食用玫瑰生物类黄酮提取工艺探究

食用玫瑰生物类黄酮提取工艺探究 【摘要】本论文对食用玫瑰花中的生物类黄酮的提取 工艺进行研究，并通过一系列的乙醇提取单因素实验和正交 实验，得到了食用玫瑰黄酮提取的最佳工艺，即固液比120, pH值为7.80的乙醇浓度为70,温度为80C,提取时间 120mino为食用玫瑰工业化的生产研究提供理论基础。 【关键词】食用玫瑰 黄酮 提取 前言 玫瑰，学名Rosa rugosa,别名红玫瑰、梅槐、刺玫瑰， 蔷薇科，蔷薇属，落叶直立灌木。食用玫瑰中含有丰富的黄 酮类化合物，黄酮类化合物作为一种功能成分，具有增强心 血管功能、抗肿瘤、增强免疫力、延缓衰老等作用。在国外, 近年来对黄酮类化合物的研究开发十分活跃，但在国内保 健食品生产中开发较多的只有银杏黄酮、山楂黄酮、茶叶黄 酮等［1］。 本论文以食用玫瑰为研究对象，对食用玫瑰中生物类黄 酮的提取工艺进行初步的研究和评价，希望我们的研究能为 进一开发天然高效食品抗氧化剂、食品添加剂、研制功能性 食品及开发医药材料提供理论指导。 1. 实验材料、主要药品、仪器及实验方法 1. 1实验材料 玫瑰花本研究所采用的实验材料为新鲜的食用玫瑰花 1.2实验主要仪器设备 索氏抽提器，电子分析天平，紫外可见分光光度计，旋 转蒸发仪，高速离心机，真空泵，恒温循环水箱，电热干燥 箱，恒温搅拌循环水浴锅，PHS-2S酸度计，酒精度计等。 1.3实验主要试剂 芦丁、没食子酸、棚皮素标样；乙醍、乙酸乙酯、丙酮、 无水乙醇、冰乙酸柠檬酸、氢氧化钠、氢氧化钙、三氯化铝、 亚硝酸钠、硝酸铝以上均为分析纯； 1. 4食用玫瑰黄酮的测定方法 采用比色法[2], A1C13与黄酮类物质作用后，生成黄 酮得到黄色铝络合物。 1. 5食用玫瑰花黄酮提取工艺的研究[3] 1.5. 1黄酮提取单因素实验[4] 1 提取方法筛选试验 ① 乙醇索氏抽提法 准确称取5.00克玫瑰粉，用滤纸包好放入索氏抽提器 中，加入100mL95乙醇90C抽提lh,定容，测定黄酮萃取 率。 ② 丙酮浸提法 准确称取5.00克玫瑰粉，用100mL80丙酮80C回流浸 提lh,抽滤，用80丙酮洗涤滤渣至洗涤液无色，定容，测 定黄酮萃取率。 ③ 热水提取法 准确称取5.00克样品，加入100mL蒸俺水，90C浸提 lh,定容，测定黄酮萃取率。 ④ 碱溶酸沉法 准确称取5.00克样品，加入100mL蒸俺水，煮沸，在 搅拌条件下缓慢加入石灰乳调节pH值为9. 0,在此条件下， 微沸60min,趁热滤布过滤，用90C蒸俺水洗涤滤渣至洗涤 液无色，合并滤液与洗涤液，在60〜70C下用HC1溶液调节 pH值至5.0,搅匀，静置24h,抽滤，用蒸偏水洗涤沉淀物 至中性，真空浓缩干燥得粗提物，用60乙醇配制成样品液, 定容，测定黄酮萃取率。 2 乙醇浓度对黄酮浸出率的影响试验 准确称取5. 00克食用玫瑰，用100mLpH8. 15的不同浓 度乙醇溶液，在8CTC温度下回流浸提2h,抽滤，定容，测 定不同浓度乙醇的黄酮浸出率。 3 浸提温度对黄酮浸出率的影响试验 准确称取5.00克食用玫瑰,用100mLpH8. 