铁棒锤中双酯型生物碱测定

铁棒锤中双酯型生物碱测定 【摘要】目的建立铁棒锤中双酯型生物碱快速、简 便、专属性强测定的方法。方法采用分光光度法，使用乌头 碱为对照品。结果回收率为98. 3, RSD为0.72。结论所建 立的方法精密度高，重现性良好，结果准确可靠，可用于铁 棒锤中的双酯型生物碱的测定。 【关键词】铁棒锤；双酯型生物碱 铁棒锤别名八百棒、铁牛七、雪上一枝蒿，毛苣科乌头 属植物铁棒锤 Aconitum szechenyianum Gay.和伏毛铁棒锤 A. flavum Hand. -Mazz,以块根入药。具有祛风止痛，散瘀 止血，消肿拔毒等作用。 铁棒锤收载于2010年版药典一部附录III中，为藏药成 方制剂中的常用药材，同时是具有藏药特色的药材代表，其 同科属植物有附子、川乌等。该科属主要毒性存在于双酯型 生物碱中，为有效地控制药材的质量，同时保证患者的用药 安全，本文通过使用紫外分光光度法以乌头碱计控制了铁棒 锤中双酯型生物碱的含量，从而控制了铁棒锤的质量。 1仪器与试药 1. 1仪器岛津UV-2450型紫外分光光度计；AUW220D型 岛津电子分析天平；KQ-300B型超声波清洗器（昆山市超声 仪器有限公司）；Rotavapor R-20型旋转蒸发仪（瑞士 BUCHI 公司）。 1. 2试药乌头碱对照品（中国药品生物制品检定所），批 号110720-200410；铁棒锤药材（青海金诃藏药药业股份 有限公司）,批号分别为120701、120702、120703。水为 重蒸俺水，其他试剂均为分析纯。 2方法与结果 2.1对照品溶液的制备精密称取乌头碱对照品适量，加 无水乙醇溶解并稀释，制成每1ml无水乙醇溶液含乌头碱 1. Omg的溶液。 2. 2标准溶液的制备精密吸取对照品溶液0、1、2、3、 4、5ml,分别置于25ml量瓶中，加无水乙醇使成5ml,加 3. 5mg/ml盐酸羟胺的60乙醇液1ml、4mol/L的氢氧化钠溶 液1ml,振摇，室温放置15min,加5mol/L的盐酸1ml、水 15ml、9三氯化铁溶液1ml,振摇，使生成的沉淀溶解，加 水至刻度，放置30min即得 2. 3样品溶液的制备取样品3g,精密称定，于250ml具 塞的锥形瓶中，加三氯甲烷50ml. 10氨水2.5ml,超声提 取lh。过滤，残渣用三氯甲烷洗涤3次，合并洗液与滤液， 低温挥干溶剂，残渣用乙醍20ml溶解，用0. 5mol/L的盐酸 萃取3次，每次10mlo酸液用氨水调节PH至10以上，再用 三氯甲烷萃取4次，每次15ml,回收溶剂至干，残渣用无水 乙醇溶解并定容至10ml,摇匀，精密量取3ml于25ml的量 瓶中，加无水乙醇2ml,按“2.2”所述操作，即得。 2. 4测定波长的选择取“2.2”项下空白溶液、标准品溶 液及“2.3”项下样品溶液于200-600nm处进行扫描，结果 表明对照品溶液与供试品溶液在530nm处均有最大吸收，故 确定530nm为检测波长。 2. 6重现性试验取铁棒锤药材样品6份，按总生物碱含 量测定项下方法测定，计算总生物碱含量及其相对标准偏 差。结果表明平均含量为0.135, RSD为0.69,该方法 重复性良好。 2.7回收率试验精密称取已知总生物碱含量的铁棒锤药 材样品6份，分别精密加入乌头碱对照品，按总生物碱含量 测定项下方法测定，计算回收率及其相对标准偏差。结果表 明该测定方法回收率为98.3, RSD为0. 72,回收率良好。 3讨论 铁棒锤中主要活性为生物碱类成分，乌头碱、新乌头碱、 次乌头碱等双酯型生物碱类成分为铁棒锤中重要的活性成 分及毒性成分，现代药理已经证明具有镇痛、消炎、局麻等 作用，在药材的质量评价及毒性控制方面具有中药的意义。 乌头碱、新乌头碱、次乌头碱现代测定方法多以HPLC 法进行分离测定，本文也曾采用药典中川乌的双酯型生物碱 测定方法测定铁棒锤，但效果不理想。考虑双酯型生物碱绝 非只有上述3种，本文通过植化的方法将双酯型生物碱进行 富集，通过紫外分光光度法进行测定，通过方法学验证试验 证明，该法简便、可靠、重复性高，可用于铁棒锤的质量控 制。 参考文献 [1] 国家药典委员会编.中华人民共和国卫生部标准藏 药第一册,1955 79-85. [2] 朱敏，肖培根.常用藏药榜嘎的研究[J].中成药， 1989, 12 10 17-19. [3] 张义智.唐古特乌头研究进展[J].中国民族医药杂 志，2012 年 1 期70-73. [4] 陈燕，易进海.HPLC法测定藏药药材铁棒锤、榜嘎中 双酯型生物碱的含量[J].世界科学技术，2009年第11卷第 4 期570-573.