7。 12.2 分析范围0. 02-6.9 ng/ml。 12.3分析灵敏度0. 02 ng/ml o 12.4方法的有限性及干扰因素与雌二醇、雌激素酮、 葡萄糖昔-雌二醇、5 a -二氢-睾酮和睾酮等无明显交叉反应 性。甘油三脂36. Immol/L.血红蛋白1.3g/L或胆红 素0. 17nmol/L时对试验的干扰少于5。 13参考范围及医学决定水平 妊娠＞40周 19.3〜30 ng/mlo 38〜40周 17. 725. 4 ng/mlo 36〜38周 16. 723. 7 ng/mlo 32〜36周 9. 3〜13. 7 ng/ml。 28〜32周 7. 48. 5 ng/ml o 26〜28周 14临床意义 4. 1 〜7. 6 ng/ml o 14.1母体的游离雌三醇大部分由胎儿肝脏和胎盘分 泌。 14. 2游离雌三醇占母体血液循环雌三醇的10,血清中 游离雌三醇的浓度是监测胎儿状况和胎盘功能的敏感指标。 15结果审核以及分析与相关项目的联系 15. 1由资深专业人员负责检验结果的审核。 15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结 果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。 15.3相关项目审核与其他女性激素等的关系，如出 现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。 16有关引用程序与文件 16. 1 DXI 800自动发光免疫分析仪仪器标准操作规程。 16.2免疫检验室内质控标准操作程序。 16. 3检验结果审核程序。 16.4标本送检和接收程序。