skp2和p27kip1蛋白在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达及意义

Skp2和P27kip1蛋白在非霍奇金淋巴瘤组织中的表达 及意义 ［摘要］目的探讨S激酶相关蛋白2 SkP2和P27kipl蛋白在非霍 奇金淋巴瘤NHL患者病程中表达的临床意义及二者相关性。方法采 用免疫组化SP染色法对42例NHL患者的Skp2和P27kipl蛋白进行检测, 分析二者与临床预后的关系。结果单因素分析结果显示全身症状、 Ann-Arbor分期、国际预后指数IPI、ps评分、Skp2与P27kipl对NHL 患者的总生存率有影响P0. 05o多因素分析结果显示P27kipl、IPK Ann-Arbor分期是NHL独立的预后因素P 0. 05。SkP2和P27kipl蛋 白在NHL患者病程中的表达呈负性相关r -0. 38L P 0.013。结 论P27kipl、IPK Ann-Arbor分期对评估NHL患者的预后具有重要价值， 可作为预测NHL临床疗效和判断预后的参考指标。 ［关键词］S激酶相关蛋白2； P27kipl；非霍奇金淋巴瘤；预后 ［中图分类号］R733. 4 ［文献标识码］A ［文章编号］1673-7210 2013 04 a -0014-03 非霍奇金淋巴瘤NHL在我国的发病率较高，影响其预后的因素有 很多，如年龄、全身状态、国际预后指数IPI、Ann-Arbor分期、ps评 分等。近些年来研究发现，除了上述临床因素，仍有一些其他的因素影响 NHL患者的预后。S激酶相关蛋白2 SkP2和P27 kipl蛋白在NHL组织 中的表达逐渐引起国内外学者的关注。Skp2是细胞增殖周期中的一个重要 因子，主导细胞周期从G1期进入S期的转化。P27kipl是一种抑癌基因， 对细胞增殖起负性调节作用，在肿瘤患者中其表达水平多异常。Skp2、 P27kipl在NHL中的表达国内外均有相关报道，通过检测Skp2、P27kipl 在NHL患者中的表达，分析其预后状况，可以指导患者的临床治疗。本文 通过免疫组化法检测Skp2、P27kipl在NHL患者中的表达情况，并对42 例NHL患者进行临床随访，获得了比较详细的临床资料，分析二者的相关 性及对临床预后的影响，为判断患者的病情及预后提供新的参考依据。 1对象与方法 1. 1研究对象 本研究收集山东省单县正大医院2005年7月〜2010年7月42例资料 比较完善的NHL患者的临床资料，均经病理证实，有免疫组化病理标本， 取材均为肿瘤组织，并于病理科收集患者石蜡标本。入组患者中，男26 例，女16例，年龄2771岁，中位年龄58岁；根据Ann-Arbor分期标 准进行分期，I期20例，II期16例，III-IV期6例；IPI 0分14例，1 分20例，N2分8例；病理类型B淋巴细胞型28例，T淋巴细胞型9例， 其他5例。 1. 2治疗方法 全组NHL患者均采用化疗，化疗方案主要为CHOP方案（环磷酰胺、 阿霉素或表阿霉素、长春新碱、激素），每21天为1个化疗周期，部分采 用其他化疗方案（COP、E-CHOP或R-CHOP）。化疗期间患者主要出现恶心、 呕吐、腹泻、纳差等消化道症状，贫血、白细胞、血小板下降等骨髓抑制 反应，或伴有脱发，严重者可能出现多脏器功能损害，临床上给予对症处 理，化疗后多数患者症状逐渐缓解。 1. 3检测方法 首先查阅42例NHL患者的原始病案登记资料，根据病理登记号及原 始病理申请单，查找到患者最原始HE切片的记录结果，然后找到所需的 石蜡块。