化妆品中乌洛托品的测定 液相色谱-串联质谱法

ICS 71.100.70 CCS Y 42 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T XXXXXXXXX 化妆品中乌洛托品的测定 液相色谱–串联 质谱法 Determination of hexamethylenetetramine in cosmetics Liquid chromatography – tandem mass spectrometry （征求意见稿） XXXX - XX - XX 发布 XXXX - XX - XX 实施 国家市场监督管理总局国家市场监督管理总局 国家标准化管理委员会国家标准化管理委员会 发布 GB/T XXXXXXXXX 1 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020标准化工作导则 第 1 部分标准化文件的结构和起草规则的规定起 草。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别专利的责任。 本文件由中国轻工业联合会提出。 本文件由全国香料香精化妆品标准化技术委员会（SAC/TC 257）归口。 本文件起草单位***。 本文件主要起草人***。 GB/T XXXXXXXXX 2 引引 言言 本文件的被测物质是我国化妆品安全技术规范（2015 年版）规定的禁用原料。 禁用原料是指不得作为化妆品原料使用的物质。化妆品安全技术规范（2015 年版）规定若技 术上无法避免禁用物质作为杂质带入化妆品时，国家有限量规定的应符合其规定；未规定限量的，应进 行安全性风险评估，确保在正常、合理及可预见的使用条件下不得对人体健康产生危害。 目前我国尚未规定该物质的限量值，本文件的制定，仅对化妆品中测定该物质提供检测方法。 GB/T XXXXXXXXX 3 化妆品中乌洛托品的测定 液相色谱-串联质谱法 警示使用本文件的人员应有正规实验室工作的实践经验。本文件并未指出所有可能的安全问题。 使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关规定的条件。 1 范围 本文件描述了化妆品中乌洛托品的液相色谱串联质谱测定方法的原理、试剂和材料、仪器设备、试 样制备和试验步骤、试验数据处理、回收率和精密度等内容。 本文件适用于水剂类、膏霜类和乳液类化妆品中乌洛托品的测定。 本文件方法检出限为0.10 mg/kg，定量限为0.20 mg/kg。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 术语和定义 本文件没有需要界定的术语和定义。 4 原理 试样经20乙腈溶液涡旋振荡， 超声提取， 离心， 正己烷液液萃取净化过滤后， 得到目标物待测溶液。 将目标物待测溶液注入液相色谱-串联质谱仪，以保留时间和相对离子丰度定性，内标法定量。 5 试剂和材料 除非另有规定，仅使用色谱纯试剂。 5.1 水GB/T 6682，一级。 5.2 乙腈色谱纯。 5.3 乙酸铵色谱纯。 5.4 正己烷色谱纯。 5.5 20乙腈溶液取 20 mL 乙腈（5.2），用水（5.1）稀释至 100 mL，混匀。 5.6 乙酸铵溶液（0.005 mol/L）称取 0.3854 g 乙酸铵（5.3），用水（5.1）溶解并稀释至 1 L，混匀。 5.7 乌洛托品标准物质纯度不小于 99，标准物质的英文名称、CAS 号、分子式、相对分子质量及化 学结构式见附录 A 表 A.1。 GB/T XXXXXXXXX 4 5.8 乌洛托品内标（乌洛托品-D12）纯度不小于 99，乌洛托品-D12的英文名称、CAS 号、分子式、 相对分子质量及化学结构式见附录 A 表 A.1。 5.9 标准储备液（ρ1000 g/mL）准确称取适量标准物质（5.7）（精确至 0.000 1 g）置于 10 mL 棕 色容量瓶中，用乙腈（5.2）溶解并定容至刻度，即得质量浓度为 1000 g/mL 的标准储备液，于-20℃或 以下避光保存，可保存 1 个月。 5.10 内标储备液（ρ1000 g/mL）准确称取适量内标物质（5.8）（精确至 0.000 1 g），置于 10 mL 棕色容量瓶中，用乙腈（5.2）溶解并定容至刻度，即得质量浓度为 1000 g/mL 的内标储备液，于-20℃ 或以下避光保存，可保存 1 个月。 5.11 内标中间工作液（ρ5.0 g/mL）准确移取内标储备液 0.050 mL，置于 10 mL 棕色容量瓶中， 用乙腈（5.2）定容至刻度，即得质量浓度为 5.0 g/mL 的内标中间工作液，现配现用。 5.12 滤膜孔径 0.22 m，材质为聚四氟乙烯。 6 仪器设备 6.1 液相色谱-串联质谱仪配有电喷雾离子源。 6.2 分析天平感量 0.001 g 和 0.000 01 g。 6.3 漩涡振荡器。 6.4 超声波清洗仪工作频率不低于 40 kHz。 6.5 离心机最高转速不低于 4 000 r/min。 7 试样制备和试验步骤 7.1 试样制备 取样前应将样品充分混匀。水剂类样品将样品摇匀后取样；膏霜类、乳液类样品将样品挤出、混匀 后取样。 称取0.5 g（精确至 0.00 1 g）试样，置于25 mL 具塞比色管中，准确加入0.400 mL内标中间工作溶液 （5.0 g/mL）（5.10），涡旋混合均匀。准确加入8 mL 20乙腈（5.5），具塞后涡旋混合均匀，超声10 min，冷却至室温后定容至刻度（V1）。加入5 mL正己烷（5.4），涡旋混匀，于4000 r/min离心5 min，取 1 mL（V2）下层清液用20乙腈（5.5）稀释至10 mL（V3），经微孔滤膜过滤后待测。 7.2 测定 7.2.1 液相色谱参考工作条件 液相色谱参考工作条件如下 a 色谱柱低密度C18键合的硅胶反向色谱柱，1.8 μm，100 mm 2.1 mm（内径），或相当者； b 流动相乙腈（5.2）和乙酸铵溶液（0.005 mol/L）（5.6），梯度洗脱条件见表1； c 流速0.3 mL/min； d 柱温30 ℃； e 进样量5 μL。 表1 液相色谱梯度洗脱条件 时间/min 乙腈/ 乙酸铵溶液（0.005 mol/L）/ GB/T XXXXXXXXX 5 0.0 5 95 1.0 5 95 3.5 95 5 6.0 95 5 6.1 5 95 8.0 5 95 7.2.2 质谱参考工作条件 质谱参考工作条件如下 a 离子源电喷雾离子源（ESI）； b 扫描方式正离子扫描； c 喷雾电压5500 V； d 离子源温度400℃； e 雾化气压力0.276 MPa； f 辅助气压力0.414 MPa； g 气帘气压力0.276 MPa； h 检测方式多反应监测（MRM）； i 母离子、子离子、去簇电压及碰撞电压见表2。 表 2 乌洛托品及其内标的质谱参数