Tween―20在免疫组化染色中应用体会

Tween20在免疫组化染色中应用体会 【摘要】目的探讨表面活性剂Tween-20对免疫 组化制片的影响。方法使用加入Tween-20的PBS缓冲液 以及未加入Tween-20的PBS缓冲液分别对免疫组化切片进 行冲洗，观察染色结果，并复习相关文献。结果 PBS-Tween-20缓冲液冲洗的免疫组化切片抗体用量偏少，无 需用吸水纸擦拭，非特异性染色减少。结论应用 PBS-Tween-20缓冲液冲洗免疫组化切片，不仅节省抗体的用 量，节约医疗成本，并且使组织切片清洁得更干净，避免了 非特异性染色的发生，值得推广。 【关键词】Tween-20；免疫组化；非特异性染色 表面活性剂Tween-20为聚氧乙烯去水山梨醇单月桂酸 酯和一部分聚氧乙烯双去水山梨醇单月桂酸酯的混合物，亲 水性强，为一种非离子型去污剂，能增加乳剂的稳定性。也 可作。2006-2012年龙里县流行性腮腺炎疫情资料分析 神经阻滞联合甲钻胺注射液治疗带状疱疹后神经痛效果观 察保定市2004〜2011年急性弛缓性麻痹病例监测系统运 转情况分析 早产儿经下肢置入PICC20例的方法探讨 129例2型糖尿病患者合并恶性消化道肿瘤临床分析 绝经 后妇女取宫内节育器92例临床分析 高血压性脑出血156 例临床分析 蒙古族老年人慢性房颤（AF） 319例抗凝治疗 分析 浅谈产后出血的原因及防治措施 80例老年口腔 修复临床分析 不育不孕症夫妇生殖道分泌物衣原体和支 原体检测结果分析 头静脉修剪高位重建动静脉内痿11例 老年获得性肺炎的临床特点及预后分析 2012年昆明市五 华区居民死亡原因分析 探讨钞票对健康促进的影响 呼吸内科感染常见病原菌与相关因素 南宁市吴坏镇健康 人丙氨酸氨基转移酶参考值的制订老年恶性骨肿瘤54例 误诊原因分析 带状疱疹病人的健康教育方式及效果评价 承-H 铜脑签苗痢匝棒（ID置庖咦榛g讨屑尤肓 ween-20的PBS缓冲液冲洗切片，能够使切片更清洁，非 特异性染色减少。本文对分别经过PBS-Tween-20缓冲液及 PBS缓冲液冲洗的免疫组化切片进行对照，并将应用体会介 绍如下。 1材料与方法 1. 1材料 PBS 磷酸盐缓冲液（0. 01mol/L, PH7. 2-7. 4）、Tween-20、 500ml容量瓶、 吸水纸，均购自福建迈新试剂有限公司。 1. 2方法 取500ml已配制好的PBS磷酸盐缓冲液置容量瓶中，加 入250 ul Tween-20,充分混匀，待用。现将经抗原修复后 的组织切片分成3组（A、B、C）放入蒸偏水中备用。 A组常规PBS磷酸盐缓冲液冲洗后，专用免疫组化油 笔划圈。 B组PBS-Tween-20缓冲液冲洗后，专用免疫组化油笔 划圈。 C组专用免疫组化油笔划圈后，PBS-Tween-20缓冲液 冲洗。 将3组处理过的切片进行同样的免疫组化后续操作。 2结果 A组在抗体孵育过程中，抗体用量偏多，无需用吸水纸 擦拭，同时还有个别组织边缘干燥，发生了边缘效应。 B组在抗体孵育过程中，抗体用量偏少，但每次滴加抗 体前均需用吸水纸擦拭，未发生组织边缘干燥。 C组 在抗体孵育过程中，抗体用量偏少，无需用吸水 纸擦拭，未发生组织边缘干燥。 3讨论 本实验室免疫组化染色标本例数多，量大，半个工作日 出片，由于一抗、二抗的孵育时间以及显色时间比较固定， 这就要求在操作过程中尽量减少操作时间，并且尽可能地降 低非特异性染色。A组虽然免疫组化油笔的使用节省了时间， 但只能防止滴加的试剂不向四周流失，如果组织偏大就无法 保证一次性将滴加的试剂完全覆盖整个组织，只有增加抗体 用量将组织全部覆盖，抗体用量偏多，并且可能导致抗体覆 盖不均，增加边缘效应、非特异性染色等。B组PBS-Tween-20 缓冲液冲洗后，玻片上含有Tween-20,用吸水纸擦拭后使用 免疫组化油笔划的圈不能与玻片充分结合，再次冲洗后划痕 被Tween-20溶解，不能保持完整性，需用吸水纸另外擦拭 干水分，耽误时间。相比之下C组划圈后和玻片充分结合， 再用PBS-Tween-20缓冲液冲洗，划痕不被溶解，将其倾斜 在吸水纸上，划痕能保持完整性，不用吸水纸另外擦拭，节 省不少时间。 Tween-20为聚氧乙烯去水山梨醇单月桂酸脂和一部分 聚氧乙烯双去水山梨醇单月桂酸脂的混合物。由于其分子中 有较多的亲水性基团（聚氧乙烯基），故亲水性强，具有乳 化、扩散、增溶、稳定等性能，是一种常用的非离子性去垢 剂和表面活性剂，对人体无害、无刺激性，常用为医药品的 乳化剂、扩散剂和稳定剂。用其多次冲洗能够均匀覆盖整张 切片，如同在切片上增加了一层液体膜，不会使组织和切片 空白区形成明显的分界线，在离组织边缘