用切片机进行蜡块切片，切片厚度为4 um,连续切片4张，置 于60 C烤箱1 h备用。实验操作按鼠Streptavidin-HRP免疫组化染色 试剂盒说明书进行。鼠抗Skp2抗体工作液和鼠抗P27抗体工作液均购自 北京中杉生物制剂有限公司，其他试剂购自华泽生物试剂有限公司。 1.4染色判断标准 Skp2蛋白阳性为细胞浆内出现棕黄色颗粒；P27kipl蛋白阳性表达为 细胞核内出现棕黄色颗粒。以试剂盒所带的阳性切片进行免疫组化染色， 作为阳性对照；以生理盐水代替一抗行免疫组化染色，作为阴性对照。 1.5随访 所有患者进行电话随访，随访截至2010年12月31日，随访中位时 间为40个月。总生存时间是指从疾病确诊日期至患者死于任何疾病、最 后随诊或截止观察日期。无病生存时间指治疗后达临床完全缓解（CR）之 日至肿瘤复发进展、最后随诊或截止观察日期。截至最后随诊时间全组死 亡15例。 1. 6统计学方法 2结果 2. 1生存情况 2.4预后影响因素分析 3讨论 SkP2在正常组织中表达较低或不表达，主要存在于肿瘤细胞周期的S 期，其在调控细胞周期中起重要作用。Skp2作为干细胞因子SCF复合 体的底物识别亚基，特异性的识别磷酸化底物，促使泛素-蛋白酶体途径 降解，许多细胞周期中的调控因子、转录因子都是通过此种途径降解。 Traub等［1］研究发现，Skp2的高表达与乳腺癌的发生、疾病进展及其临 床预后等有密切相关性，其高表达促进了恶性肿瘤细胞的增生。国内陆建 明等［2］对72例B-NHL患者研究发现，Skp2在侵袭性B-NHL组的表达高于 惰性B-NHL组。陈燕坪等［3］对60例弥漫大B细胞淋巴瘤中Skp2的表达 研究结果示,Skp2的表达与弥漫大B细胞淋巴瘤的临床疗效密切相关,Skp2 的表达越强，患者的疗效越差。从而表明弥漫大B细胞淋巴瘤组织中Skp2 的表达，可作为指导临床治疗的参考指标，有助于改善疾病疗效和预后。 陆晔等［4］报道，在NHL高危患者中，Skp2多呈现高表达，并指出Skp2高 表达提示NHL患者的临床特征及预后较差。闵大六等［5］对96例弥漫大B 细胞淋巴瘤患者的研究结果显示Skp2蛋白的表达与弥漫大B细胞淋巴瘤 患者的Ann-Arbor分期、结外病灶数、全身症状、乳酸盐脱氢酶LDH 水平有显著相关性，间接影响着患者的预后。但是本研究结果显示，Skp2 表达与NHL预后无明显相关性，Skp2阴性组与阳性组患者5年生存率差异 无统计学意义P 0.05o本研究认为，在NHL患者中Skp2的临床表达 并不能指导患者的临床预后，但对其他恶性肿瘤的预后是否有影响尚待进 一步研究。P27kipl是一种抑癌基因，其负性调节细胞增殖，通过 抑制细胞周期中各种蛋白和酶的活性，从而抑制细胞从G1期到S期的转 化，致使细胞周期停滞，不能增殖。国外报道在膀胱癌及肝内胆管癌患者 中P27kipl蛋白的表达与预后密切相关，P27kipl蛋白低表达组患者的存 活率显著低于P27kipl蛋白高表达组，且P27kipl低表达的患者复发率更 高，预后更差［6-10］ o肖晖等［11］对NHL患者P27kipl蛋白的表达水平进 行检测，并分析其影响因素发现，NHL组织分化程度干扰P27kipl蛋白的 表达。Lu等［12］应用免疫组化技术监测92例NHL患者P27kipl表达，发 现P27kipl表达水平越高，NHL的增殖活性越差，肿瘤侵袭性也随之下降, 反之亦然。本研究中，P27kipl阳性组患者5年总生存率高于阴性组，差 异有统计学意义P 0.05o