15的50乙醇 溶液，在不同温度下回流浸提2h,抽滤，定容，测定不同浸 提温度的多测定黄酮浸出率。 4 浸提时间对黄酮浸出率的影响试验 准确称取5. 00克食用玫瑰叶，用100mLpH8. 15的50 乙醇溶液，在8rc温度下回流浸提不同时间，抽滤，定容， 测定不同浸提时间的测定黄酮浸出率。 5 料液比m/V对黄酮浸出率的影响 准确称取5.00克食用玫瑰，分别用不同体积的pH8. 15 的50乙醇溶液，在8CTC温度下回流浸提2h,抽滤，定容， 测定不同料液比的测定黄酮浸出率。 6 浸提溶剂pH值对黄酮浸出率的影响实验 准确称取5. 00克食用玫瑰，用100mL不同pH值的50 乙醇溶液，在8CTC温度下回流浸提2h,抽滤，定容，测定 不同溶剂pH值的测定黄酮浸出率。 7 正交实验 对影响黄酮浸出率的乙醇浓度、浸提温度、浸提时间、 料液比m/V、浸提溶剂pH值进行正交试验，试验的因素水 平如表所示，以黄酮浸出率为指标，优化浸提工艺条件。 表正交实验因素水平表 2. 结果分析 2. 1食用玫瑰花总黄酮检测方法的建立 在碱性溶液中，黄酮类化合物与衬A13生成红色络合 物，用芦丁试验结果表明在420nm波长处有最大吸收峰。同 时分析得到标准曲线的回归方程，为 Y0. 0007x0. 0362, r0. 9998,表明在 100〜800 只 g/mL 浓度 范围内，浓度与吸光度有良好的线形关系。 2. 2食用玫瑰花黄酮类化合物提取工艺的研究 2.2. 1几种常用的提取方法比较 不同提取方法对食用玫瑰黄酮的萃取率如表1所示。回 流浸提法还可通过调节乙醇浓度，增加食用玫瑰黄酮的的溶 解性，提高提取效率，因此，选择乙醇浸提工艺。 2. 2. 2乙醇浓度对黄酮浸出率的影响 不同乙醇浓度对食用玫瑰黄酮浸提效果表明，当乙醇浓 度小于40时，浸出物中黄酮的浓度随乙醇浓度的增加而迅 速提高。高于此浓度后则增长平缓。当浓度达到80时，黄 酮提取率基本不变。因此，宜采用70左右的醇溶液进行浸 提。 2. 2. 3温度对黄酮浸出率的影响 不同浸提温度的黄酮浸出率表明，不同浸提温度的黄酮 与多酚浸出率差异极显著。40〜8CTC时，随着温度的升高黄 酮与多酚浸出率逐渐增大，这是因为升高温度有利于食用玫 瑰黄酮溶解度增大［5］。宜在60〜8CTC之间进行浸提。 2. 2.4浸提时间对黄酮浸出率的影响 不同浸提时间的黄酮浸出率如图。不同浸提时间的黄酮 浸出率差异极显著。浸提时间在60〜150min之间时，延长 时间可以增加玫瑰黄酮浸出量，提高黄酮浸出率。当时间超 过150min时，玫瑰中的黄酮向溶液扩散速度与溶液中黄酮 向玫瑰扩散的速度达到平衡，高温长时间的蒸煮使黄酮部分 损失，黄酮浸出率降低。 2.2.5料液比m/V对黄酮浸出率的影响 不同料液比的黄酮浸出率如图4所示。方差分析表明， 不同料液比之何差异极显著。料液比小于1 20,增大黄酮 浸出率。当溶剂用量增大到一定限度时，而减少玫瑰黄酮浸 出，因此，料液比130的黄酮浸出率比料液比为1 20的 黄酮浸出率低。 2. 2.6溶剂的PH值对黄酮浸出率的影响 不同溶剂pH值的黄酮浸出率显示说明，因为类黄酮含 有酚羟基，所以碱性乙醇溶液有