【毕业设计-医学论文】脑胶质瘤组织中pcna和pten表达的意义

脑胶质瘤组织中PCNA和PTEN表达的意义 作者孟喜君，刘勇，工茂德，谢万福 【摘要】 目的探讨增殖细胞核抗原PCNA和第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因 PTEN在脑胶质瘤组织中表达差异的临床意义.方法采用组织芯片技术建立96例脑胶质 瘤和22例正常脑组织的组织芯片，并用免疫组织化学Elivision法，分别检测PTEN和PCNA 在不同组织学类型和不同组织学分级的人脑胶质瘤组织和正常脑组织中的表达差异.结果 PCNA和PTEN在脑胶质瘤组织中的表达与在正常脑组织中的表达之间的差别有显著意义； PTEN在星形细胞瘤中的表达阳性率45/78 57. 7显著高于其在非星形细胞瘤中的表达阳性 率 5/18 27. 8 P 【关键词】 胶质瘤；增殖细胞核抗原；磷酸脂酶 [Abstract] AIM To investigate the clinical significance of the differential expressions of PCNA and PTEN in glioma tissue and normal brain tissue. S Tissue microarray including 96 gliomas and 22 normal brain tissues was prepared. The expressions of PCNA and PTEN in glioma tissue and normal brain tissue with different histological typesand different histological grades were detected by Elivision of immunohistochemistry. RESULTS The positive expression rates of PCNA and PTEN had significantly difference between glioma tissue and normal brain tissue P [Keywords] g1i oma;PTEN;PCNA 0引言 脑胶质瘤是颅内最常见的肿瘤之一，随着肿瘤级别的增加，其恶性度也加大，对于恶性胶 质瘤目前尚无有效的治疗手段，如何提高胶质瘤患者的生存率一直是神经外科界迫切需要解 决的难题.我们采用免疫组织化学方法，观察增殖细胞核抗原proliferating cell nuclear ant igen, PCNA和第10号染色体缺失性磷酸酶和张力蛋白同源物基因phosphatase and tensin homology deleted on chromosome 10, PTEN在不同性别、年龄、肿瘤大小、组织 学类型和组织学分级的脑胶质瘤和正常脑组织中的表达情况.探讨脑胶质瘤组织中PCNA和 PTEN表达的意义，旨在从蛋白水平研究脑胶质瘤的发病原因，为临床寻找脑胶质瘤的病因 提供理论参考和依据. 1材料和方法 1. 1材料1997/2005西安交通大学医学院第一附属医院脑胶质瘤存档蜡块96男45,女51 例；年龄14〜77平均46.5岁，其中W45岁者56例，45岁者40例.参照WHO 1999 神经系统肿瘤分类标准进行组织学分型和分级，星形细胞瘤78例，节细胞胶质瘤4例， 恶性室管膜瘤6例，室管膜母细胞瘤2例，少突胶质细胞瘤4例，促纤维增生形细胞瘤2 例；I级胶质瘤19例，II级胶质瘤28例，III级胶质瘤29例，IV级胶质瘤20例；胶质瘤W 4 cm者34例，〉4 cm者62例.另外取正常脑组织22例作为对照.全部标本经40 g/L甲 醛固定，常规石蜡包埋，复查HE切片，在HE切片上找到肿瘤细胞伏击的区域并对照蜡块的 相应的位置作标记，确定取材位点.用制备组织芯片的空心蜡模模具制作内径为2 mm的空 心蜡模.用内径为2 mm的组织芯片取样器在蜡块的标记位点取出组织蜡芯，并将其轻放入 空心蜡模的孔中，按照一定的顺序安放所有的肿瘤组织蜡芯，制作成组织微阵列并对组织芯 片蜡块进行4 um连续切片，裱褶于APES防脱片胶预处理的载玻片上，待行免疫组织化学 染色. 1.2方法免疫组织化学染色操作流程参照Elivision说明书，一抗PCNA抗体稀释浓度为1 80, PTEN抗体稀释浓度为1 20,二抗酶标羊抗鼠/兔聚合物，DAB显色，苏木素复染，以 PBS替代一抗作为阴性对照，用已知PCNA和PTEN阳性的前列腺癌切片作阳性对照.PCNA 阳性结果为肿瘤细胞细胞核染成棕黄色或者棕褐色.参考文献［1］的标准，以图像分析仪 双盲法阅片，每个标本观察200倍光镜下视野，每个视野记数100个细胞根据PCNA阳性细 胞占肿瘤细胞百分率，将其分为4级I级125; II级26〜50; III级51 75;IV 级75.其中I〜II级为弱阳性, III〜IV级为强阳性.PTEN以肿瘤细胞细胞浆内 出现棕黄色颗粒为阳性.参考文献［2］的标准，按染色强度评分0分为无色，1分为淡黄 色，2分为棕黄色，3分为棕褐色.再按阳性细胞所占的百分比评分0分为阴性，1分为阳 性细胞10, 2分为11〜50, 3分为51〜75, 4分为75;染色强度与阳性细胞百 分比的乘积912分为强阳性,5〜8分为弱阳性, 0〜4分为阴性-. 统计学处理采用SPSS 11. 0统计学软件进行数据处理，采用x 2检验和Spearman相关分 析，分析PTEN蛋白和PCNA抗原的表达与各临床，病理指标的相互关系. 2结果 2. 1脑胶质瘤组织PCNA和PT刖的表达脑胶质瘤组织PCNA的表达图1A, B, C阳性率为 67. 7 65/96,正常脑组织为9. 1 2/20,差异显著P0. 01；脑胶质瘤组织PTEN的 表达图ID, E, F阳性率为52. 1 50/96,正常脑组织为95. 5 21/22,差异显著P 0.01 . PCNA的表达与组织学分型和分级有关表1. 2. 2PTEN表达与组织分化程度的关系PTEN在高分化脑胶质瘤组织学分级I〜II级组织 中表达阳性率为68. 1 32/47,高于在低分化脑胶质瘤组织学分级III〜IV级组织中 表达阳性率36. 7 18/49,差异有统计学意义PV0.01.在脑胶质瘤患者中随着组织 学分级的升高，PTEN的表达量呈下降趋势.PTEN在星形细胞瘤中的表达阳性率57. 7 45/78,与PTEN在非星形细胞瘤中的表达阳性率27.8 5/18比较，差异有统计学意 义PC0.05,表 1. 图1脑胶质瘤组织PCNA和PT刖的阳性表达略 表1胶质瘤组织学分级和分型与PCNA和PTEN表达略 I〜II 级与 III-IV 级比较x 214. 8412, P0. 0001； x 2